CV-B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法和用途技术

本发明专利技术属于动物模型构建技术领域，具体提供了一种CV

【技术实现步骤摘要】
CV
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B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法和用途


[0001]本专利技术属于动物模型构建
，具体涉及一种CV
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B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法和用途。

技术介绍

[0002]手足口病是由肠道病毒引起的患者四肢、口腔、臀部或生殖器出现自愈性疱疹的常见病毒性感染疾病。目前手足口病主要集中在EV
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71、CV
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A16、CV
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A6、CV
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A10的研究中。但近年来，全球多种肠道病毒引起手足口病及其并发症的发生有新的发展。手足口病的发生多还伴随有脑膜脑炎、脑干脑炎及痉挛抽搐等神经系统的疾病；英国、马来西亚、西班牙等全球多地CVA6感染率上升，并且出现了与EVD68混合感染出现呼吸窘迫综合征的病例；在亚洲幼儿患者中CV
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A10更为易感，并且与脱甲症有密切关系；除此之外，CV
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B1、CV
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A2、CV
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A4、CV
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A9、CV
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B3、CV
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B5等病毒近年来感染率也不断上升。
[0003]柯萨奇病毒B组1型(CV
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B1)是近年来手足口病的发病常见病原之一，多在新生儿及幼儿群体中造成群体性感染，引起皮肤黏膜、脑、肺、肝等多器官的病变继而危害儿童健康，部分病例出现死亡。目前针对CV
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B1没有上市的疫苗和特效抗病毒药物，临床治疗多为使用非甾体抗炎药、对乙酰氨基酚、苯海拉明等药物进行缓解疼痛控制发热的对症治疗，因此针对性的治疗方法研究和防治手段开发需加速，构建模拟人类感染的典型症状动物模型是研究疾病机制、疫苗以及特效治疗方法的基础，模型成功与否显得尤为重要。
[0004]根据前人的研究，CVA
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16、EV
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71、CV
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A6、CV
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A10已经有了多品系小鼠、转基因小鼠、非人灵长类等多种动物模型，然而其余病原体的动物模型构建及研究还不完善。CV
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B1建立了腹腔注射感染小鼠肌炎模型、胰腺炎模型，腹腔注射感染豚鼠多发性肌炎模型，耳缘静脉注射感染兔肝炎模型等。上述建立的CV
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B1动物模型多采用腹腔注射的方法人工感染动物，该方法虽能获得较为急性的临床症状表现，却与人类感染病毒途径有一定差别，缺少模拟人类感染途径建立的手足口病动物模型，未出现典型的手足口疱疹症状，对CV
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B1引起的手足口病模型未进行深入的研究。因此建立模拟人类感染途径的手足口病模型极为有必要。

技术实现思路

[0005]针对现有技术中的上述不足，本专利技术提供一种CV
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B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法和用途。
[0006]为了达到上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0007]提供一种CV
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B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法，通过鼻腔滴注的方式对啮齿动物模型感染CV
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B1，建立CV
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B1感染的啮齿动物手足口病模型。
[0008]进一步地：啮齿动物选自3周龄叙利亚金黄地鼠。
[0009]进一步地：CV
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B1病毒滴度为：10
7.25
CCID
50
/mL，每只经鼻腔滴注病毒悬液100μl。
[0010]提供一种CV
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B1感染啮齿动物手足口病模型的用途，将该模型用于筛选或鉴定能
够预防、缓解或者治疗CV
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B1感染的药物。
[0011]提供一种CV
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B1感染啮齿动物手足口病模型的用途，将该模型用于筛选或鉴定能够预防CV
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B1感染的疫苗。
[0012]本专利技术的有益效果为：
[0013]本专利技术建立了一种通过鼻腔滴注而感染的金黄地鼠手足口病模型，建模方法时间短、简单易行、有效、死亡率低且模型稳定。同时，鼻腔滴注为更接近人类感染病毒的真实途径，较好的反应了病毒感染的整个过程，为CV
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B1病原的建立提供更优化的方法和技术支持。该建模方法经鼻腔滴注感染叙利亚金黄地鼠后出现了与人类相似的手足口病症状，在各组织器官中出现病毒复制情况的同时，存在脑膜炎、心肌炎等多器官损伤。为后续开展的感染途径及机制、病理生理学药物评价、疫苗研发评价奠定了基础。
附图说明
[0014]图1为实施例2叙利亚金黄地鼠感染CV
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B1的临床症状图；其中，A)牙龈出血、B)疱疹为实验组情况；C)体温监测、D)体重监测为实验组和对照组情况；
[0015]图2为实施例2实验组叙利亚金黄地鼠感染CV
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B1的排毒情况图；其中，A)咽拭子病毒载量；B)鼻拭子病毒载量；C)粪便病毒载量；
[0016]图3为实施例2实验组和对照组叙利亚金黄地鼠感染CV
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B1的生化指标监测图；其中，A)肝功能；B)心肌酶谱；
[0017]图4为实施例2实验组叙利亚金黄地鼠感染CV
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B1的组织病毒载量图；其中，A)神经系统；B)生殖泌尿系统；C)消化系统；D)循环系统及呼吸系统；
[0018]图5为实施例2实验组叙利亚金黄地鼠感染CV
‑
B1的疱疹HE病理变化图；其中，A)疱疹；B)唇部；
[0019]图6为实施例2实验组和对照图叙利亚金黄地鼠感染CV
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B1的组织器官HE病理变化图；其中，A)嗅球；B大脑；C)心脏；D)肺脏；E)肝脏；F)肠道。
具体实施方式
[0020]下面对本专利技术的具体实施方式进行描述，以便于本
的技术人员理解本专利技术，但应该清楚，本专利技术不限于具体实施方式的范围，对本
的普通技术人员来讲，只要各种变化在所附的权利要求限定和确定的本专利技术的精神和范围内，这些变化是显而易见的，一切利用本专利技术构思的专利技术创造均在保护之列。
[0021]实施例1
[0022]提供一种CV
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B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法，通过鼻腔滴注的方式对啮齿动物模型进行感染，建立CV
‑
B1感染的啮齿动物手足口病模型。
[0023]根据前期研究，啮齿类动物对CV
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B1易感，且叙利亚金黄地鼠拥有清晰的遗传背景，生长周期短，与小鼠相比体型稍大更易观察较小组织器官的病变，便于操作，因此选择作为本申请的模型动物。
[0024]在本实施例中，以3周龄叙利亚金黄地鼠为实验动物，雌性，体重在60g
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80g。饲养在屏障环境中，饲喂相同饲料。每日所需的食物经过高压高温灭菌，72h内食用；饮用水经过高压高温灭菌，24h内饮用。
[0025]柯萨奇病本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种CV
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B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法，其特征在于：通过鼻腔滴注的方式对啮齿动物模型感染CV
‑
B1，建立CV
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B1感染的啮齿动物手足口病模型。2.根据权利要求1所述的CV
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B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法，其特征在于：所述啮齿动物选自3周龄叙利亚金黄地鼠。3.根据权利要求1所述的CV
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B1感染啮齿动物手足口病模型的构建方法，其特征在于：所述CV
‑
B1病毒滴度为：10
7.25
CC...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨凤梅，李咏洁，和占龙，李艳艳，张伟，靳玮华，徐鸿界，李明学，刘权，陈丽雄，孙文亭，张凡邦，唐洁，邓自君，
申请(专利权)人：中国医学科学院医学生物学研究所，
类型：发明
国别省市：