一种胎盘生长因子检测试剂盒及其制备方法、检测胎盘生长因子的方法技术

本申请提供一种胎盘生长因子检测试剂盒，其能够用于检测胎盘生长因子，属于检测技术领域。胎盘生长因子检测试剂盒包括：胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液和吖啶标记的胎盘生长因子抗体液。吖啶标记的胎盘生长因子抗体液中包括两种阻断剂。采用本申请的胎盘生长因子检测试剂盒配合化学发光免疫分析技术可用于检测待测物中的胎盘生长因子，胎盘生长因子检测试剂盒将抗体

【技术实现步骤摘要】
一种胎盘生长因子检测试剂盒及其制备方法、检测胎盘生长因子的方法


[0001]本申请涉及检测
，具体而言，涉及一种胎盘生长因子检测试剂盒及其制备方法、检测胎盘生长因子的方法。

技术介绍

[0002]胎盘生长因子(PLGF)最早于1991年由Maglione等从人的胎盘cDNA文库中分离纯化而得。PLGF主要由合体滋养层细胞合成，可与位于滋养层细胞和血管内皮细胞的酪氨酸酶受体结合，是一个对滋养层细胞功能有自分泌作用和对血管生长有旁分泌作用的蛋白。PLGF对滋养层细胞和内皮细胞功能有独特的调节作用，能够促进新生血管生成。检测孕妇血液PLGF水平在临床上可用于识别胎盘合体滋养层细胞存在供氧压力，对子痫前期进行预测、鉴别和治疗监测。

