一种基于牛至油的猪精液常温保存长效稀释剂制造技术

本发明专利技术公开了一种猪精液常温保存长效稀释剂以及一种改善猪精液常温保存品质的方法。该猪精液常温保存长效稀释剂包括牛至油。所述改善猪精液常温保存品质的方法是将牛至油与稀释猪精液混合后，在常温下进行保存；混合液中牛至油的浓度为0.06～0.08mg/mL。本发明专利技术较为系统的探究了猪精液常温保存过程中，添加牛至油后精子形态结构变化以及抗氧化性能情况，揭示了牛至油具有改善精液品质，延长精液保存时间的作用，精液常温保存第9d时精子活率达到70.50％。本发明专利技术是首次将牛至油作为猪精液添加剂，该研究结果为猪精液常温保存稀释剂的开发应用提供了新的理论依据。发应用提供了新的理论依据。

【技术实现步骤摘要】
一种基于牛至油的猪精液常温保存长效稀释剂


[0001]本专利技术属于猪育种与繁殖
，具体涉及一种基于牛至油的猪精液常温保存长效稀释剂。

技术介绍

[0002]与传统授精技术相比，人工授精技术可以使公猪的使用效率提高10倍左右，同时减少公猪饲养量，有效降低养殖成本。通过人工授精技术与现代育种技术结合，选定品质优良的种公猪，再将优秀种公猪的精液发送至各个生产厂区，建立场间的遗传联系，实现基因迅速推广，从而加快遗传进展的速度。然而在生产中往往存在很多因素影响公猪精液保存的质量，例如公猪的品种、年龄和个体差异等，精子代谢活动产生的活性氧累积和精液细菌污染也是降低品质的关键因素，其原因是过量的活性氧损害精子质膜和顶体结构的完整度，导致精子活率降低，同时也限制了精液远距离运输。如何保持优良品质的公猪精液成为人工授精技术发展中的重要环节，建立多厂区优良品质的精液覆盖，克服人工授精技术空间限制，使优秀种公猪发挥最大优势。因此，添加适当的抗氧化剂和抑菌剂是猪精液常温保存技术的关键因素。
[0003]唇形科牛至属(Origanum)的植物因其草本植物的特性及芳香的药用作用被人们广泛熟知，并且在经济中起着非常重要的作用。全世界范围内，土耳其、希腊和意大利等国家将牛至应用于传统医学领域，主要用来解决呼吸障碍、类风湿性关节炎、营养障碍和泌尿问题。而牛至油(Oregano essential oil,OEO)是从牛至中提取出来的植物精油，其主要由芳香酚类、黄酮类和萜类化合物组成，化学成分富含百里酚和香芹酚，在过去的二十年里，OEO逐渐成为对抗感染的研究热点，分别发挥着抗氧化和抑菌的作用。
[0004]畜牧生产中，OEO常常被用做抑菌剂和抗氧化剂，在畜禽动物的饲料添加剂中广泛应用，因其增强机体免疫力、提高机体抗病能力和抗应激能力的功效被大量报道。已有报道证明了牛至油被用于饲料添加剂时，能够显著调节肠道微生物区系平衡，进而改善蛋鸡肠道消化吸收功能，提高饲料利用率。
[0005]但目前并没有关于将牛至油应用于猪精液常温保存中的应用。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种牛至油的新用途。
[0007]本专利技术所提供的牛至油的新用途是其在猪精液常温保存中的应用或在制备猪精液常温保存长效稀释剂中的应用。
[0008]本专利技术的另一个目的是提供一种猪精液常温保存长效稀释剂。
[0009]本专利技术所提供的猪精液常温保存长效稀释剂，包括猪精液保存剂稀释粉，其还包括牛至油。
[0010]所述猪精液保存剂稀释粉可为美国VIM猪精液稀释粉末、德国MZ猪精液保存剂稀释粉以及鑫钻猪精液保存剂稀释粉、丹麦KRUUSE猪精液保存剂稀释粉等。
[0011]本专利技术的再一个目的是提供一种改善猪精液常温保存品质的方法。
[0012]本专利技术所提供的改善猪精液常温保存品质的方法，包括下述步骤：将牛至油与猪稀释精液混合后，在常温下进行保存。
[0013]本专利技术中，所述猪稀释精液是将新鲜采集的猪精液用本领域通用的猪精液保存剂稀释粉溶液稀释后得到的，其中，猪精子的密度稀释至4.5
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5.5亿个/mL。
[0014]所述猪精液保存剂稀释粉可为美国VIM猪精液稀释粉末、德国MZ猪精液保存剂稀释粉以及鑫钻猪精液保存剂稀释粉、丹麦KRUUSE猪精液保存剂稀释粉等。
[0015]所述稀释猪精液的精子活率大于80％。
[0016]本专利技术中，所述常温通常为15
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17℃，具体如17℃。
