本发明专利技术涉及生物工程技术领域，并公开了一种针对尘螨皮炎导致毛孔粗大具有提亮肤色功能的信使RNA活性细胞疗法，包括如下步骤，分别制备载5－硝基咪唑类抗生素脂质体和载细胞生长因子脂质体，且将与透明质酸溶液以及鱼精蛋白混合后的mRNA溶液，分别与载5－硝基咪唑类抗生素脂质体和载细胞生长因子脂质体混合得溶液A和溶液B，通过将溶液B与待治疗人体培养的DC细胞进行转染，转染后的活性细胞过继入待治疗人体的同时，结合溶液A的皮下注射给药双治疗过程，既可以通过药物治疗螨虫病害，又可以提高人体胶原蛋白合成效率，细化毛孔提亮肤色。色。
【技术实现步骤摘要】
一种针对尘螨皮炎导致毛孔粗大具有提亮肤色功能的信使RNA活性细胞疗法
[0001]本专利技术涉及生物工程
，更具体地说，涉及一种针对尘螨皮炎导致毛孔粗大具有提亮肤色功能的信使RNA活性细胞疗法。
技术介绍
[0002]螨虫主要寄生在面部、头皮等部位的毛囊内，以皮脂、汗液、皮屑等为生，据调查表明，约有97％的成年人都有感染螨虫，有皮肤问题的人，每平方厘米大约有12.8个螨虫，而没有皮肤问题的人，每平方厘米大约0.7个，螨虫较多情况下，一般出现皮肤油腻、毛孔粗大、黑头的问题，且容易长红斑、瘙痒、脱屑、过敏，而且红斑不退，会慢慢出现丘疹、脓疱，甚至向玫瑰痤疮、红血丝等皮肤问题发展。螨虫还会导致皮肤粗糙、毛孔粗大、黑头大量螨虫不分昼夜在皮肤上爬行以及尸体、虫卵等刺激毛孔变大和角质层增生，而使皮肤粗糙，而且螨虫排泄物、尸体堆积在毛孔内会撑大毛孔，甚至与皮脂混合氧化形成黑头甚至出现玫瑰痤疮等严重皮肤问题。
[0003]针对尘螨皮炎导致的毛孔粗大以及皮肤暗沉等问题，一方面可以通过药物治疗驱除螨虫，另一方面可以通过促进人体胶原蛋白的合成过程，细化毛孔以及提亮肤色的过程，通过脂质体作为载体向人体细胞输送含有胶原蛋白基因序列的mRNA，促进人体胶原蛋白的合成过程，从而实现治疗过程。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的是针对现有技术的不足，提供一种针对尘螨皮炎导致毛孔粗大具有提亮肤色功能的信使RNA活性细胞疗法。
[0005]本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种针对尘螨皮炎导致毛孔粗大具有提亮肤色功能的信使RNA活性细胞疗法，包括如下步骤：
[0006]步骤S1，分别制备载5－硝基咪唑类抗生素脂质体和载细胞生长因子脂质体，备用；
[0007]步骤S2，取冻存的插入有胶原蛋白基因编码的mRNA，4000r/min离心1min，加入DEPC水震荡摇晃使其溶解；
[0008]步骤S3，取含有胶原蛋白基因编码的mRNA溶液加入等质量的透明质酸溶液混合，室温静置10min，再与鱼精蛋白以体积比1:1进行混合，静置10min，备用；
[0009]步骤S4，取两份等量步骤S3的混合液，分别加入适量的载5－硝基咪唑类抗生素脂质体和载细胞生长因子脂质体得溶液A和溶液B；
[0010]步骤S5，取步骤S4的溶液B进行瞬时转染并进行筛选，得活性细胞液B；
[0011]步骤S6，将溶液A通过皮下注射的方式进行指定部位给药，且将步骤S5的活性细胞液B过继入待治疗人体。
[0012]作为优选的，所述步骤S1的制备步骤具体如下：
[0013]采用薄膜分散法，称取质量比为3:1的阳离子脂质体DOTAP与胆固醇，加入圆底晒平中并加入适量的三氯甲烷，30℃旋蒸至瓶底形成一层脂质体薄膜，真空干燥2h除去有机溶剂，加入适量去离子水，超声波处理30min，按照其他物质与脂质体质量比1:5进行配比，超声处理70min。
[0014]作为优选的，所述步骤S2的胶原蛋白基因编码包括COL1A1、COL1A2、COL2A1、COL3A1、COL5A1、COL5A2、COL5A3、COL11A1、COL11A2、COL11A3、COL24A1。
[0015]作为优选的，所述步骤S5瞬时转染具体包括：
[0016]DC细胞培养，取待治疗人血液膜分离出单个核细胞，加入完全培养基贴壁法培养2
‑
4h，移除悬浮液，取剩下贴壁的细胞加入含特定诱导因子的培养基，培养6
‑
8d；
[0017]向DC细胞培养基中加入溶液B轻弹混匀，室温静置10
‑
15min得混合液，取适量不含血清培养液将混合液缓慢加入培养液中，摇匀，37℃温箱放置6
‑
24h，吸出无血清转染液，换入正常培养液中继续培养，48
‑
72h后提取活性细胞得活性细胞液B。
[0018]作为优选的，所述步骤S1的细胞生长因子为白细胞介素2。
[0019]作为优选的，所述步骤S6的皮下注射给药分3
‑
5次进药，且每次给药不超过总药量的五分之一。
