一种共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物及其制备方法，涉及药物合成技术领域。本发明专利技术制备的共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物，包括载体、吲哚菁绿和抑制剂。本发明专利技术首先制备FRMONs载体，然后搭载ICG和PDE5i建立声动力工程纳米平台，具有铃铛型结构的载体使粒子内双散射能够在声动力学过程中产生大量的活性氧，丰富的ROS积累可以直接杀死肿瘤细胞，释放抗原并激活系统性免疫反应，同时共同加载的PDE5i抑制剂还可以释放NO以促进血管正常化。管正常化。管正常化。

【技术实现步骤摘要】
一种共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及药物合成
，尤其涉及一种共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物及其制备方法。

技术介绍

[0002]随着纳米科学技术的飞速发展，各种各样的有机或无机材料被制成纳米结构用于生物医学领域，尤其是利用纳米材料作为药物载体用于疾病治疗得到了越来越广泛的关注。
[0003]乳腺癌是临床上最常见的肿瘤之一，其发病率逐年攀升，严重威胁着人类的身体健康。三阴性乳腺癌往往恶性程度高，治疗难度大，且转移时间早，发现时多已到中晚期，失去了手术治疗的机会。因此开发具有抗肿瘤活性的药物是目前要解决的重要问题。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术提供了一种共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物及其制备方法，通过搭载声动力工程纳米平台，其中铃铛型结构的载体使粒子内双散射能够在声动力学过程中产生大量的活性氧(ROS)。丰富的ROS积累可以直接杀死肿瘤细胞，释放抗原并激活系统性免疫反应，此外，共同加载的磷酸二酯酶5抑制剂(PDE5i)还可以释放NO以促进血管正常化。
[0005]一种共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物，其特征在于，
[0006]包括载体、吲哚菁绿和抑制剂；
[0007]所述载体为FRMONs；
[0008]所述抑制剂为磷酸二酯酶5抑制剂；
[0009]所述仿生纳米药物中吲哚菁绿载药率是为4～5％；磷酸二酯酶5抑制剂的载药率为7～8％；
[0010]所述载体的制备方法包括以下步骤：
[0011](1)制备固体二氧化硅纳米球(s
‑
SiO2)：
[0012]将去离子水、氨溶液和无水乙醇混合，然后在30℃下的恒温水浴中以300rpm的搅拌速度预热30～40分钟；向上述混合溶液中缓慢加入原硅酸四乙酯，在30℃，300rpm的搅拌速度下水解反应45～50分钟，得到固体二氧化硅纳米球；
[0013](2)固体二氧化硅纳米球包覆处理：
[0014]向步骤(1)制备的固体二氧化硅纳米球中加入TEOS(正硅酸乙酯)和PDES(磷酸二酯酶)的混合物，并在25～30℃下以450～500rpm的搅拌速度将具有疏水杂化层的纳米球包覆1小时；然后在25℃下以12000rpm离心10分钟，弃掉上清液，并用去离子水洗涤3次；然后再以5000rpm离心5min后，弃上清液，收集纳米沉淀；
[0015](3)FRMONs(氟化铃铛型介孔有机硅纳米粒子fluorinated rattle
‑
type mesoporous organosilicananoparticles)的合成：
[0016]将Na2CO3溶解在去离子水中，制备Na2CO3溶液，然后将步骤(2)收集的纳米沉淀通过超声振动重新分散在Na2CO3溶液中；在60℃，250rpm的搅拌速度下蚀刻7～10分钟，然后以3000rpm离心5分钟得到FRMON，向FRMON中加入去离子水以重新悬浮FRMON，以5000rpm离心洗涤FRMON两次，保存备用。
[0017]优选的，步骤(1)所述去离子水、氨溶液、无水乙醇和原硅酸四乙酯的体积比为5:1.5～2:35～40：3～5。
[0018]优选的，步骤(2)所述TEOS和PDES的混合物中，TEOS和PDES的体积比为2.5～3:1～1.5。
[0019]优选的，步骤(2)所述TEOS和PDES的混合物与固体二氧化硅纳米球的体积比为3.5～4.5mL：20～25mg。
[0020]优选的，步骤(3)所述Na2CO3溶液的浓度为0.06～0.07g/mL。
[0021]优选的，步骤(3)所述Na2CO3溶液与纳米沉淀的体积质量比为50～60mL：25～30mg。
[0022]优选的，步骤(3)所述重新悬浮过程中，去离子水与FRMON的体积质量比为20～30mL：20～25mg。
[0023]优选的，包括以下步骤：
[0024]S1、分别制备吲哚菁绿(ICG)溶液和磷酸二酯酶5抑制剂(PDE5i)溶液；将吲哚菁绿溶液与磷酸二酯酶5抑制剂按照1～2：1～2的比例混合，得到混合溶液；
