一种河豚鱼皮抗冻肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种河豚鱼皮抗冻肽及其制备方法和应用，属于抗冻肽技术领域。所述河豚鱼皮抗冻肽的氨基酸序列为EGPRAGGAPG或GDAGPSGPAGPTG或GEAGPAGPAG。本发明专利技术利用酶解技术获得河豚鱼皮酶解液，采用冰亲和吸附装置、SP

【技术实现步骤摘要】
一种河豚鱼皮抗冻肽及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于属于抗冻肽
，具体涉及一种河豚鱼皮抗冻肽及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]低温环境会对细胞造成一系列损伤包括细胞脱水、细胞膜破裂、内容物泄露等，导致细胞不可逆的损伤或者死亡，因此生物体为抵御外界寒冷环境会应激性产生一种特殊的蛋白质——抗冻蛋白。但含有天然抗冻蛋白的生物一般都处于高寒、高海拔地区，而且生物体内的抗冻蛋白含量极其微量，将微量的抗冻蛋白从生物体内纯化出来十分困难，这就导致了天然抗冻蛋白的生产成本极其昂贵。基于抗冻蛋白作用机理，仿生抗冻蛋白材料应运而生，但合成的抗冻材料是否存在安全隐患有待于评估，无法直接作用于食品体系，因此仍然需寻找安全、无毒、健康可食用的低温保护剂。抗冻肽（Antifreeze Peptides，AFPs）是一类小分子蛋白或蛋白质水解物，它是抗冻蛋白中局部具有抗冻活性的特异多肽链结构域。抗冻肽在结冰或亚结冰状态下能保护生物体免受伤害蛋白质，它能非依数性降低溶液冰点、有效降低冰晶生长率、抑制冰晶重结晶的发生，抑制冻结所造成的低温损伤。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种河豚鱼皮抗冻肽，其特征在于：所述河豚鱼皮抗冻肽选自下述任一种：氨基酸序列为EGPRAGGAPG、分子量为867.4198 Da的河豚鱼皮抗冻肽；氨基酸序列为GDAGPSGPAGPTG、分子量为1039.457 Da的河豚鱼皮抗冻肽；氨基酸序列为GEAGPAGPAG、分子量为1576.7229 Da的河豚鱼皮抗冻肽。2.一种制备权利要求1所述的河豚鱼皮抗冻肽的方法，其特征在于：包括如下步骤：1）河豚鱼皮酶解液的制备：取河豚鱼皮粉碎后加水搅拌形成鱼皮浆料液，调节pH值至弱酸性后加入木瓜蛋白酶进行酶解，酶解结束后进行灭酶处理，离心收集上清液，即得河豚鱼皮酶解液；2）河豚鱼皮酶解液的分离纯化：依次采用冰亲和吸附、SP
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Sephadex C
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25阳离子交换色谱和Sephadex G
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25凝胶过滤色谱对河豚鱼皮酶解液进行分离纯化，收集抗冻活性最强的组分F2冻干后备用；3）抗冻肽的鉴定及筛选：采用纳升液相色谱
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四极杆轨道阱质谱仪对组分F2进行氨基酸序列测定，使用计算机方法辅助筛选组分F2中具有无毒性、亲水性及冷冻保护活性的小分子肽，即得到所述的河豚鱼皮抗冻肽。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述步骤1）中，木瓜蛋白酶的用量为40 U/g河豚鱼皮，酶解条件为65 ℃酶解5.14 h。...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪少芸，杨傅佳，江文婷，陈旭，蔡茜茜，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：