丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用制造技术

本发明专利技术公开了丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，包括以下步骤：步骤一：实验材料准备：从昆明医科大学动物实验中心获取60只balb/c小鼠作为实验对象；步骤二：实验试剂准备：(200、100、50mg

【技术实现步骤摘要】
丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用


[0001]本专利技术属于药物研制
，具体涉及丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用。

技术介绍

[0002]内毒素血症是由于血中细菌或病灶内细菌释放出大量内毒素至血液，或输入大量内毒素污染的液体而引起的一种病理生理表现。内毒素血症分为内源性和外源性两大类。内毒素血症临床症状主要决定于宿主对内毒素的抵抗力。症状和体征有：发热，白细胞数变化，出血倾向，心力衰竭、肾功能减退、肝脏损伤、神经系统症状，以及休克等。内毒素血症可以出现在多系统的多种疾病中，通常导致致死性感染性休克、多器官功能衰竭、弥漫性血管内凝血等，病死率极高。
[0003]据资料表明丽江糙苏具有一定药效功能，但是现有药物研究技术中并未有相关丽江糙苏对于治疗内毒素血症的药效功能研究，从而无法了解丽江糙苏对治疗内毒素血症的作用效果，因此需要对丽江糙苏对治疗内毒素血症进行研究，为相关抗炎镇痛药研发提供基础理论。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，包括以下步骤：
[0006]步骤一：实验材料准备，从昆明医科大学动物实验中心获取60 只balb/c小鼠作为实验对象。
[0007]步骤二：实验试剂准备，(200、100、50mg
·
kg
‑1)糙苏醇提物溶液(1ml/100g)、生理盐水溶(1ml/100g)、阿司匹林(80 mg
·
kg
‑1)、0.9％氯化钠、LPS(17mg
·
kg
‑1)溶液、福尔马林溶液、 4％多聚甲醛溶液若干份。
[0008]步骤三：实验方法，将实验小鼠随机均分为模型组、正常组、阳性药组、糙苏醇提物高、中、低剂量组共6组(每组10只)，将实验小鼠放置在适宜环境下培养，一周后，分别灌胃糙苏醇提物溶液、生理盐水溶、阿司匹林，24h后眼球采血处死，并分离受试小鼠的肺和肝脏。
[0009]步骤四：病理切片处理，取小鼠右肺中叶及肝同一叶于4％多聚甲醛溶液中，其其余肝肺组织自封袋包装，先放置液氮中，再转移到
ꢀ‑
80℃冰箱低温条件下保存备用，将肝肺组织从福尔马林溶液中取出，经石蜡切面，通过对取样的肝肺组织采用常规HE染色，在光学显微镜下观察肝和组织病理学变化。
[0010]步骤五：炎性因子检测，用ELISA试剂盒测定血清、肺匀浆以及肝匀浆中TNF
‑
α、IL
‑
6和MCP
‑
1含量。
[0011]步骤六：总结实验结果，根据实验测定结果确定丽江糙苏作用效果。
[0012]优选的，所述步骤一中，实验材料选用年龄为6
‑
8周龄、体重18～ 22g的健康雄性小鼠。
[0013]优选的，所述步骤三中，模型组小鼠灌胃生理盐水(1ml/100g) (均用5％吐温
‑
80溶解)，正常组小鼠灌胃生理盐水溶液 (1ml/100g)，阳性药组小鼠灌胃药阿司匹林(80mg
·
kg
‑1)，糙苏醇提物高、中、低剂量组小鼠分别按200、100、50mg
·
kg
‑1剂量灌胃糙苏醇提物溶液(1ml/100g)。
[0014]优选的，所述步骤三中，模型组、正常组、阳性药组、糙苏醇提物高、中、低剂量组中灌胃频率为每日1次，连续5天。
[0015]优选的，所述步骤三中，在最后一次给药1h后，正常组腹腔灌胃 0.9％氯化钠0.2ml，其余各组腹腔灌胃LPS(17mg
·
kg
‑1)溶液 (1ml/100g)。
[0016]优选的，所述步骤四中，将肝脏组织放置在组织裂解液中匀浆，组织匀浆液在4℃下以4800转/分钟离心30分钟，以获取肺匀浆以及肝匀浆。
[0017]优选的，所述步骤四中，在光学显微镜下观察病理切片中肺叶组织以及肝脏组织表现特征情况，并记录情况结果。
[0018]优选的，所述步骤五中，在肺匀浆以及肝匀浆中TNF
‑
α、IL
‑
6和 MCP
‑
1含量检测前，首先检测血清中TNF
‑
α、IL
‑
6和MCP
‑
1含量，以获取血清中TNF
‑
α、IL
‑
6和MCP
‑
1含量初始含量。
[0019]优选的，所述步骤五中，在肺匀浆以及肝匀浆炎性因子检测后，分别统计模型组、正常组、阳性药组、糙苏醇提物高、中、低剂量组中肺匀浆以及肝匀浆中TNF
‑
α、IL
‑
6和MCP
‑
1含量，并记录统计结果。
[0020]优选的，所述步骤六中，对比模型组、正常组、阳性药组、糙苏醇提物高、中、低剂量组中数据结果，最终获取丽江糙苏的作用效果。
