红色诺卡氏菌细胞壁骨架在治疗宫颈病变中的应用制造技术

本公开涉及红色诺卡氏菌细胞壁骨架在治疗宫颈病变中的应用。具体而言，本公开提供了红色诺卡氏菌细胞壁骨架，其用于在受试者中预防或治疗伴有高危型HPV感染的宫颈病变，所述高危型HPV选自以下的任一项或组合：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68型。红色诺卡氏菌细胞壁骨架作为具有生物活性的免疫激活剂，可用于针对HPV感染及其诱发病变的有效策略。策略。

【技术实现步骤摘要】
红色诺卡氏菌细胞壁骨架在治疗宫颈病变中的应用


[0001]本公开涉及医学、生物制药领域。具体而言，本公开涉及红色诺卡氏菌细胞壁骨架在治疗宫颈病变中的应用。

技术介绍

[0002]宫颈癌是发生于女性生殖系统的常见的恶性肿瘤，发病率和死亡率均居全球第4位，严重影响了全球女性健康和生活质量。其主要的组织学类型包括鳞状细胞癌和腺细胞癌，其中，鳞癌约占宫颈癌的90％，腺癌约占10％。
[0003]流行病学研究显示，在宫颈癌的所有标本中几乎都能检测到HPV DNA。因此，HPV感染是宫颈癌发生和发展的最主要危险因素。部分具有更强的致癌性的基因型被称为高危型HPV(high
‑
risk HPV，hrHPV)，hrHPV与85％以上的宫颈癌病例相关，其中16型和18型是最常见的高危类型。鳞状上皮内病变(Squamous intraepithelial lesions，SIL)是宫颈癌的前期病变，根据宫颈上皮异型增生严重程度分为低级别鳞状上皮内病变(Low
‑
quamous intraepithelial lesions，LSIL)和高级别鳞状上皮内病变(High
‑
quamous intraepithelial lesions，HSIL)。由于大部分HPV感染后被宿主免疫系统清除，LSIL病变也随之自发消退。然而，在hrHPV持续感染的情况下，可能在数年内发展为浸润性癌。因此，清除hrHPV感染是阻断病程、预防宫颈癌发生的最关键问题。HPV疫苗对接种人群有很好的保护作用，但不能消除已存在的感染。对于已存在HPV相关高级别宫颈病变的患者，手术切除仍然是治疗干预的首选。然而随着免疫治疗研究的发展，一些新的治疗方案正在成为可能，其中以细胞为基础的免疫治疗备受瞩目。
[0004]红色诺卡氏菌(Nocardia rubra)是诺卡氏菌中的一种。红色诺卡氏菌的菌体经发酵、细胞破碎、蛋白酶降解后可制得红色诺卡氏菌细胞壁骨架。
[0005]现有技术中，红色诺卡氏菌细胞壁骨架可以是市售获得，具体而言由辽宁格瑞仕特生物制药有限公司生产的商品(Nr
‑
CWS)。红色诺卡氏菌细胞壁骨架已用于治疗宫颈糜烂、宫颈癌前病变(CN101073583A)、抗人乳头瘤病毒(CN1935262A)、皮肤损伤或皮肤溃疡(CN101209267A)、真菌感染、单纯疱疹、带状疱疹(CN1879661A)。