[0020]本专利技术所述方案相比于现有技术的有益效果如下：
[0021]本专利技术通过在一个患者上同时进行两种治疗手段，其中将溶液B与待治疗人体培养的DC细胞进行转染，转染后的活性细胞过继入待治疗人体的同时，结合溶液A的皮下注射给药双治疗过程，既可以通过药物治疗螨虫病害，又可以提高人体胶原蛋白合成效率，细化毛孔提亮肤色。
具体实施方式
[0022]下面通过具体实施例对专利技术做进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的本专利技术的保护范围。
[0023]一种针对尘螨皮炎导致毛孔粗大具有提亮肤色功能的信使RNA活性细胞疗法，包括如下步骤：
[0024]步骤S1，分别制备载5－硝基咪唑类抗生素脂质体和载细胞生长因子脂质体，备用；
[0025]步骤S2，取冻存的插入有胶原蛋白基因编码的mRNA，4000r/min离心1min，加入DEPC水震荡摇晃使其溶解；
[0026]步骤S3，取含有胶原蛋白基因编码的mRNA溶液加入等质量的透明质酸溶液混合，室温静置10min，再与鱼精蛋白以体积比1:1进行混合，静置10min，备用；
[0027]步骤S4，取两份等量步骤S3的混合液，分别加入适量的载5－硝基咪唑类抗生素脂质体和载细胞生长因子脂质体的溶液A和溶液B；
[0028]步骤S5，取步骤S4的溶液B进行瞬时转染并进行筛选，得活性细胞液B；
[0029]步骤S6，将溶液A通过皮下注射的方式进行指定部位给药，且将步骤S5的活性细胞液B过继入待治疗人体。
[0030]进一步的，步骤S1的具体制备如下：
[0031]采用薄膜分散法，称取质量比为3:1的阳离子脂质体DOTAP与胆固醇，加入圆底晒
平中并加入适量的三氯甲烷，30℃旋蒸至瓶底形成一层脂质体薄膜，真空干燥2h除去有机溶剂，加入适量去离子水，超声波处理30min，按照其他物质与脂质体质量比1:5进行配比，超声处理70min。
[0032]合成人体胶原蛋白基因编码包括COL1A1、COL1A2、COL2A1、COL3A1、COL5A1、COL5A2、COL5A3、COL11A1、COL11A2、COL11A3、COL24A1。
[0033]细胞生长因子即白细胞介素2，其具体制备过程如下：
[0034](i)无菌环境下采集本体血液，加入肝素抗凝，用RPMI1640按1∶1将血液稀释，然后重层于菲可液面上，以1500r/min离心30min，取白细胞层，用RPMI1640洗2次，按1
‑3×
10细胞/ml浓度加入10％胎牛血清RPMI1640，注入一装有磁棒的大瓶中，置37℃搅拌培养4天，取出，分装于50ml离心管中，1500r/min离心20min，弃上清液，将细胞悬浮于1％胎牛血清RPM本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种针对尘螨皮炎导致毛孔粗大具有提亮肤色功能的信使RNA活性细胞疗法，其特征在于，包括如下步骤：步骤S1，分别制备载5－硝基咪唑类抗生素脂质体和载细胞生长因子脂质体，备用；步骤S2，取冻存的插入有胶原蛋白基因编码的mRNA，4000r/min离心1min，加入DEPC水震荡摇晃使其溶解；步骤S3，取含有胶原蛋白基因编码的mRNA溶液加入等质量的透明质酸溶液混合，室温静置10min，再与鱼精蛋白以体积比1:1进行混合，静置10min，备用；步骤S4，取两份等量步骤S3的混合液，分别加入适量的载5－硝基咪唑类抗生素脂质体和载细胞生长因子脂质体得溶液A和溶液B；步骤S5，取步骤S4的溶液B进行瞬时转染并进行筛选，得活性细胞液B；步骤S6，将溶液A通过皮下注射的方式进行指定部位给药，且将步骤S5的活性细胞液B过继入待治疗人体。2.根据权利要求1所述的一种针对尘螨皮炎导致毛孔粗大具有提亮肤色功能的信使RNA活性细胞疗法，其特征在于，所述步骤S1的制备步骤具体如下：采用薄膜分散法，称取质量比为3:1的阳离子脂质体DOTAP与胆固醇，加入圆底晒平中并加入适量的三氯甲烷，30℃旋蒸至瓶底形成一层脂质体薄膜，真空干燥2h除去有机溶剂，加入适量去离子水，超声波处理30min，按照其他物质与脂质体质量比1:5进行配比，超声处理70min。3.根据权利要求1所述的一种针对尘螨皮炎导致毛孔粗大具有提亮肤色功能的信使RNA活性细胞疗法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：杜希静，
申请(专利权)人：湖南基茵美生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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