王枣子提取物在制备慢性阻塞性肺疾病药物中的应用、药物组合物制造技术

本发明专利技术公开王枣子提取物在制备慢性阻塞性肺疾病药物中的应用，涉及慢性阻塞性肺技术领域，其中王枣子提取物提取自王枣子叶。本发明专利技术还提供包括上述王枣子提取物的药物组合物。本发明专利技术的有益效果在于：本发明专利技术中的王枣子提取物是通过下调JAK/STAT信号通路中的通路蛋白，进而抑制TNF

【技术实现步骤摘要】
王枣子提取物在制备慢性阻塞性肺疾病药物中的应用、药物组合物


[0001]本专利技术涉及慢性阻塞性肺
，具体涉及王枣子提取物在制备慢性阻塞性肺疾病药物中的应用、药物组合物。

技术介绍

[0002]慢性阻塞性肺疾病(慢肺阻，Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是由多种炎症细胞和炎症因子参与，持续的慢性气道炎症导致气道功能受损进而重构，出现肺功能进行性下降，呼吸困难加重等症状的慢性气道炎症性疾病，严重时可导致死亡，因而该病具有很大的危害性。但COPD目前致病机理尚不完全清楚，当前观点是由于个体自身疾病易感因素和外界因素共同造成的。现代西医治疗一般运用激素或者支气管舒张剂，其在一定程度上改善患者的肺功能，但是长期使用会使身体具有耐药性，也容易引起一些不良反应。中医药在治疗和改善COPD病情上具有显著优势。中医在临床上降低炎症因子水平、抗氧化应激、增强纤毛摆动，减轻粘膜水肿、改善气道重塑，降低气道高反应性以及协同抗菌等方面缓解和改善COPD患者病情均有报道。
[0003]公开号为CN104435095A的专利公开王枣子总萜有效部位及其提取方法、应用、组合物，其公开王枣子总萜有效部位在制备抗免疫肝损伤的药物中的应用。但目前没有报道王枣子对慢性阻塞性肺疾病的治疗作用。
[0004]公开号为CN111888389A的专利申请公开一种用于治疗间质性肺炎的王枣子萃取物及其制备方法，但是间质性肺炎是以弥漫性肺实质、肺泡炎和间质纤维化为病理基本改变，以活动性呼吸困难、X线胸片示弥漫阴影、限制性通气障碍、弥散功能(DLCO)降低和低氧血症为临床表现的不同类疾病群构成的临床病理实体的总称。而慢性阻塞性肺疾病是一种具有气流阻塞特征的慢性支气管炎和(或)肺气肿，可进一步发展为肺心病和呼吸衰竭的常见慢性疾病，二者发病机理和症状并不相同。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题在于提供王枣子提取物在制备慢性阻塞性肺疾病药物中的应用。
[0006]本专利技术通过以下技术手段实现解决上述技术问题的：
[0007]王枣子提取物在制备慢性阻塞性肺疾病药物中的应用，所述王枣子提取物提取自王枣子叶。
[0008]有益效果：本专利技术中的王枣子提取物干涉了慢性阻塞性肺疾病的发展。
[0009]优选地，所述王枣子提取物的制备采用超声提取法。
[0010]优选地，所述王枣子提取物的制备方法包括以下步骤：将王枣子叶粉末与乙醇混合，超声提取后，合并提取液，制得王枣子提取物。
[0011]优选地，将王枣子叶粉末按照1:8
‑
12料液比加入95％乙醇，于30
‑
50℃、200
‑
400W
ELISA试剂盒(翼飞雪生物科技实验)；IgG ELISA试剂盒(翼飞雪生物科技实验)；IgA ELISA试剂盒(翼飞雪生物科技实验)。
[0029]主要仪器设备：细胞超声粉碎仪(宁波新芝生物科技股份有限公司)；PAB
‑
S200被动吸烟动物染毒系统(宁波新芝生物科技股份有限公司)；AniRes2005动物肺功能分析系统(北京贝兰博科技有限公司)；激光共聚焦显微镜(日本OLYMPUS公司)；1510
‑
00735扫描酶标仪(美国Thermo公司)；落地式全自动冰冻切片机ME(德国Leica公司)；莱卡正置荧光显微镜(德国Leica公司)；旋转蒸发仪(上海保玲仪器设备有限公司)；XL
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04B中草药粉碎机(广州旭众食品机械有限公司)跑胶及转膜器械(美国伯乐)；化学成像凝胶采集系统(美国Alpha)。
[0030]实施例1
[0031]王枣子提取物的制备
[0032]对王枣子叶中总二萜类成分的提取工艺进行优选，提取溶剂选择95％乙醇，提取方式选择超声提取。工艺优化的指标为3个，分别为料液比、提取时间、超声功率。取上述3个指标，制作因素水平表，考察上述3个因素对王枣子叶中总二萜类成分含量提取的影响。
