外泌体以及提高药物敏感性的抑制剂在治疗癌症中的用途制造技术

本发明专利技术涉及外泌体以及提高药物敏感性的抑制剂在治疗癌症中的用途。本发明专利技术提供一种特异性针对CK8的单克隆抗体，该抗体能够显著的提高肿瘤细胞的药物敏感。将该CK8的单克隆抗体与负载有化学药的外泌体一起使用后，能够有效的抑制肿瘤的增殖，具有较好的应用前景和应用价值。用价值。

【技术实现步骤摘要】
外泌体以及提高药物敏感性的抑制剂在治疗癌症中的用途


[0001]本申请涉及生物领域，更具体的涉及外泌体以及提高药物敏感性的抑制剂在治疗癌症中的用途。

技术介绍

[0002]根据世界卫生组织最新的数据，乳腺癌已取代肺癌成为全球第一大肿瘤，中国每年大约新增乳腺癌患者42万人，而且近年来年发病率每年递增3％到4％。乳腺癌综合治疗的进步起到重要作用，其中，抗体药物是重要的治疗手段。
[0003]乳腺癌的分子靶向治疗，最成功的莫过于针对HER
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2过表达的转移性乳腺癌药物曲妥珠单抗(赫赛汀)。由罗氏旗下基因泰克公司开发。1998年9月FDA批准其用于HER
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2过表达转移性乳腺癌的治疗，目前已成为一线药物。它使约1/4的顽固乳腺癌患者得到挽救和生命的延续，2012年的销售额在全球已达到68.39亿美元，排名全球最畅销药物第8名，同时也奠定了开发赫赛汀的罗氏公司在研发治疗HER
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2乳腺癌抗体药物的霸主地位。曲妥珠单抗的新辅助治疗对乳腺癌有显著效果，一项临床试验表明，将曲妥珠单抗联合一线化疗药物蒽环类、环磷酰胺或紫杉醇，与单用相同的化疗药物相比，具有更好的效果并提高了存活率，使患者复发风险下降46％～52％，死亡风险下降1/3
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53。这种新颖的辅助治疗大大提高了患者的生存质量。2012年6月8日FDA批准其用于治疗HER
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2阳性转移性乳腺癌，由罗氏旗下基因泰克公司研发，是继曲妥珠单抗之后的应用于临床的乳腺癌单克隆抗体，是第1个被称作HER二聚化抑制剂的单克隆抗体。一项将曲妥珠单抗与帕妥珠单抗联用的临床试验正在进行中，随机分配808例HER
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2阳性转移性乳腺癌患者，对照组接受安慰剂、曲妥珠单抗加紫杉醇，而帕妥珠单抗组接受帕妥珠单抗、曲妥珠单抗加紫杉醇，以此来评估无进展生存期和总生存期。帕妥珠单抗组与对照组相比，平均无进展生存期由12.4个月延长至l8.5个月，结果证明帕妥珠单抗加曲妥珠单抗加紫杉醇的组合作为HER
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2阳性转移性乳腺癌的一线治疗可显著延长无进展生存期且不增加对心脏的毒副作用。也有研究表明贝伐珠单抗和帕妥珠单抗联用也有优于单药的效果。HER
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2作为一个乳腺癌的新兴靶点，获得了众多学者的青睐，纷纷将其作为乳腺癌药物开发的方向，当然，另辟蹊径寻找新的靶点也颇为重要。
[0004]内分泌治疗是乳腺癌全身治疗的手段之一。一部分内分泌治疗药物可以抑制减少雌激素合成及跟乳腺癌细胞的结合，从而阻断肿瘤信号传导途径，导致癌细胞的死亡，这在降低乳腺癌复发和死亡风险中发挥重要作用，进一步延长患者的生存时间。但是这类药物容易被代谢掉，不利于长期发挥作用。
[0005]细胞角蛋白(cytokeratin，CK)是一个最大的中间丝家族，主要分布于上皮细胞中，是上皮细胞骨架的组成成分。正常的不同类型上皮细胞显示特定的CK标记，研究证实在肿瘤发生时，这些细胞仍然保留这种标记特性。因而CK是在肿瘤研究及病理鉴别诊断中得到广泛应用的上皮标志物之一。目前的研究表明，通过抑制CK8的活性，能够抑制癌细胞的活性，进而用于癌症的治疗。
[0006]近年来,关于外泌体递送药物的研究逐渐增多,一些小分子化学药物及基因药物
等已被成功载入外泌体。外泌体结合了细胞和纳米技术递送药物的优势:与细胞疗法相比,外泌体更易储存且安全性较高。如外泌体递送基因药物不会在体内不同部位沉积导致免疫排斥。此外,外泌体还可以从患者体液中分离,经修饰后移回同一患者,大大降低了临床中出现免疫反应的可能性；外泌体递送药物可以提高药物的稳定性。如外泌体可以保护核酸在运输过程中不被核酶水解。同时,外泌体可直接进入细胞液,避免代谢消除,从而延长药物在体内的循环时间；外泌体为纳米级分子,且携带细胞表面物质,因此具有较强的穿透各种生物屏障的能力；外泌体具有基于供体细胞的天然靶向能力。如肿瘤细胞来源的外泌体携带肿瘤特异性抗原、蛋白质和RNA等物质,可以起到抗肿瘤免疫的作用。
[0007]目前，采用外泌体负载药物用于治疗乳腺癌的治疗手段还不够丰富，可供选择的途径也不够多，值得进一步的研究。

