一种USF3兔多克隆抗体的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种USF3兔多克隆抗体的制备方法及其应用，利用USF3蛋白序列和质粒模板，选择1

【技术实现步骤摘要】
一种USF3兔多克隆抗体的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及生物工程领域，具体涉及到一种USF3兔多克隆抗体的制备方法。

技术介绍

[0002]上游转录因子家族成员3(Upstream Transcription Factor Family Member 3，USF3)，由2221个氨基酸组成，在不同的组织和细胞中，USF3均广泛表达。对该蛋白的结构分析表明USF3会通过形成蛋白二聚体发挥功能，它有一个bHLH结构域负责转录调控，以及还有一些丝氨酸和谷氨酰胺富集区域。已有的文献表明：USF3基因谷氨酰胺富集区域的基因缺失与甲状腺癌的易感相关，并在上皮到间质转化(EMT)中起负调控作用。因此，作为一种转录因子，USF3很有可能与肿瘤的发生发展有关系。
[0003]然而，由于USF3的蛋白分子量非常大，目前市场上尚未有针对USF3蛋白设计的免疫沉淀的抗体，这对研究USF3蛋白的功能产生很大的限制，因此实现一种特异性制备可用于免疫印迹法检测USF3的蛋白显得尤为重要。

技术实现思路

[0004]为了解决现有技术问题，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种USF3兔多克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：a)抗原制备：通过原核表达，得到USF3重组蛋白片段；b)免疫动物：将USF3重组蛋白片段作为抗原，免疫白兔；c)效价检测：从免疫白兔体内采集被测抗体标本，采用间接ELISA法，对抗体进行梯度稀释，并检测抗体的效价和灵敏度；d)多克隆抗体纯化后处理：采用抗原亲和纯化方法，得到多克隆抗体。2.根据权利要求1所述的USF3兔多克隆抗体的制备方法，其特征在于：在所述步骤a)中，USF3重组蛋白序列和质粒模板，选择1
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180aa，通过全基因合成构建到pET
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28a
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SUMO，原核表达免疫原。3.根据权利要求2所述的USF3兔多克隆抗体的制备方法，其特征在于：在所述步骤a)中，利用软件对USF3蛋白的保守结构域和抗原表位进行分析，选择序列特异性好且包含完整结构域的区域作为抗原区，并将该区域克隆至pET
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SUMO载体。4.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宏，李艳利，鲁梦洋，
申请(专利权)人：上海大学，
类型：发明
国别省市：