唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒及检测唾液酸酶NEU1的方法技术

本申请提供一种唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒及检测唾液酸酶NEU1的方法，属于免疫检测技术领域。唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒包括第一试剂和第二试剂。第一试剂中含有免疫磁微粒，免疫磁微粒为第一磁微粒和/或第二磁微粒；第一磁微粒为表面连接有包被物的链霉亲和素磁微粒，包被物为生物素酯标记的第一抗体；第二磁微粒为表面连接有第二抗体的羧基磁微粒。第二试剂中含有发光标记物标记的第三抗体。第一抗体、第二抗体、第三抗体均为能够与NEU1特异性结合的抗体。本申请提供的唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒兼具高灵敏度、高准确度、高重复性、宽检测范围以及高稳定性，可快速对待测样本(特别是精浆样本)中的NEU1的含量进行检测。进行检测。

【技术实现步骤摘要】
唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒及检测唾液酸酶NEU1的方法


[0001]本申请涉及免疫检测
，具体而言，涉及一种唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒及检测唾液酸酶NEU1的方法。

技术介绍

[0002]唾液酸(Sialic Acid，SA)又称神经氨酸(Neuraminic Acid)，是一类普遍存在于生物体内的糖蛋白或糖脂分子末端的九碳酸性单糖的总称。精子膜表面存在唾液酸，唾液酸在精子发生、附睾精子成熟及精卵结合过程中均发挥重要作用。
[0003]唾液酸酶又称神经氨酸酶(NEU)，是一个在细胞表面分解唾液酸的酶家族。唾液酸酶主要包括NEU1、NEU2、NEU3和NEU4四种亚型蛋白，其中，精子膜表面存在NEU1和NEU3，且NEU1和NEU3能够影响精子生殖能力。唾液酸在人的体外获能过程中，精子膜上的唾液酸以单个糖分子的方式从精子的细胞膜上脱落，而与此同时，精子膜上的唾液酸酶(NEU1或NEU3)由于精子膜的流动性而脱落，并参与剪切致单个唾液酸分子脱落。因此，对精浆样本中NEU1或NEU3进行检测，可以用于评估精子质量，以判断本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒，其特征在于，包括：第一试剂和第二试剂；所述第一试剂中含有免疫磁微粒，所述免疫磁微粒为第一磁微粒和/或第二磁微粒；所述第一磁微粒为表面连接有包被物的链霉亲和素磁微粒，所述包被物为生物素酯标记的第一抗体；所述第二磁微粒为表面连接有第二抗体的羧基磁微粒；所述第二试剂中含有发光标记物标记的第三抗体；其中，所述第一抗体、所述第二抗体、所述第三抗体均为能够与NEU1特异性结合的抗体。2.根据权利要求1所述的唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述发光标记物选自吖啶酯、三联吡啶钌、鲁米诺以及AMPPD中的任意一种；可选地，所述发光标记物选自吖啶酯。3.根据权利要求1所述的唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述第一磁微粒中，所述链霉亲和素磁微粒与所述包被物的质量比为100:(0.2
‑
2)；所述包被物中，所述第一抗体与所述生物素酯的质量比为20:(1
‑
2)；和/或，所述第二磁微粒中，所述羧基磁微粒与所述第二抗体的质量比为100:(0.2
‑
2)。4.根据权利要求3所述的唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述免疫磁微粒为第一磁微粒；可选地，所述免疫磁微粒在所述第一试剂中的质量浓度为0.2
‑
1mg/mL。5.根据权利要求1所述的唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述发光标记物标记的第三抗体中，所述第三抗体与所述发光标记物的质量比为20:(1
‑
5)；可选地，所述发光标记物标记的第三抗体在所述第二试剂中的质量浓度为0.05
‑
0.5μg/mL。6.根据权利要求3所述的唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述第一试剂中还含有蛋白保护剂；可选地，所述蛋白保护剂与所述免疫磁微粒的质量比为1:(0.4
‑
0.8)；可选地，所述蛋白保护剂在所述第一试剂中的质量浓度为0.5
‑
1.0mg/mL。7.根据权利要求6所述的唾液酸酶NEU1化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述免疫磁微粒为第一磁微粒；所述第一试剂的制备方法包括：将所述链霉亲和素磁微粒与第一稀释液混合，磁液分离后得到第一沉淀物；将所述第一沉淀物与第二稀释液混合，然后加入所述包被物混合30
‑
60min，磁液分离后得到第二沉淀物；将所述第二沉淀物与第三稀释液混合，然后加入第一封闭液混合30
‑
60min，磁液分离后得到第三沉淀物；将所述第三沉淀物与第四稀释液混合；其中，所述第一稀释液、所述第二稀释液、所述第三稀释液以及所述第四稀释液各自独立地包括5
‑
20mM的PBS缓冲液、0.1
‑
1wt％的牛血清白蛋白、0.01
‑
0.05wt％的Triton X
‑
100以及0.05
‑
0.1wt％的所述蛋白保护剂；所述第一封闭液包括0.1
‑
0.5wt％的生物素缓冲液；可选地，所述包被物的制备方法包括：将所述生物素酯溶于二甲基亚砜后，加入所述第一抗体混合30
‑
60min；然后加入第一终止液...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋小龙，马芳，姚凯成，
申请(专利权)人：成都思瑞多医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：