[0033]表1为因素水平表
[0034][0035]实验结果表明王枣子采用超声法提取，其料液比、提取时间以及超声功率对总二萜含量均有显著影响，各因素对测定结果影响次序为料液比＞超声功率＞提取时间，优选工艺为：料液比为1:10，提取时间为50min，超声功率为400W。
[0036]在最优提取提取条件下分别检测每次超声提取液中二萜化合物含量，发现前三次超声合并提取液中二萜化合物含量均显著增加，而至第四次开始，含量虽略有提高，但无统计学意义。从节省乙醇消耗、避免提取液体积过大而后处理困难、缩短工时、提高效率考虑，选用提取3次，每次50min。
[0037]王枣子中总二萜成分提取最优工艺为以95％乙醇为溶剂，料液比为1:10，超声功率为400W的条件下超声提取3次，每次50分钟。
[0038]实施例2
[0039]王枣子提取物对慢性阻塞性肺病的机制研究
[0040](一)测定方法
[0041](1)王枣子提取液(WZZET)的制备：采用实施例1中最优工艺的提取方法，超声三次后合并提取液并定容，按照100∶1的比例加入活性炭脱色后，回收乙醇，制成浸膏。最终加入纯水制成浓度大小为20mg/mL混悬液，4℃保存备用。
[0042](2)COPD动物模型制备
[0043]将30只雄性SD大鼠随机分为5组：空白组，COPD组，COPD+WZZET(50mg/kg)组，COPD+WZZET组(100mg/kg)和COPD+WZZET(150mg/kg)组。用CS+LPS方法建立COPD模型。其中造模第
1、24天每只大鼠滴入脂多糖(LPS)0.2mL(200μg)，该日不予烟熏；其余时间正常饲养。空白组不做处理。CS为烟雾暴露。
[0044](3)肺功能测定
[0045]将大鼠按照0.6mL/100g体重腹腔内麻醉后，以
“┴”
型剪开大鼠颈部皮肤，插入气管插管并转移大鼠至密闭体描箱内。采用动物肺功能分析系统检测分析，最后由计算机处理后得到肺功能的各项指标，包括肺总量、肺动态顺应性和呼吸阻力等。
[0046](4)肺组织病理切片观察
[0047]采用HE染色法观察肺组织形态结构。取大鼠右肺组织后，浸泡50％OCT固定肺泡组织。10
‑
15min后，进行包埋，切片。再进行HE染色。最后在显微镜下观察肺组织肺泡形态。
[0048](5)ELISA检测炎症因子
[0049]根据试剂盒说明书的指示，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中多种细胞因子和免疫球蛋白(IL
‑
1β、TNF
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α、IgG、IgA)的水平。
[0050](6)TUNEL染色检测细胞凋亡
[0051]分别选五组各三个样片。脱胶后，用免疫组化笔描绘轮廓并固本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.王枣子提取物在制备慢性阻塞性肺疾病药物中的应用，其特征在于：所述王枣子提取物提取自王枣子叶。2.根据权利要求1所述的王枣子提取物在制备慢性阻塞性肺疾病药物中的应用，其特征在于：所述王枣子提取物的制备采用超声提取法。3.根据权利要求2所述的王枣子提取物在制备慢性阻塞性肺疾病药物中的应用，其特征在于：所述王枣子提取物的制备方法包括以下步骤：将王枣子叶粉末与乙醇混合，超声提取后，合并提取液，制得王枣子提取物。4.根据权利要求3所述的王枣子提取物在制备慢性阻塞性肺疾病药物中的应用，其特征在于：将王枣子叶粉末按照1:8
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12料液比加入95％乙醇，于30
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50℃、200
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400W条件下超声提取30
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50min。5.根据权利要求4所述的王枣子提...

【专利技术属性】
技术研发人员：段红，翟科峰，王文婷，汪威，陈远，吕佳敏，
申请(专利权)人：宿州学院，
类型：发明
国别省市：