一种动物毛发样品中β-受体激动剂药物残留检测的处理、确认方法及应用技术

本发明专利技术涉及兽药残留检测领域，具体涉及一种动物毛发样品中β

【技术实现步骤摘要】
一种动物毛发样品中
β
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受体激动剂药物残留检测的处理、确认方法及应用


[0001]本专利技术涉及食品安全检测领域，具体而言，涉及一种动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检测的处理方法、确认检测方法及其应用。

技术介绍

[0002]克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等是最常见的β
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受体激动剂类药物，具有促进动物生长、降低脂肪含量、提高瘦肉率的作用，因而常被违规作为生长添加剂被广泛关注,但一受体激动剂在动物体内有一定的残留时间,通过食物链进入人体后会使一些易感人群产生明显的如肌肉震颤、心悸、精神紧张、恶心、头晕等中毒症状，危害人类健康。我国早在1997年明令禁止克伦特罗作饲料添加剂，根据农业农村部250号公告《食品动物禁止使用的药物及其他化合物清单》中已经对克仑特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇等β
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受体激动剂类药物在可食用动物组织中做出禁用规定。但现实养殖过程中，不法商户受经济利益驱使,在畜禽生产上β
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受体激动剂类药物的使用仍然屡禁不止，因此，制定残留检测方法对于保障食品安全具有重要现实意义。
[0003]由于兽药残留检测的时滞性，兽药在生物组织中代谢快容易被清除，所以追溯困难，动物毛发是一种易于采集、转运、贮存和提取的样本，采集方法是非破坏性的，不会引起动物的任何伤害和疼痛，多项研究表明动物毛发中可以蓄积多种兽药，包括β
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受体激动剂类、激素类、磺胺类、氟喹诺酮类、四环素类等药物，同时动物毛发中兴奋剂类药物在代谢活性低、稳定，因此动物毛发可作为评价动物性产品中β
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受体激动剂类药物残留量的重要参考组织。
[0004]关于动物毛发中β
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受体激动剂类的检测方法鲜有报道，公告号为CN 103675145 A的中国专利技术专利，公开了猪毛发中西马特罗残留量的检测方法，然而，这种方法存在以下问题：方法中适用组织和检测药物种类范围有限，方法处理的水解方式易造成药物损失，检测结果准确性不高。公告号为CN 107179358 A的中国专利技术专利，公开了动物毛发中瘦肉精的残留的检测方法，然而，这种方法存在以下问题：清洗试剂和水解方法不合理，方法中未对灵敏度等参数进行评价，β
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受体激动剂类检测限高，灵敏度低，需要进行方法确认分析评价从而避免出现漏检情况。

