一种蚕蛹免疫肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于蛋白肽制备技术领域，具体涉及一种蚕蛹免疫肽及其制备方法和应用。本发明专利技术以酸性蛋白酶对蚕蛹进行酶解制备得到的蚕蛹免疫肽兼具抑菌和抗氧化活性，且其抑菌和抗氧化活性较采用其他蛋白酶制备得到的蛋白肽的活性更强，可用于制备水产动物养殖相关的产品，以提高水产动物的免疫力，为健康养殖提供技术支持，同时也拓展了桑蚕产业的产业链。同时也拓展了桑蚕产业的产业链。同时也拓展了桑蚕产业的产业链。

【技术实现步骤摘要】
一种蚕蛹免疫肽及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于蛋白肽制备
，具体涉及一种蚕蛹免疫肽及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]随着水产业的迅速发展与扩张，水产养殖业进入了高密度、高产量的精养模式，水产养殖病害日益严重。抗生素等鱼药在水产养殖与疾病控制上起着不可替代的作用，但是因鱼药大多是仿制兽药、人用药和农药而成，存在科学性不足、针对性不强、药效不高、对环境影响大等问题。根据《农业农村部第194号公告》，饲料用抗生素自2020年7月1日起全面停用。为保障畜禽水产养殖的生产效益和食品安全，开发安全、高效的抗生素替代品成为养殖业健康发展的难点和热点。
[0003]我国蚕桑资源极为丰富，桑园种植面积超过1300万亩，蚕蛹年产量30万吨以上。蚕蛹中蛋白质含量较高，占其干物质重量的45％～50％，蚕蛹蛋白是一种比大豆蛋白更具营养价值的优质蛋白质资源。近几年，蚕蛹蛋白肽在鳊鱼、草鱼、鸭嘴鱼、南美白对虾、罗氏沼虾等养殖上应用的相关研究表明，蚕蛹蛋白肽能明显降低饲料成本，提高生长速度和降低饵料系数等。同时，蚕蛹不仅是优质蛋白原料来源，其还富含黄酮、抗菌肽、诱食肽等功能性活性物质。但是目前的蚕蛹蛋白肽作为饲料来源不能很好的发挥其在免疫力增强方面的功效。因而，寻求制备可提高水产动物免疫力的蛋白肽的方法对于本领域来讲较为迫切。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种蚕蛹免疫肽及其制备方法和应用，采用本专利技术所述制备方法得到的蚕蛹免疫肽兼具抑菌和抗氧化双重活性，可以显著提高水产动物的免疫力。
[0005]本专利技术提供了一种蚕蛹免疫肽的制备方法，包括如下步骤：
[0006]以酸性蛋白酶酶解蚕蛹，所得酶解液中包括所述蚕蛹免疫肽。
[0007]优选的，所述酶解前，还包括将所述蚕蛹制成蚕蛹浆液。
[0008]优选的，所述蚕蛹浆液的制备步骤包括：将蚕蛹与水混合，匀浆，得到所述蚕蛹浆液；
[0009]所述蚕蛹与水的质量体积比为1g：0.90～1.10mL。
[0010]优选的，所述酸性蛋白酶的用量为5000～7000U/g蚕蛹蛋白。
[0011]优选的，进行所述酶解的温度为40～45℃，时间为2～4h，pH值为3.0～4.0。
[0012]优选的，所述蚕蛹包括鲜蚕蛹和/或缫丝蛹。
[0013]本专利技术提供了一种蚕蛹免疫肽，采用上述技术方案所述的制备方法制备得到。
[0014]本专利技术提供了上述技术方案所述的蚕蛹免疫肽在下述Ⅰ～Ⅳ中的一项或多项中的应用：
[0015]Ⅰ：制备抑菌产品；
[0016]Ⅱ：制备具有抗氧化活性的产品；
[0017]Ⅲ：制备提高水产动物免疫力的产品；
[0018]Ⅳ：制备除Ⅰ～Ⅲ以外的其他水产动物养殖产品。
[0019]优选的，所述抑菌产品包括用于抑制嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌和哈维氏弧菌中的一种或多种的产品。
[0020]本专利技术还提供了一种水产动物养殖产品，所述水产动物养殖产品的活性成分包括上述技术方案所述的蚕蛹免疫肽。
[0021]有益效果：
[0022]本专利技术提供了一种蚕蛹免疫肽的制备方法，包括如下步骤：以酸性蛋白酶酶解蚕蛹，所得酶解液中包括所述蚕蛹免疫肽。本专利技术以酸性蛋白酶对蚕蛹进行酶解，并以总抗氧化活力和抑菌效果为靶标对得到的肽进行筛选，制备得到的蚕蛹免疫肽兼具抑菌和抗氧化活性，且其抑菌和抗氧化活性较采用其他蛋白酶制备得到的蛋白肽的活性更强，可用于制备包括药物、饲料等在内的水产动物养殖相关产品，以提高水产动物的免疫力，为健康养殖提供技术支持，同时也拓展了桑蚕产业的产业链。
附图说明
[0023]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0024]图1为蚕蛹免疫肽的制备技术路线图；