[0017]本专利技术中，所述牛至油与稀释猪精液混合的混合液中，牛至油的浓度为0.02～0.10mg/mL，优选0.06～0.08mg/mL。
[0018]本专利技术中，所述牛至油以牛至油水溶液的形式加入，所述牛至油水溶液的浓度可为0.02～0.1mg/mL。
[0019]本专利技术较为系统的探究了猪精液常温保存过程中，添加牛至油后精子形态结构变化以及抗氧化性能情况，揭示了牛至油具有改善精液品质，延长精液保存时间的作用，精液常温保存第9d时精子活率达到70.50％。对精子有保护作用浓度范围内的牛至油对细菌无明显抑制作用。本专利技术是首次将牛至油作为猪精液添加剂，该研究结果为猪精液常温保存稀释剂的开发应用提供了新的理论依据。
[0020]本专利技术具有如下有益技术效果：
[0021]1、本专利技术分析了猪精液常温保存1、3、5、7、9、10天在精液稀释液中添加OEO后精液pH值变化趋势、精子活率、精子质膜完整度和精子顶体完整度，添加OEO后能够改善精子运动、精子结构，提高精液保存效果，添加0.06mg/mL效果最好。
[0022]2、在精液稀释液添加0.06～0.08mg/mL OEO后能够有效提高精液中SOD酶活性和CAT活性，降低精液ROS水平。
附图说明
[0023]图1为猪精子质膜完整性；猪精子质膜经Host溶液处理后尾部出现卷曲，黄色箭头标记为质膜完整的精子，白色箭头标记为质膜破损的精子。Scale bars＝210μm。
[0024]图2为低渗处理后猪精子形态；
[0025]图3为猪精子顶体染色；猪精子顶体经FITC
‑
PNA染色后呈现明亮完整的绿色荧光，黄色箭头标记为顶体完整的精子，白色箭头标记为顶体缺损的精子；精子细胞核经DAPI染色后呈现蓝色荧光。Scale bars＝80μm。
[0026]图4为猪精子染色后形顶体形态；
[0027]图5为牛至油对猪精液中ROS含量的影响；注：***表示差异显著(p<0.05)，****表示差异极显著(p<0.01)；
[0028]图6为OEO对猪精液中CAT含量，注：*表示差异显著(p<0.05),**表示差异显著(p<0.05)，***表示差异极显著(p<0.01)；
[0029]图7为OEO对猪精液中SOD含量，注：*表示差异显著(p<0.05)，**表示差异显著(p<0.05)。
具体实施方式
[0030]下面结合具体实施例对本专利技术作进一步阐述，但本专利技术并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述原材料如无特别说明均能从公开商业途径获得。
[0031]实施例1、牛至油对猪精液常温保存效果的影响
[0032]1试验材料和方法
[0033]1.1试验材料
[0034]1.1.1试验精液
[0035]试验采用的公猪精液均来自于北京市顺鑫农业杜洛克原种猪场，用手握法采集3头健康的10月龄杜洛克公猪中段精液，采精人员眼观检测鲜精颜色同时检验精液质认为正常精液后，用KRUUSE商品稀释粉末(Cat.No 950031)配置成商品稀释精液后置于保温箱中2h内送至实验室，保存至17℃恒温箱。精子活率大于80％及以上可用于后续试验。
[0036]商品稀释液配制：KRUUSE猪精本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.牛至油在猪精液常温保存中的应用。2.牛至油在制备猪精液常温保存长效稀释剂中的应用。3.一种猪精液常温保存长效稀释剂，包括猪精液保存剂稀释粉，其特征在于：所述猪精液常温保存长效稀释剂还包括牛至油。4.一种改善猪精液常温保存品质的方法，包括下述步骤：将牛至油与稀释猪精液混合后，在常温下进行保存。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述稀释猪精液是将新鲜采集的猪精液用猪精液保存剂稀释粉溶液稀释后得到的，其中，猪精子的密度稀释至4.5亿
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5.5亿个/mL。6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述稀释猪精液的精子活率大于...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴克亮，张涵，白珂瑞，刘哲熹，唐辉，赵兴波，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：