技术实现思路

[0005]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其目的在于提供一种利用动物毛发无需宰杀动物，实现活体检测β
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受体激动剂类药物的方法，动物毛发中兴奋剂类药物代谢活性低、稳定，采集不引起动物伤害，处理方法得当简单，改善现有处理方法操作过程中清洗和水解方式选择不当造成的检测准确性不高的问题。
[0006]在本专利技术另一个方面中，提供了一种动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检
测的确认检测方法，其目的在于，实现多种β
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受体激动剂类药物（克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、非诺特罗、喷布特罗、妥布特罗、特布他林、西马特罗、氯丙那林、沙美特罗、苯乙醇胺A、西布特罗、齐帕特罗 、克伦普罗、马布特罗、克伦塞罗、溴布特罗、班布特罗）的同时测定，能在短时间内快速准确地完成多种药物的定性定量分析，满足实际检测的时效性要求，准确度、灵敏度和精密度高，为动物性产品中β
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受体激动剂类药物残留量测定提供痕量检测方法参考依据。
[0007]在本专利技术另一个方面中，提供了一种动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检测的确认检测方法在检测克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、非诺特罗、喷布特罗、妥布特罗、特布他林、西马特罗、氯丙那林、沙美特罗、苯乙醇胺A、西布特罗、齐帕特罗 、克伦普罗、马布特罗、克伦塞罗、溴布特罗、班布特罗中的应用。
[0008]本专利技术是采用以下技术方案实现的：在第一方面，本专利技术提供了一种动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其包括：S1将动物毛发样品进行处理和制备，选取、清洗、干燥、研磨，制备待测样品；S2将待测样品进行提取处理，待测样品与盐酸溶液进行混合，得到混合溶液，水浴水解，离心后上清液备用；S3将提取后上清液、净化剂加入到净化管中进行混合、离心，得到净化的提取物上清液过滤膜后，得到待测溶液。
[0009]其中，净化管为EMR
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Lipids净化管，净化剂为GCB，过滤滤膜孔径为0.22 μm。
[0010]进一步地，在本申请较佳实施例中，动物毛发为猪、牛和羊的毛发。
[0011]进一步地，在本申请较佳实施例中，步骤S1包括：选取动物毛发样品，取 2 g 加入 50 mL 烧杯中；加入十二烷基磺酸钠溶液，超声清洗，水洗毛发；置于电热干燥箱中烘干；用球磨机将其粉碎至粉末，取试料0.5 g于10 mL离心管内，保存备用；其中，动物毛发选取脖颈处皮肤的毛发，十二烷基磺酸钠溶液的浓度为0.01g/ml，体积为20 mL ，超声清洗时间为30
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60min，优选为30min，电热干燥箱温度为40
ꢀ‑
50℃，优选为 40 ℃，称取试样选择精度为0.001g的天平，试样保存温度为
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18℃。
[0012]进一步地，在本申请较佳实施例中，步骤S2包括：将待测样品与盐酸溶液混合，涡旋混匀；水浴水解，高速离心，取上清液备用；其中，所述盐酸溶液浓度为0.1
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0.6mol/L，优选为0.1mol/L，盐酸溶液体积为5 mL，水浴温度为40
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70℃，优选为60℃，水解时间为4h，离心温度为4
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6℃，优选为4℃，离心转速为6000
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8000 r/min，优选为7000r/min，离心时间为10min。
[0013]进一步地，在本申请较佳实施例中，步骤S3包括：S31将超纯水加入净化管中进行活化处理，得到活化的净化管；S32将提取物上清液加入活化的净化管与净化剂混合，得到净化混合溶液；S33将净化混合溶液进行离心处理，得到净化的提取物上清液；其中，GCB用量为25
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50mg，优选为50mg，离心温度为0
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8℃，优选为4
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6℃，离心速度为7000
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10000r/min，优选为8000
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9000r/min，离心时间为5
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15min，优选为8
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10min。
[0014]在第二方面，本专利技术提供了一种动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检测的
确认检测方法，包括：采用液相色谱
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质谱联用法对动物毛发样品进行检测；其中，按照上述的动物毛发样品中β
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其特征在于，其包括：S1将动物毛发样品进行处理和制备，选取、清洗、干燥、研磨，制备待测样品；S2将待测样品进行提取处理，待测样品与盐酸溶液进行混合，得到混合溶液，水浴水解，离心后上清液备用； S3将提取后上清液、净化剂加入到净化管中进行混合、离心，得到净化的提取物上清液过滤膜后，得到待测溶液。2.根据权利要求1所述的动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其特征在于，所述动物毛发为猪、牛和羊的毛发。3.根据权利要求1所述的动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其特征在于，所述β
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受体激动剂类药物为克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、非诺特罗、喷布特罗、妥布特罗、特布他林、西马特罗、氯丙那林、沙美特罗、苯乙醇胺A、西布特罗、齐帕特罗、克伦普罗、马布特罗、克伦塞罗、溴布特罗、班布特罗中的一种或几种。4.根据权利要求1所述的动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其特征在于，步骤S1包括：选取动物毛发样品，取2g加入50mL烧杯中；加入十二烷基磺酸钠溶液，超声清洗，水洗毛发；置于电热干燥箱中烘干；用球磨机将其粉碎至粉末，取试料0.5g于10mL离心管内，保存备用；其中，动物毛发选取脖颈处皮肤的毛发，十二烷基磺酸钠溶液的浓度为0.01g/ml，体积为20mL，超声清洗时间为30min，电热干燥箱温度为40℃，称取试样选择精度为0.001g的天平，试样保存温度为
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18℃。5.根据权利要求1所述的动物毛发样品中β
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受体激动剂类药物残留检测的处理方法，其特征在于，步骤S2所述的提取过程为：将待测样品与盐酸溶液混合，涡旋混匀；水浴水解，高速离心，取上清液备用；其中，所述盐酸溶液浓度为0.1mol/L，盐酸溶液体积为5mL，水浴温度为60℃，水解时间为4h，离心温度为4℃，离心转速为7000r/min，离心时间为10min。6.根据权利要求1所述的动物毛发样品中β
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【专利技术属性】
技术研发人员：李文辉，于寒冰，方芳，孙志文，
申请(专利权)人：北京市农产品质量安全中心，
类型：发明
国别省市：