一种预防蚜虫红蜘蛛感染的活性蛋白制造技术

本发明专利技术涉及一种预防蚜虫红蜘蛛感染的活性蛋白，属于植物植物病虫害预防技术领域。通过对蚜虫、红蜘蛛进行饲养，当虫群达到一定规模后，收集虫群，并对虫群进行饥饿处理，而后通过气味诱使蚜虫、红蜘蛛大量分泌唾液酶，在对虫群进行速冻、研磨、超临界CO2萃取以及减压蒸馏后，得到活性蛋白的提取物。本发明专利技术的有益效果：经过处理得到的蚜虫、红蜘蛛活性蛋白提取物兑水喷洒在植物的表面，能够有效的激发植物的防御反应，在虫害来临之前喷洒能够有效的预防，同时配合杀虫剂使用，除虫效果更佳，在虫害初期便能够对虫害有效的控制，并大大减少了杀虫剂的用量，有助于环境的保护。有助于环境的保护。

【技术实现步骤摘要】
一种预防蚜虫红蜘蛛感染的活性蛋白


[0001]本专利技术涉及植物病虫害预防
，具体涉及一种预防蚜虫红蜘蛛感染的活性蛋白。

技术介绍

[0002]植物病虫害导致农作物产量下降、品质降低，造成了巨大的经济损失；目前对病虫害主要依赖化学防治的手段，虽然使用化学药剂具有一定的防治效果，但是随着化学药剂的长期使用，药剂的有效性降低，为了提高产量，不得不加大化学药剂的使用量，不仅直接增加种植成本，还形成了恶性循环，并且由于化学药剂残留，还会导致生态环境的污染。
[0003]化学药剂以病原菌或害虫为靶向，忽视了被危害植物本身对外来生物的抵抗能力，当植物受到外界刺激或处于逆境条件时，能够调节自身的防卫和代谢系统产生免疫反应，植物的这种防御反应或免疫抗性反应，可以使植物延迟或减轻病害的发生和发展。
[0004]植物免疫诱抗剂被称之为“植物疫苗”，是继人用疫苗、动物疫苗后，疫苗工程技术出现的新领域。植物免疫诱抗剂对农作物病虫害没有直接的杀灭作用，施用在农作物上可激活分子免疫系统，诱导农作物产生抵御或防控农作物病虫害的物质，从而解决化学防治存在病原菌抗药性、环境污染和对人畜副作用的问题，实现农产品无害化生产。
[0005]因此，各种激发植物自身防御体系的抗病、抗虫的植物免疫诱抗剂已成为生物制剂研发的热点。如2006年赵丽艳等探究了麦长管蚜取食诱导小麦防御反应的机理，对比机械损伤以及蚜虫取食，发现蚜虫取食可以有效的诱导小麦的防御反应，而机械损伤则不行(赵丽艳等.麦长管蚜取食诱导小麦防御反应的生化及分子机制[C]//.科技创新与绿色植保——中国植物保护学会2006学术年会论文集,2006:767)。
[0006]由于植物对害虫的特异性反应，使得可以从害虫体内提取特定的激发子，从而激发植物的防御反应，但相关的研究至今比较缺乏。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是提供一种预防蚜虫红蜘蛛感染的活性蛋白，以解决化学药剂的大量使用，蚜虫、红蜘蛛抗药性的日益增加以及药剂残留导致生态污染的问题。
[0008]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种预防蚜虫、红蜘蛛感染的活性蛋白，包括以下步骤：
[0009]1)将蚜虫、红蜘蛛置于放置有新鲜十字花科蔬菜菜叶的饲养箱中；
[0010]2)调节饲养温度20～25℃，相对湿度70％～80％，光照时间16小时每天，并保持通风；
[0011]3)当蚜虫、红蜘蛛取食一段时间后菜叶满足不了蚜虫、红蜘蛛的需求，及时添加新鲜的菜叶；
[0012]4)步骤3)重复若干次，蚜虫、红蜘蛛的数量达到一定的规模，将蚜虫、红蜘蛛收集到没有食物的饲养箱中；
[0013]5)将得到的蚜虫、红蜘蛛禁食一段时间后，向饲养箱中通入夹杂着新鲜菜叶气息的空气；
[0014]6)将饲养箱中的蚜虫、红蜘蛛迅速冷冻；
[0015]7)收集蚜虫、红蜘蛛的尸体并在研钵中快速磨粉；
[0016]8)以乙醇作为夹带剂，通过超临界CO2进行萃取，并得到萃取液；
[0017]9)将得到的萃取液减压蒸馏，蒸干夹带剂并得到粉末状物质，即为活性蛋白提取物。
[0018]进一步地，所述的步骤2)中，通风口覆盖纱布，纱布孔径小于0.1mm。
[0019]进一步地，所述的步骤3)中，采用少投喂，勤添加的方式。
[0020]进一步地，所述的步骤4)中，通过诱光灯对蚜虫、红蜘蛛进行收集。
[0021]进一步地，所述的步骤5)中，蚜虫、红蜘蛛禁食的时间为1～2天。
[0022]进一步地，所述的步骤6)中，通过手提式冷冻器对蚜虫、红蜘蛛迅速冷冻。
[0023]进一步地，所述的步骤8)中，乙醇纯度为99％，用量为步骤7)得到粉末重量的30～40％，萃取条件：压力0.3～0.5MPa，温度0～20℃，CO2气体流量18～20m3/h，萃取时间6～8h，得到萃取液。
