检测环状RNA和/或所述环状RNA表达量的制剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用制造技术

本发明专利技术属于分子标志物技术领域，具体涉及检测环状RNA和/或所述环状RNA表达量的制剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用。本发明专利技术以环状RNAhsa_circ_0071106和/或hsa_circ_0000825作为一种新的结直肠癌检测分子标志物，所述标志物在结直肠癌患者癌组织中特异性下调表达，利用该分子标志物可以简单、快捷地进行结直肠癌诊断，成为结直肠癌检测诊断、病理分级、临床分期、治疗疗效判断的有效工具，具有良好的临床应用前景。床应用前景。床应用前景。

【技术实现步骤摘要】
检测环状RNA和/或所述环状RNA表达量的制剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用


[0001]本专利技术属于分子标志物
，具体涉及检测环状RNA和/或所述环状RNA表达量的制剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用。

技术介绍

[0002]结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)是常见的消化系统恶性肿瘤，其死亡率位居世界疾病死亡率排行第四位，每年有90万人死于该病。CRC发病率预期到2030年将增加160％，预计每年新增病例210万人次，给卫生系统以及整个社会带来严重的经济负担。早发现早治疗是提高结直肠癌治愈率的最佳途径，现有的肿瘤标志物CEA、CA19
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9在结直肠癌诊断中的敏感度与特异性不够高；同时，尽管现有技术中也存在以环状RNA为检测标志物的相关研究，但是并未见hsa_circ_0071106和hsa_circ_0000825在结直肠癌研究中的相关报道，因而，增加结直肠癌的检测标志物，丰富结直肠癌筛查的途径对结直肠癌的预防和治疗具有重要的意义。

技术实现思路

[0003]基于上述技术问题，本专利技术的目的在于提供检测环状RNA和/或所述环状RNA表达量的制剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用，检测环状RNA和/或所述环状RNA表达量的制剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用。
[0004]为了实现上述目的，本专利技术提供了环状RNA和/或检测所述环状RNA表达量的制剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用，所述环状RNA包括hsa_circ_0071106和/或hsa_circ_0000825；
[0005]所述hsa_circ_0071106的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；
[0006]所述hsa_circ_0000825的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0007]本专利技术提供了一种结直肠癌的诊断试剂，包括针对环状RNA hsa_circ_0071106和/或hsa_circ_0000825设计的特异性引物；
[0008]所述hsa_circ_0071106的特异性引物为P1和P2；所述hsa_circ_0000825的特异性引物为P3和P4；
[0009]所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述P3的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述P4的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
[0010]优选的，所述诊断试剂还包括管家基因GAPDH。
[0011]优选的，所述管家基因GAPDH的特异性引物包括P5和P6；
[0012]所述P5的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述P6的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
[0013]本专利技术还提供了一种结直肠癌的诊断试剂盒，所述试剂盒包括上述技术方案中所述的诊断试剂。
[0014]本专利技术还提供了环状RNA和/或检测所述环状RNA表达量的制剂在制备判断结直肠癌治疗效果的试剂中的应用，所述环状RNA包括hsa_circ_0071106和/或hsa_circ_0000825；
[0015]所述hsa_circ_0071106的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；
[0016]所述hsa_circ_0000825的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0017]本专利技术还提供了一种判断结直肠癌治疗效果的试剂，所述试剂包括针对环状RNAhsa_circ_0071106和/或hsa_circ_0000825设计的特异性引物；
[0018]所述hsa_circ_0071106的特异性引物为P1和P2；所述hsa_circ_0000825的特异性引物为P3和P4；
[0019]所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述P3的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述P4的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
[0020]有益效果：
[0021]本专利技术提供了检测环状RNA和/或所述环状RNA表达量的制剂在制备结直肠癌辅助诊断试剂中的应用，以所述环状RNA hsa_circ_0071106和/或hsa_circ_0000825作为一种新的结直肠癌检测分子标志物，所述标志物在结直肠癌患者癌组织中特异性下调表达，尤其将所述环状RNA hsa_circ_0071106和hsa_circ_0000825联合使用，可以更准确地对结直肠癌样本进行筛查；利用该分子标志物可以简单、快捷地进行结直肠癌诊断，成为结直肠癌检测诊断、病理分级、临床分期、治疗疗效判断的有效工具，具有良好的临床应用前景。
[0022]同时，本专利技术采用实时定量PCR测定所述环状RNA hsa_circ_0071106和/或hsa_circ_0000825的表达量，荧光染料不需要另行设计探针即可同时检测目的环状RNA和管家基因，经济、方便，对进一步研究结直肠癌相关环状RNA的生物学机制具有重要意义。
附图说明
[0023]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0024]图1为正常组织和结直肠癌组织中hsa_circ_0071106和GAPDH的荧光信号曲线图；
[0025]图2为正常组织和结直肠癌组织中hsa_circ_0000825和GAPDH的荧光信号曲线图；
[0026]图3为荧光定量RT
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PCR验证结直肠癌组织异常表达的circ RNA，其中hsa_circ_0071106的表达在扩大标本验证实验中显著下调(P<0.001)；
[0027]图4为荧光定量RT
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PCR验证结直肠癌组织异常表达的circ RNA，其中hsa_circ_0000825的表达在扩大标本验证实验中显著下调(P<0.001)；
[0028]图5为检测81例结直肠癌患者癌组织及其癌旁组织hsa_circ_0071106水平，而制作的ROC曲线。
[0029]图6为检测81例结直肠癌患者癌组织及其癌旁组织hsa_circ_0000825水平，而制作的ROC曲线。
[0030]图7为检测81例结直肠癌患者癌组织及其癌旁组织hsa_circ_0071106和hsa_circ_0000825水平，而制作的ROC曲线。
具体实施方式
[0031]本专利技术提供了环状RNA和/或检测所述环状RNA表达量的制剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用，所述环状RNA包括hsa_circ_0071106和/或hsa_circ_0000825；所述hsa_circ_0071106的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述hsa_circ_0000825的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0032]本专利技术所述环状RNA hsa_circ_0071本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.环状RNA和/或检测所述环状RNA表达量的制剂在制备结直肠癌诊断试剂中的应用，其特征在于，所述环状RNA包括hsa_circ_0071106和/或hsa_circ_0000825；所述hsa_circ_0071106的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述hsa_circ_0000825的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。2.一种结直肠癌的诊断试剂，其特征在于，包括针对环状RNA hsa_circ_0071106和/或hsa_circ_0000825设计的特异性引物；所述hsa_circ_0071106的特异性引物为P1和P2；所述hsa_circ_0000825的特异性引物为P3和P4；所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述P3的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述P4的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。3.根据权利要求2所述的诊断试剂，其特征在于，所述诊断试剂还包括管家基因GAPDH。4.根据权利要求3所述的诊断试剂，其特征在于，所述管家基因GAPDH的特异性引物包括P5和P6；所述P5的核苷酸序列如S...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐广贤，刘丽媛，蒋丹，周海金，张艳婷，舒纬童，蓝华滔，
申请(专利权)人：宁夏医科大学，
类型：发明
国别省市：