技术实现思路

[0008]本专利技术克服现有技术的缺陷，提供了一种能够有效的用于乳腺癌治疗中提高药敏性的药物。
[0009]一方面，提供一种特异性结合CK8的单克隆抗体，所述抗体能够提高癌细胞的药物敏感性。
[0010]进一步的，本专利技术的CK8的单克隆抗体为CK8
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4D13单克隆抗体，其轻链可变区序列和重链可变区序列如下所示：
[0011]所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其氨基酸序列为EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFSLSQYRQKWVRQAPGKGLEWVGISLWPALAGDCMISYFRFTISKDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARTFMRTSYIYTCCEWGQGTLVTVSS；
[0012]所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，其氨基酸序列为AYQMTQSPSSVSASVGDRVTITCCGTVNKHKTRAWYQQKPGKAPKLLIYMKGYRACGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLRTTYYLGREDIVFGGGTKVEIK。
[0013]CDR
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H1(在本说明书中CDR
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H1表示重链CDR1)的氨基酸序列如QYRQK所示；
[0014]CDR
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H2(在本说明书中CDR
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H2表示重链CDR2)的氨基酸序列如ISLWPALAGDCMISYF所示；
[0015]CDR
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H3(在本说明书中CDR
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H3表示重链CDR3)的氨基酸序列如TFMRTSYIYTCCE所示；
[0016]CDR
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L1(在本说明书中CDR
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L1表示轻链CDR1)的氨基酸序列如CGTVNKHKTRA所示；
[0017]CDR
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L2(在本说明书中CDR
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L2表示轻链CDR2)的氨基酸序列如MKGYRAC所示；
[0018]CDR
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L3(在本说明书中CDR
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L3表示轻链CDR3)的氨基酸序列如LRTTYYLGREDIV所示。
[0019]进一步的，本专利技术提供了CK8的单克隆抗体CK8
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4D13在制备治疗乳腺癌的药物中的应用，其中，CK8的单克隆抗体CK8
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4D13能够提高耐药肿瘤细胞的药物敏感性。
[0020]进一步的，本专利技术提供了CK8的单克隆抗体CK8
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4D13以及负载了化学抗癌药物的外泌体在制备治疗乳腺癌的药物中的应用，其中，CK8的单克隆抗体C本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种CK8的单克隆抗体CK8
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4D13，其特征在于该抗体的其轻链可变区序列和重链可变区序列如下所示：所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。2.权利要求1所述的单克隆抗体CK8
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4D13在制备在制备治疗乳腺癌的药物中的应用，其中，CK8的单克隆抗体CK8
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4D13能够提高耐药乳腺癌细胞的药物敏感性。3.权利要求1所述的CK8的单克隆抗体CK8
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4D13以及负载了化学抗癌药物的外泌体在制备治疗乳腺癌的药物中的应用，其中，CK8的单克隆抗体CK8
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4D13能够提高耐药乳腺癌细胞的药物敏感性...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪子涵，戴伟亮，
申请(专利权)人：南京涵台余生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：