[0025]图2为以Trolox为标准品的抗氧化活性标准曲线图；
[0026]图3为实施例1和对比例4～6中制备得到的蚕蛹蛋白肽对哈维氏弧菌的抑菌结果图；
[0027]图4为实施例1和对比例4～6中制备得到的蚕蛹蛋白肽对嗜水气单胞菌的抑菌结果图；
[0028]图5为实施例1和对比例4～6中制备得到的蚕蛹蛋白肽对荧光假单胞菌的抑菌结果图；
[0029]图6为实施例1和实施例4、对比例4和对比例7、对比例5和对比例9与对比例6和对比例12对哈维氏弧菌、嗜水气单胞菌和荧光假单胞菌的抑菌结果图；
[0030]图7为实施例1和实施例4、对比例4和对比例7、对比例5和对比例9中酶解液总抗氧化活性结果图；
[0031]图8为实施例1、实施例5、对比例2～3中制备得到的酶解液的总抗氧化活性结果图；
[0032]图9为实施例1、实施例5、对比例2～3中得到的酶解液对嗜水气单胞菌的抑菌活性结果图。
具体实施方式
[0033]本专利技术提供了一种蚕蛹免疫肽的制备方法，包括如下步骤：以酸性蛋白酶酶解蚕蛹，所得酶解液中包括所述蚕蛹免疫肽。
[0034]本专利技术在进行所述酶解前，优选还包括将所述蚕蛹制成蚕蛹浆液。本专利技术优选将蚕蛹与水混合，匀浆，得到所述蚕蛹浆液。本专利技术所述蚕蛹与水的质量体积比优选为1g：
0.90～1.10mL，更优选为1g：1mL。本专利技术对所述匀浆的具体参数没有特殊限定，得到的蚕蛹浆液中无块状物即可。本专利技术所述蚕蛹优选包括鲜蚕蛹和/或缫丝蛹，更优选包括鲜蚕蛹或缫丝蛹。
[0035]得到所述蚕蛹浆液后，本专利技术优选以酸性蛋白酶酶解所述蚕蛹浆液，得到酶解混合物。本专利技术所述酸性蛋白酶的用量优选为5000～7000U/g蚕蛹蛋白，更优选为6000U/g蚕蛹蛋白。本专利技术所述蚕蛹蛋白优选为所述蚕蛹中含有的总蛋白，所述蚕蛹蛋白优选采用凯氏定氮法进行测定。本专利技术进行所述酶解前，优选采用HCl溶液调节所述蚕蛹浆液的pH值，所述pH值优选为3.0～4.0，更优选为3.0。本专利技术所述HCl溶液的浓度优选为0.5M。本专利技术所述酶解的温度优选为40～45℃，更优选为43℃；所述酶解的时间优选为2～4h，更优选为4h。本专利技术进行所述酶解时，优选伴随搅拌。本专利技术对所述搅拌的速度和步骤没有特殊限定，采用本领域中常规搅拌速度和步骤即可。本专利技术所述搅拌有助于酶解反应均匀，避免酶解过程中的分层沉淀，导致酶解不彻底。完成所述酶解后，本专利技术优选还包括煮沸所述酶解混合物，以达到灭酶目的，得到灭酶后酶解混合物；所述煮沸的时间优选为5min。
[0036]得到所述灭酶后酶解混合物后，本专利技术优选还包括对所述灭酶后酶解混合物进行过滤，取滤过液，得到酶解液。本专利技术所述酶解液中包括所述蚕蛹免疫肽。本专利技术优选采用滤布进行所述过滤。本专利技术所述滤布的孔径优选为150～200目，更优选为200目。
[0037]得到所述酶解液后，本专利技术优选还包括对所述酶解液进行干燥，得到蚕蛹免疫肽粉。本专利技术所述干燥优选为真空干燥。本专利技术对所述真空干燥的条件没有特殊限定，采用本领域中常规真本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蚕蛹免疫肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：以酸性蛋白酶酶解蚕蛹，所得酶解液中包括所述蚕蛹免疫肽。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酶解前，还包括将所述蚕蛹制成蚕蛹浆液。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述蚕蛹浆液的制备步骤包括：将蚕蛹与水混合，匀浆，得到所述蚕蛹浆液；所述蚕蛹与水的质量体积比为1g：0.90～1.10mL。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述酸性蛋白酶的用量为5000～7000U/g蚕蛹蛋白。5.根据权利要求1～4任一项所述的制备方法，其特征在于，进行所述酶解的温度为40～45℃，时间为2～4h，pH值为3.0～4....

【专利技术属性】
技术研发人员：李庆荣，廖森泰，邹宇晓，杨琼，邢东旭，肖阳，穆利霞，周东来，刘凡，黎尔纳，张伟龙，
申请(专利权)人：广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：