针对非洲猪瘟病毒的疫苗及其使用方法技术

本发明专利技术的一个方面涉及能够表达在哺乳动物中引发针对ASFV病毒的免疫反应的至少一种非洲猪瘟病毒(ASFV)抗原的核酸构建体及其使用方法。用方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对非洲猪瘟病毒的疫苗及其使用方法
[0001]相关申请的引证
[0002]本申请要求于2019年12月19日提交的美国临时申请第62/950,194号的优先权，其特此通过引证整体并入本文。


[0003]本专利技术涉及一种编码至少一种非洲猪瘟病毒(ASFV)抗原的重组核苷酸序列及其功能片段。本专利技术还涉及编码ASFV抗原的多个重组核苷酸序列的组合，用于产生针对非洲猪瘟病的免疫力。本专利技术的组合物提供了用于诱导免疫反应以及用于预防性和/或治疗性地使个体针对非洲猪瘟病毒免疫的改进方法。

技术介绍

[0004]非洲猪瘟病毒(ASFV)是一种来自非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae family)的大型双链DNA病毒。ASFV是家猪出血热的病原体，死亡率很高；一些分离病毒可在感染后一周内导致动物死亡。ASFV持续感染其天然宿主，包括疣猪、非洲灌丛野猪和蜱属的软蜱，所述软蜱可能充当载体，而没有疾病迹象。
[0005]ASFV不会引起人类产生疾病；然而，它的影响可通过农场直接损失感受到。ASFV在欧洲已经感染了超过50万头猪，并且大量的猪被预防性扑杀。
[0006]用杆状病毒表达的非洲猪瘟病毒蛋白EP402R/CD2v进行疫苗接种表现出针对同源非洲猪瘟病毒攻击的重要保护程度。(Ruiz
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Gonzalvo等人，1996，《病毒学(Virology)》，218(1):285
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289)。然而，用杆状病毒表达的重组p54和p30蛋白(其参与病毒附着和内化步骤)对猪进行免疫并不能抵御非洲猪瘟病毒的强毒性攻击。尽管产生了中和抗体，但在杆状病毒中产生的编码p30、p54、p22和p72的蛋白质也不能保护猪免受病毒攻击(Neilan等人，2004，《病毒学》，319(2):337
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342)。
[0007]p30和p54的DNA免疫原连接到识别猪白细胞抗原II的抗体的单个可变链，用于测试体内免疫靶向。虽然可以在低水平下诱导针对非洲猪瘟病毒蛋白质的特异性T细胞；但既没有获得中和抗体，也没有实现针对毒性攻击的保护。(Argilaguet等人，2011，《疫苗(Vaccine)》，29:5379
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5385)。对与病毒p30和p54蛋白融合的HA的DNA EC结构域进行了研究。在没有针对非洲猪瘟病毒攻击的保护的情况下，诱导猪体内的体液和细胞免疫反应(可能是CD4反应)(Argilaguet等人，2012，《公共科学图书馆：综合(PLoS One)》，7(9):e40942)。
[0008]采用了一种改进抗原加工的方法。研究了DNA构建体(与泛素融合的ASFV p54和p30)。在没有非洲猪瘟病毒特异性抗体的情况下，该疫苗对攻击具有部分保护作用；保护与T细胞反应相关，并且观察到对p54和p30抗原的抗原特异性CD8+T细胞(Argilaguet等人，2012，《公共科学图书馆：综合》,7(9):e40942；Lacasta等人，2014，《病毒学杂志(J Virol)》,88(22):13322
‑
13332)。
[0009]目前非洲猪瘟病毒疫苗方法的这些结果增加了关于抗体介导的中和在非洲猪瘟
病毒保护中的作用的混淆(Escribano等人，2013，《病毒研究(Virus Res)》，173(1):101
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109)。
[0010]因此，仍然需要开发一种用于预防和治疗ASFV的疫苗。本专利技术解决该需要。

技术实现思路

[0011]在一个实施例中，本专利技术涉及一种核酸分子，其包含编码至少一种合成非洲猪瘟病毒(ASFV)抗原的核苷酸序列。
[0012]在一个实施例中，该核酸分子包含至少一种编码肽的核苷酸序列，该肽包含在SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24或SEQ ID NO:30的氨基酸序列的全长上具有至少约90％同一性的氨基酸序列。在一个实施例中，该核酸分子包含免疫原性片段，该片段在SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24或SEQ ID NO:30的氨基酸序列的至少60％上包含至少约90％同一性。在一个实施例中，该核酸分子包含至少一种编码肽的核苷酸序列，该肽包含SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24或SEQ ID NO:30的氨基酸序列。在一个实施例中，该核酸分子包含免疫原性片段，该片段包含SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24或SEQ ID NO:30的氨基酸序列的至少60％。
[0013]在一个实施例中，该核酸分子是DNA分子或RNA分子。
[0014]在一个实施例中，该核酸分子包含在SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:29的核苷酸序列的全长上具有至少约90％同一性的核苷酸序列。在一个实施例中，该核酸分子包含在SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:2 7、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:29的核苷酸序列的至少60％上具有至少约90％同一性的核苷酸序列免疫原性片段。在一个实施例中，该核酸分子包含SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:29的核苷酸序列。在一个实施例中，该核酸分子包含SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23或SEQ ID NO:29的核苷酸序列的免疫原性片段。
[0015]在一个实施例中，编码肽可操作地连接到选自起始密码子、IgE前导序列和终止密码子的至少一个调控序列。
[0016]在一个实施例中，该核酸分子编码至少两个肽，该肽包含选自由以下组成的群组的氨基酸序列：a)在选自由SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:30组成的群组的氨基酸序列的全长上具有至少约90％同一性的氨基酸序列，b)在选自由SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:30组成的群组的氨基酸序列的至少60％上包含至少约90％同一性的免疫原性片段，c)选自由SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:30组成的群组的氨基酸序列，和d)包含选自由SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:30组成的群组的氨基酸序列的至少60％的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种核酸分子，其包含编码至少一种合成非洲猪瘟病毒(ASFV)抗原的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的核酸分子，其包括至少一种编码肽的核苷酸序列，所述肽包含选自由以下组成的群组的氨基酸序列：a)在选自由SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:30组成的群组的氨基酸序列的全长上具有至少约90％同一性的氨基酸序列，b)在选自由SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:30组成的群组的氨基酸序列的至少60％上包含至少约90％同一性的免疫原性片段，c)选自由SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:30组成的群组的氨基酸序列，和d)包含选自由SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:30组成的群组的氨基酸序列的至少60％的免疫原性片段。3.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述核酸分子选自由DNA分子和RNA分子组成的群组。4.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述核酸分子包含选自由以下组成的群组的至少一个核苷酸序列：a)在选自由SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:29组成的群组的核苷酸序列的全长上具有至少约90％同一性的核苷酸序列，b)在选自由SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:29组成的群组的核苷酸序列的至少60％上具有至少约90％同一性的核苷酸序列的免疫原性片段，c)选自由SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:29组成的群组的核苷酸序列，和d)选自由SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:29组成的群组的核苷酸序列的免疫原性片段。5.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述编码肽可操作地连接到选自由起始密码子、I...

【专利技术属性】
技术研发人员：卡尔，
申请(专利权)人：威斯塔解剖学和生物学研究所，
类型：发明
国别省市：