[0025]S2、在500rpm连续搅拌的条件下，在8h内用微量滴定器将FRMON样品加入到步骤S1的混合溶液中，得到FRMON分散体，在室温下再反应24h，以5000rpm离心5分钟后，收集沉淀物并用无水乙醇洗涤两次，用去离子水洗涤一次，得到所述共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物；所述无水乙醇及去离子水与沉淀的体积质量比为25mL：10～15mL：5mg；
[0026]S3、将所述共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物重新悬浮并储存在PBS溶液中，所述PBS溶液与仿生纳米药物的体积质量比为25～30mL：5mg。
[0027]优选的，步骤S1所述吲哚菁绿溶液的浓度为10mg/mL；磷酸二酯酶5抑制剂溶液的浓度为20mg/mL。
[0028]优选的，步骤S2所述FRMON分散体的浓度为5mg/mL。
[0029]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术制备的共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物，通过建立声动力工程纳米平台，其中铃铛型结构的载体使粒子内双散射能够在声动力学过程中产生大量的活性氧(ROS)。丰富的ROS积累可以直接杀死肿瘤细胞，释放抗原并激活系统性免疫反应，此外，共同加载的磷酸二酯酶5抑制剂(PDE5i)还可以释放NO以促进血管正常化。
附图说明
[0030]图1为FRMON的透射电镜图；
[0031]图2为FRMON BET分析图；
[0032]图3为FRMON的紫外吸收光谱分析图；
[0033]图4装载不同药物后纳米粒子的DLS粒径图；
[0034]图5为装载不同药物后纳米粒子的ZETA电位变化图；
[0035]图6为装载不同药物后纳米粒子的红外光谱图；
[0036]图7为ICG/PDE5i@FRMON中ICG的释放曲线；
[0037]图8为ICG/PDE5i@FRMON中PDE5i的释放曲线；
[0038]图9为FRMON纳米粒子超声之后发生声波折射示意图；
[0039]图10为不同纳米药物ESR信号图(以TEMP为捕获剂)；
[0040]图11为不同纳米药物DPBF消耗图；
[0041]图12为不同组纳米药物处理后肿瘤细胞ROS和NO荧光染色图；
[0042]图13为不同组纳米药物处理后肿瘤细胞ROS的半定量分析结果；
[0043]图14为不同组纳米药物处理后肿瘤细胞NO的半定量分析结果；
[0044]图15为不同组纳米药物对肿瘤细胞治疗后，形成的肿瘤菌落光镜；
[0045]图16为不同组纳米药物对肿瘤细胞治疗后，肿瘤菌落的定量结果；
[0046]图17为聚合酶链式反应(PCR)检验正常血管基因和血管正常化基因结果；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物，其特征在于，包括载体、吲哚菁绿和抑制剂；所述载体为FRMONs；所述抑制剂为磷酸二酯酶5抑制剂；所述仿生纳米药物中吲哚菁绿载药率是为4～5％；磷酸二酯酶5抑制剂的载药率为7～8％；所述载体的制备方法包括以下步骤：(1)制备固体二氧化硅纳米球：将去离子水、氨溶液和无水乙醇混合，然后在30℃下的恒温水浴中以300rpm的搅拌速度预热30～40分钟；向上述混合溶液中缓慢加入原硅酸四乙酯，在30℃，300rpm的搅拌速度下水解反应45～50分钟，得到固体二氧化硅纳米球；(2)固体二氧化硅纳米球包覆处理：向步骤(1)制备的固体二氧化硅纳米球中加入TEOS和PDES的混合物，并在25～30℃下以450～500rpm的搅拌速度将具有疏水杂化层的纳米球包覆1小时；然后在25℃下以12000rpm离心10分钟，弃掉上清液，并用去离子水洗涤3次；之后再次以5000rpm离心5min后，弃上清液，收集纳米沉淀；(3)FRMONs的合成：将Na2CO3溶解在去离子水中，制备Na2CO3溶液，然后将步骤(2)收集的纳米沉淀通过超声振动重新分散在Na2CO3溶液中；在60℃，250rpm的搅拌速度下蚀刻7～10分钟，然后以3000rpm离心5分钟得到FRMON，向FRMON中加入去离子水以重新悬浮FRMON，以5000rpm离心洗涤FRMON两次，保存备用。2.根据权利要求1所述共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物，其特征在于，步骤(1)所述去离子水、氨溶液、无水乙醇和原硅酸四乙酯的体积比为5:1.5～2:35～40：3～5。3.根据权利要求1所述共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物，其特征在于，步骤(2)所述TEOS和PDES的混合物中，TEOS和PDES的体积比为2.5～3:1～1.5。4.根据权利要求1所述共载吲哚菁绿和抑制剂的仿生纳米药物，其特征在于，步骤(2...

【专利技术属性】
技术研发人员：王夺，刘军杰，张坤，罗涛，
申请(专利权)人：广西医科大学附属肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：