[0024]进一步地，所述的步骤9)中，减压蒸馏的温度不高于40℃。
[0025]本专利技术的有益效果：经过处理得到的蚜虫、红蜘蛛活性蛋白提取物兑水喷洒在植物的表面，能够有效的激发植物的防御反应，在虫害来临之前喷洒能够有效的预防，同时配合杀虫剂使用，除虫效果更佳，在虫害初期便能够对虫害有效的控制，并大大减少了杀虫剂的用量，有助于环境的保护。
具体实施方式
[0026]下面对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
[0027]实施例：
[0028]在本专利技术中，步骤1)采用新鲜十字花科蔬菜菜叶对蚜虫、红蜘蛛进行饲养，其中，菜叶可以选择卷心菜、白菜等，步骤2)饲养的条件，温度、湿度以及光照等，为蚜虫和红蜘蛛都适宜的温度，保证蚜虫和红蜘蛛的稳定繁殖，在饲养的过程中需要不断的添加新鲜的菜叶，因此步骤3)中新鲜的菜叶采用勤投喂，少添加的方式，从而保证菜叶的新鲜度，避免由于菜叶不新鲜导致的蚜虫、红蜘蛛死亡以及不能稳定繁殖的情况发生，同时需要注意，投喂的过程中避免有蚜虫以及红蜘蛛逃逸，危害周边植物，并同时菜叶的残渣不能够取出，因为菜叶的残渣上有虫卵，一方面是繁殖的需要，另一方面取出也会危害环境，另外通风口也需要覆盖纱布，且纱布的孔径需要小于0.1mm，从而避免蚜虫、红蜘蛛逃逸。
[0029]经过增殖后的蚜虫、红蜘蛛，通过诱光灯将它们收集起来，这是利用了它们的趋光性，过程中可以采用另外一个空白的饲养箱，将它们的通风口对接，而后对空白饲养箱进行光照，原先的饲养箱保持黑暗，从而诱使蚜虫、红蜘蛛转移到新的饲养箱中，转移完毕后，封上通风口即可，此时步骤5)中对蚜虫、红蜘蛛进行饥饿处理，将它们饿一到两天，一到两天，蚜虫、红蜘蛛是饿不死的，然后在通风口处放置新鲜的菜叶，并用小风机或是扇子等让气味扩散至饲养箱中，可以看到饲养箱中的蚜虫、红蜘蛛在食物的刺激下发生躁动，此时它们口腔中唾液酶也大量的分泌，它们口腔中的唾液酶是能够引起植物的防御反应的，但是防御
反应的机制很复杂，也不仅仅只是唾液酶，还有很多其他的因素，但饥饿处理增加了唾液酶的量，相应的也会更加容易激发植物的防御反应。
[0030]经过饥饿处理的蚜虫、红蜘蛛，在步骤6)中通过手提式冷冻器迅速冷冻，手提式冷冻器喷出的液氮，杀死冷冻蚜虫、红蜘蛛的同时，能够保证活性物质不失活，此时将饲养箱中的蚜虫、红蜘蛛取出至研钵中快速磨粉，过程中注意防护，避免冻伤，磨完粉的粉末，在低温条件下进行CO2超临界萃取，过程中采用乙醇作为夹带剂，将活性蛋白物质夹带萃取出来，而后在不高于40℃的温度下对萃取液进行减压蒸馏，过程中温度控制不能过高，过高会导致活性蛋白失活，从而影响对植物防御反应的激发，减压蒸馏得到的粉末即为活性蛋白提取物，此时调配合适的比例，即可用于实验探究，探究结果如下。
[0031]实施例1
[0032]取玉米为研究对象，以100株玉米为一组，在玉米的小喇叭口期(7～8片叶)在植株上均匀的喷洒不同浓度活性蛋白提取物溶液(质量比)，一段时间后，观察单株玉米植株上蚜虫、红蜘蛛的平本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种预防蚜虫红蜘蛛感染的活性蛋白，其特征在于，包括以下步骤：1)将蚜虫、红蜘蛛置于放置有新鲜十字花科蔬菜菜叶的饲养箱中；2)调节饲养温度20～25℃，相对湿度70％～80％，光照时间16小时每天，并保持通风；3)当蚜虫、红蜘蛛取食一段时间后菜叶满足不了蚜虫、红蜘蛛的需求，及时添加新鲜的菜叶；4)步骤3)重复若干次，蚜虫、红蜘蛛的数量达到一定的规模，将蚜虫、红蜘蛛收集到没有食物的饲养箱中；5)将得到的蚜虫、红蜘蛛禁食一段时间后，向饲养箱中通入夹杂着新鲜菜叶气息的空气；6)将饲养箱中的蚜虫、红蜘蛛迅速冷冻；7)收集蚜虫、红蜘蛛的尸体并在研钵中快速磨粉；8)以乙醇作为夹带剂，通过超临界CO2进行萃取，并得到萃取液；9)将得到的萃取液减压蒸馏，蒸干夹带剂并得到粉末状物质，即为活性蛋白提取物。2.根据权利要求1所述的一种预防蚜虫红蜘蛛感染的活性蛋白，其特征在于：所述的步骤2)中，通风口覆盖纱布，纱布孔径小于0.1mm。3.根据权利要求1所述的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：柏玉兰，张强，徐群堂，赵进海，石巧慧，
申请(专利权)人：河南柏裕植物免疫科技有限公司，
类型：发明
国别省市：