技术实现思路

[0003]本申请提供了一种胎盘生长因子检测试剂盒，其能够用于检测胎盘生长因子，并且提高抗干扰能力。
[0004]本申请的实施例是这样实现的：
[0005]在第一方面，本申请示例提供了一种胎盘生长因子检测试剂盒，其包括：胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液和吖啶标记的胎盘生长因子抗体液。
[0006]吖啶标记的胎盘生长因子抗体液中包括两种阻断剂。
[0007]在上述技术方案中，采用本申请的胎盘生长因子检测试剂盒配合化学发光免疫分析技术可用于检测待测物中的胎盘生长因子，胎盘生长因子检测试剂盒将抗体
‑
抗原反应的高度特异性与吖啶发光的高度灵敏性结合起来，利用吖啶发光反应产生的光子以检测产物浓度。并且，胎盘生长因子检测试剂盒利用两种阻断剂进行联合使用，减少了假阴/假阳性结果，从而达到提高试剂抗干扰的能力，提高检测结果的稳定性和准确性。
[0008]结合第一方面，在本申请的第一方面的第一种可能的示例中，上述两种阻断剂满足以下条件a～d中的一种：
[0009]a、两种阻断剂包括菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
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001，以及菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
‑
010、HIER
‑
E
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013和HIER
‑
E
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100中的一种；
[0010]b、两种阻断剂包括菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
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010，以及菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
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010
‑
D、HIER
‑
E
‑
013和HIER
‑
E
‑
100中的一种；
[0011]c、两种阻断剂包括菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
‑
001，以及Scantibodies阻断剂HBR
‑
PLUS、HBR
‑
1、HBR
‑
27和HBR Pro
‑
1中的一种；
[0012]d、两种阻断剂包括菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
‑
010，以及Scantibodies阻断剂HBR
‑
PLUS、HBR
‑
1、HBR
‑
27和HBR Pro
‑
1中的一种。
[0013]结合第一方面，在本申请的第一方面的第二种可能的示例中，上述胎盘生长因子
抗体包被的磁微粒悬液包括生物素标记的抗体包被链霉亲和素磁微粒悬液或胎盘生长因子抗体包被带羧基的磁微粒悬液。
[0014]第二方面，本申请示例提供了一种上述的胎盘生长因子检测试剂盒的制备方法，其包括：分别制备胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液和吖啶标记的胎盘生长因子抗体液，然后将胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液和吖啶标记的胎盘生长因子抗体液分装后组装成胎盘生长因子检测试剂盒。
[0015]在上述技术方案中，本申请的制备方法简便，制得的胎盘生长因子检测试剂盒性能稳定，可配合化学发光免疫分析技术用于检测待测物中的胎盘生长因子。
[0016]结合第二方面，在本申请的第二方面的第一种可能的示例中，上述胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液通过以下方法制得：
[0017]将链霉亲和素磁微粒悬液和生物素酯标记的胎盘生长因子单克隆抗体混合反应30～60min后，制得第一中间物，再将第一中间物和第一封闭剂混合反应30～60min后，制得胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液，胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液为生物素标记的抗体包被链霉亲和素磁微粒悬液。
[0018]链霉亲和素磁微粒悬液包括链霉亲和素磁微粒和第一稀释剂，第一稀释剂为包括牛血清白蛋白、聚乙二醇辛基苯基醚的5～20mmol/L的PBS缓冲液；
[0019]第一封闭剂为0.1～0.5wt％生物素缓冲液。
[0020]可选地，第一稀释剂中牛血清白蛋白的浓度为0.1～1wt％。
[0021]可选地，第一稀释剂中聚乙二醇辛基苯基醚的浓度为0.01～0.05wt％。
[0022]可选地，链霉亲和素磁微粒和生物素酯标记的胎盘生长因子单克隆抗体的质量比为10:0.02～0.2。
[0023]结合第二方面，在本申请的第二方面的第二种可能的示例中，上述生物素酯标记的胎盘生长因子单克隆抗体通过以下方法制得：
[0024]将生物素酯的二甲基亚砜溶液和胎盘生长因子单克隆抗体混合反应30～60min后，制得第二中间物，再将第二中间物和第一终止剂混合反应10～30min后，制得第三中间物，将第三中间物经PBS透析12～24h后，制得生物素酯标记的胎盘生长因子单克隆抗体。
[0025]第一终止剂为0.5～1mol/L的Tris缓冲液。
[0026]结合第二方面，在本申请的第二方面的第三种可能的示例中，上述胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液通过以下方法制得：
[0027]将羧基磁微粒悬液和第二稀释剂混合反应30～45min后，制得第四中间物，再将第四中间物和胎盘生长因子单克隆抗体混合反应2～3h后，制得第五中间物，将第五中间物和第二封闭剂混合反应30～45min后，制得胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液，胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液为胎盘生长因子抗体包被带羧基的磁微粒悬液。
[0028]羧基磁微粒悬液包括羧基磁微粒和第一稀释剂，第一稀释剂为包括牛血清白蛋白、聚乙二醇辛基苯基醚的5～20mmol/L的PBS缓冲液。
[0029]第二稀释剂为25mmol/L的1
‑
乙基
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐缓冲液。
[0030]第二封闭剂为25mmol/L的氨基乙酸缓冲液。
[0031]可选地，羧基磁微粒和胎盘生长因子单克隆抗体的质量比为10:0.02～0.2。
[0032]结合第二方面，在本申请的第二方面的第四种可能的示例中，上述吖啶标记的胎
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种胎盘生长因子检测试剂盒，其特征在于，所述胎盘生长因子检测试剂盒包括：胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液和吖啶标记的胎盘生长因子抗体液；所述吖啶标记的胎盘生长因子抗体液中包括两种阻断剂。2.根据权利要求1所述的胎盘生长因子检测试剂盒，其特征在于，所述两种阻断剂满足以下条件a～d中的一种：a、所述两种阻断剂包括菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
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001，以及菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
‑
010、HIER
‑
E
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013和HIER
‑
E
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100中的一种；b、所述两种阻断剂包括菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
‑
010，以及菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
‑
010
‑
D、HIER
‑
E
‑
013和HIER
‑
E
‑
100中的一种；c、所述两种阻断剂包括菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
‑
001，以及Scantibodies阻断剂HBR
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PLUS、HBR
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1、HBR
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27和HBR Pro
‑
1中的一种；d、所述两种阻断剂包括菲鹏生物阻断剂HIER
‑
E
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010，以及Scantibodies阻断剂HBR
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PLUS、HBR
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1、HBR
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27和HBR Pro
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1中的一种。3.根据权利要求1所述的胎盘生长因子检测试剂盒，其特征在于，所述胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液包括生物素标记的抗体包被链霉亲和素磁微粒悬液或胎盘生长因子抗体包被带羧基的磁微粒悬液。4.一种权利要求1～3任一项所述的胎盘生长因子检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述胎盘生长因子检测试剂盒的制备方法包括：分别制备所述胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液和所述吖啶标记的胎盘生长因子抗体液，然后将所述胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液和所述吖啶标记的胎盘生长因子抗体液分装后组装成所述胎盘生长因子检测试剂盒。5.根据权利要求4所述的胎盘生长因子检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液通过以下方法制得：将链霉亲和素磁微粒悬液和生物素酯标记的胎盘生长因子单克隆抗体混合反应30～60min后，制得第一中间物，再将所述第一中间物和第一封闭剂混合反应30～60min后，制得所述胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液，所述胎盘生长因子抗体包被的磁微粒悬液为生物素标记的抗体包被链霉亲和素磁微粒悬液；所述链霉亲和素磁微粒悬液包括链霉亲和素磁微粒和第一稀释剂，所述第一稀释剂为包括牛血清白蛋白、聚乙二醇辛基苯基醚的5～20mmol/L的PBS缓冲液；所述第一封闭剂为0.1～0.5wt％生物素缓冲液；...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋小龙，
申请(专利权)人：成都思瑞多医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：