技术实现思路

[0006]第一方面，本公开提供了一种红色诺卡氏菌细胞壁骨架。
[0007]红色诺卡氏菌是指Nocardia属的红色诺卡氏菌种(Nocardia rubra)。
[0008]红色诺卡氏菌的鉴定：根据已知的或未来的微生物鉴定技术，技术人员可以对一株细菌进行分类学鉴定，例如可用的鉴定技术包括形态学、生理生化特征、16S rRNA等。技术人员理解，随着科技的发展，鉴定技术涉及不同的手段，在较早的时期主要采用形态学和生化鉴定方式，但是这种方法的可靠程度不高。测序技术出现后，技术人员可以利用更为可信的方式鉴定菌株。例如，当16S rRNA的DNA序列被鉴定为具有97％(含)以上相似性时，判定两个菌属于相同的种。就红色诺卡氏菌而言，将保藏在国际(或国家级)菌种保藏单位中
的已知菌株作为模式菌株，并与其进行比对。
[0009]本公开中，“红色诺卡氏菌细胞壁”既可以理解为完整的细胞壁，也可以理解为不完整的细胞壁(例如，破碎的、或部分降解的)。在本公开的教导下，技术人员将理解，显示出所需活性的成分来自红色诺卡氏菌的细胞壁(例如，是细胞壁本身或其组成成分)。因此，在临床应用中允许采用完整的细胞壁、经破碎的细胞壁、细胞壁的不完全降解产物、细胞壁的组成成分、细胞壁的提取物等各种形式，这些都包含在本公开范畴之内。
[0010]本公开的细胞壁骨架不能理解为仅仅表示细胞壁当中的交联网状实体，技术人员应理解该术语不排除交联网状实体上所吸附、结合、携带的其他细胞壁成分。
[0011]在具体的示例中，本公开的细胞壁骨架是细菌经破碎、除杂(蛋白、核酸、细胞膜、脂质)后所得的产物。
[0012]在具体的实施方案中，细胞壁骨架是国药准字S20030009或其更新编号对应的红色诺卡氏菌细胞壁骨架。
[0013]技术人员应当理解，S20030009是药监管理部门发放的行政许可编号，此号码会随着证件的更新、法律、编号规则的调整而变化。然而，号码变化后所代表的产品标准、产品参数、生产工艺、质量要求是不变的。因此，本公开中S20030009应理解为S20030009及其等同编号。
[0014]在一些实施方案中，所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架是国药准字S20030009或其更新编号对应的红色诺卡氏菌细胞壁骨架。
[0015]在另一些实施方案中，所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架通过以下方法获得，所述方法包括以下步骤或由以下步骤组成：
[0016]1)提供红色诺卡氏菌；
[0017]2)破碎所述红色诺卡氏菌，得到破碎产物；
[0018]3.1)对所述破碎产物去除脂质；
[0019]3.2)对所述破碎产物去除核酸；
[0020]3.3)对所述破碎产物去除蛋白质；
[0021]3.4)对所述破碎产物去除细胞膜；
[0022]3.5)得到红色诺卡氏菌细胞壁骨架；
[0023]4)任选地，分装；
[0024]5)任选地，对所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架进行冷冻干燥；
[0025]步骤3.1)、3.2)、3.3)、3.4)能够互换或并行，步骤4)和步骤5)能够互换。
[0026]对于红色诺卡氏菌的破碎，其目的在于去除细胞内的物质。因此可以采用超声破碎、高压均质机破碎、溶菌酶等技术。技术人员理解，任何适用于破碎革兰氏阳性菌的已知或未来方法，均适用于本公开的技术方案。
[0027]技术人员有能力根据活性成分(细胞壁及其组成成分)的后续应用(例如外敷)，来调整培养、破碎、分离、收集、除杂质、分装的具体参数和设备，以免制备步骤中引入影响后续应用的因素。
[0028]在一些实施方案中，利用有机溶剂去除破碎产物中的脂质。在一些实施方案中，利用核酸酶去除破碎产物中的DNA和RNA。在一些实施方案中，利用水解酶降解破碎产物中的蛋白质。在一些实施方案中，利用表面活性剂去除破碎产物中的细胞膜。
[0029]在一些实施方案中，破碎的平均粒度为10nm至1000nm；可以提及10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190nm
±
10nm，以及上述任意两个数值之间的范围。粒度的测试方法是现有技术公知的。
[0030]在一些具体的实施方案中，破碎的平均粒度为10nm至800nm。
[0031]在另一些具体的实施方案中，破碎的平均粒度为10nm至500nm。
[0032]在具体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.红色诺卡氏菌细胞壁骨架在制备药物中的用途，其中：所述药物用于在受试者中预防或治疗伴有高危型HPV感染的宫颈病变；所述高危型HPV选自以下的任一项或组合：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68型；所述宫颈病变选自以下的任一项：非典型鳞状细胞病变、低级别鳞状上皮内病变。2.根据权利要求1所述的用途，所述受试者是21岁至40岁。3.根据权利要求1或2所述的用途，所述药物制备成选自以下任一项的剂型：膏剂、霜剂、栓剂、乳液、混悬剂、糊剂、凝胶剂、洗剂、片剂、气雾剂、喷雾剂、搽剂、粉剂、敷料、绷带、膜、贴片、注射剂。4.根据权利要求1至3任一项所述的用途，其中所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架是国药准字S20030009或其更新编号对应的红色诺卡氏菌细胞壁骨架。5.根据权利要求1至3中任一项所述的用途，其中所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架通过以下方法获得，所述方法包括以下步骤或由以下步骤组成：1)提供红色诺卡氏菌；2)破碎所述红色诺卡氏菌，得到破碎产物；3.1)对所述破碎产物去除脂质；3.2)对所述破碎产物去除核酸；3.3)对所述破碎产物去除蛋白质；3.4)对所述破碎产物去除细胞膜；3.5)得到红色诺卡氏菌细胞壁骨架；4)任选地，分装；5)任选地，对所述红色诺卡氏菌细胞壁骨架进行冷冻干燥；其中，步骤3.1)、3.2)、3.3)、3.4)能够互换或并行，步骤4)和步骤5)能够互换；所述破碎的平均粒度为10nm至1000nm，优选10nm至800nm，更优选10nm至500nm。6.根据权利要求1至5中任一项所述的用途，其中所述药物用于选自以下的任一项或其组合：降低宫颈上皮中波形蛋白的表达水平、提高IFN
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γ的表达水平、降低IL
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4的表达水平、降低IL...

【专利技术属性】
技术研发人员：盖波，张雷，张轶，
申请(专利权)人：辽宁格瑞仕特生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：