一种融合蛋白的快速分析方法技术

本发明专利技术公开了一种融合蛋白的快速分析方法，包含以下步骤：取融合蛋白进行变性后换液，换液后进行切糖处理后采用毛细管电泳进行分析，针对融合蛋白糖基化位点多、糖型复杂造成的峰形差、响应值不高的问题，提供了一种高效、准确的抗体纯度分析方法。准确的抗体纯度分析方法。准确的抗体纯度分析方法。

【技术实现步骤摘要】
一种融合蛋白的快速分析方法


[0001]本专利技术涉及生物分离分析领域，特别是涉及一种利用还原法毛细管电泳技术进行融合蛋白的快速分析方法。

技术介绍

[0002]抗体是蛋白类大分子，具有复杂的结构特征，主要由Fab和Fc两大功能区组成，在Fab段和Fc段特定的位点存在糖基化修饰。糖基化修饰形成的糖链仅仅占整个抗体的3％，尽管比例不高，但糖链结构却发挥着极其重要的作用。据估计超过50％的人蛋白是糖基化的。许多健康和疾病生物标记是糖基化的蛋白质并且具体的糖形可以与健康或疾病状态关联。这包括与癌症、糖尿病、炎症和其它医疗状况以及发育相关的糖基化的蛋白质。另外，糖基化的蛋白质不仅仅限于人或哺乳动物，而是发现于所有真核系统以及原核生物、古细菌(Archaea)和植物中。糖基化修饰不仅对维持抗体的结构有重要作用，同时一些特定的糖基化修饰类型以及不同的糖基化修饰程度均会影响抗体的安全性特征，而且，糖基化修饰也影响药物的有效性。
[0003]抗体药物的糖基化形式主要为N
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糖基化，涉及的单糖主要：葡萄糖、半乳糖、甘露糖、N
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种融合蛋白的快速分析方法，其特征在于，采用毛细管电泳法分析对融合蛋白进行分析，并包含对融合蛋白进行切糖处理的步骤。2.根据权利要求1所述的融合蛋白的快速分析方法，其特征在于，所述切糖处理是对样品采用酶切去除糖基化修饰来实现的。3.根据权利要求1所述的融合蛋白的快速分析方法，其特征在于，所述切糖处理采用的酶的种类为PNGaseF、糖苷内切酶H、重组糖苷内切酶F2的一种或几种。4.根据权利要求3所述的融合蛋白的快速分析方法，其特征在于，所述分析方法在切糖处理之前需经过变性处理。5.根据权利要求4所述的融合蛋白的快速分析方法，其特征在于，所述变性步骤需要加入变性液。6.根据权利要求5所述的融合蛋白的快速分析方法，其特征在于，所述变性液为盐酸胍Tris
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HCl缓冲溶液和/或PNGaseF酶自带变性液。7.根据权利要求1
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6其中任意一项所述的融合蛋白的快速分析方法，其特征在于，所述融合蛋白为抗体、抗体融合蛋白、抗体细胞因子融合蛋白。8.根据权利要7所述的融合蛋白快速分析方法，其特征在于，所述融合蛋白还包含Fc区，所述Fc区选自IgG1、IgG2、IgG3和/或IgG4。9.根据权利要求8所述的融合蛋白的快速分析方法，其特征在于，所述融合蛋白的靶点为Her
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2、CD20、EGFR、CD24、B7H3、CEA、CD47、PD
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L1、P...

【专利技术属性】
技术研发人员：周莹，马昀，吴崇兵，高超，姜晓玲，柳梦婷，武慧敏，
申请(专利权)人：盛禾中国生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：