[0021]与现有技术相比，本专利技术提供了丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，具备以下有益效果：
[0022]本专利技术通过采用对小鼠灌胃糙苏醇提物溶液、生理盐水溶、阿司匹林，并分离受试小鼠的肺和肝脏，一方面经石蜡切面，通过对取样的肝肺组织采用常规HE染色，在光学显微镜下观察肝和组织病理学变化，另一方面通过用ELISA试剂盒测定血清、肺匀浆以及肝匀浆中TNF
‑ꢀ
α、IL
‑
6和MCP
‑
1含量，以此方式能够通过检测数据结果直观的观察出丽江糙苏对小鼠肺叶和肝脏组织的作用效果，从而获取丽江糙苏对抑制炎症的作用。
附图说明
[0023]附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制，在附图中：
[0024]图1为血清组织的含量结果图；
[0025]图2为小鼠肝脏组织的含量结果图；
[0026]图3为小鼠肺叶组织的含量结果图；
[0027]图4为肺叶病理切片图；
[0028]图5为肝脏病理切片图；
[0029]图6为模型组HE染色图；
[0030]图7为对照组HE染色图。
具体实施方式
[0031]下面将结合本专利技术的实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0032]本专利技术提供以下技术方案：丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，包括以下步骤：
[0033]步骤一：实验材料准备，从昆明医科大学动物实验中心获本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：实验材料准备，从昆明医科大学动物实验中心获取60只balb/c小鼠作为实验对象。步骤二：实验试剂准备，(200、100、50mg
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kg
‑1)糙苏醇提物溶液(1ml/100g)、生理盐水溶(1ml/100g)、阿司匹林(80mg
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kg
‑1)、0.9％氯化钠、LPS(17mg
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kg
‑1)溶液、福尔马林溶液、4％多聚甲醛溶液若干份。步骤三：实验方法，将实验小鼠随机均分为模型组、正常组、阳性药组、糙苏醇提物高、中、低剂量组共6组(每组10只)，将实验小鼠放置在适宜环境下培养，一周后，分别灌胃糙苏醇提物溶液、生理盐水溶、阿司匹林，24h后眼球采血处死，并分离受试小鼠的肺和肝脏。步骤四：病理切片处理，取小鼠右肺中叶及肝同一叶于4％多聚甲醛溶液中，其其余肝肺组织自封袋包装，先放置液氮中，再转移到
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80℃冰箱低温条件下保存备用，将肝肺组织从福尔马林溶液中取出，经石蜡切面，通过对取样的肝肺组织采用常规HE染色，在光学显微镜下观察肝和组织病理学变化。步骤五：炎性因子检测，用ELISA试剂盒测定血清、肺匀浆以及肝匀浆中TNF
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α、IL
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6和MCP
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1含量。步骤六：总结实验结果，根据实验测定结果确定丽江糙苏作用效果。2.根据权利要求1所述的丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，其特征在于：所述步骤一中，实验材料选用年龄为6
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8周龄、体重18～22g的健康雄性小鼠。3.根据权利要求1所述的丽江糙苏在治疗内毒素血症药物研制中的应用，其特征在于：所述步骤三中，模型组小鼠灌胃生理盐水(1ml/100g)(均用5％吐温
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80溶解)，正常组小鼠灌胃生理盐水溶液(1ml/100g)，阳性药组小鼠灌胃药阿司匹林(80mg
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‑1)，糙苏醇提物高、中、低剂量组小鼠分别按200、100、50mg
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【专利技术属性】
技术研发人员：车彦云，赵毅，张雅琼，邓欣，吴静宜，姜丙通，
申请(专利权)人：云南中医药大学，
类型：发明
国别省市：