一种治疗肠道腺瘤粪菌移植药物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种治疗肠道腺瘤粪菌移植药物，所述的药物是由下列方法制备得到：(一)薏苡附子败酱散的制备：取薏苡仁、附子、败酱草，所述薏苡仁：附子：败酱草比例是30：6：15，将薏苡仁、附子、败酱草提取液浓缩；(二)服用薏苡附子败酱散健康志愿者的粪菌的制备和质量控制：收集供体新鲜粪便，即1g粪便用5mL无菌磷酸盐缓冲液进行过滤的方法，经过离心、洗涤、再离心过程得到富集的细菌沉淀，以细菌冻存液(甘油：生理盐水比例为0.2:1)再悬浮分装后保存，其中粪菌样本浓度>107CFU/mL。本发明专利技术通过粪菌移植技术，将服用薏苡附子败酱散的健康志愿者的粪菌用于治疗肠道肿瘤，可以为研究中医药作用靶点提供技术支持和应用依据。点提供技术支持和应用依据。点提供技术支持和应用依据。

【技术实现步骤摘要】
一种治疗肠道腺瘤粪菌移植药物及其应用


[0001]本专利技术涉及药物
，具体地说，是关于一种治疗肠道腺瘤粪菌移植药物及其应用。

技术介绍

[0002]大肠腺瘤是肠道良性的肠道肿瘤，但是也是大肠癌重要的癌前病变，超过90％的肠癌是由肠道腺瘤发展而来。防治CRA肠道腺瘤是减低CRC发生率和死亡率的重要途径，也是研究中医药在防治结直肠癌发挥作用中的重要阶段，与中医的治未病理念是相同的。
[0003]早期大肠癌是指癌组织局限于黏膜及黏膜下层，而不论其大小及是否有淋巴结转移。大肠癌癌前病变包括腺瘤、腺瘤病(家族性腺瘤性息肉病及非家族性腺瘤性息肉病)、炎症性肠病相关异型增生、畸变隐窝灶(ACF)伴异型增生者，目前认为腺瘤－腺癌序列(正常大肠上皮－腺瘤－腺癌)是经典的大肠癌发病过程。
[0004]目前认为，80％的散发性结直肠肿瘤与Apc基因的缺失和突变有关，APC基因被认为在结直肠肿瘤发生中起到了“扳机”的作用。抑癌基因Apc的突变可导致家族性腺瘤性息肉病(FAP)，通过启动“腺瘤—腺癌”途径，促进结直肠肿瘤的发生发展。其中多发性肠道肿瘤为特征的Apc
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小鼠，已经普遍被应用于早期结直肠癌发生发展的研究。这种小鼠是1990年由Dove实验室成功创建出来，由APC基因发生突变和失活引起肠道多发腺瘤，已成为公认的研究FAP及肠道肿瘤的理想动物模型。
[0005]现代科学研究表明，肠道菌群对人体的健康起着至关重要的作用。人体的肠道菌群与肠道内环境保持动态平衡，一旦这种平衡被打破，则会导致肠道菌群失调，引发疾病或者加重病情，甚至发生多器官功能障碍综合症和多器官功能衰竭。近年来，粪菌移植(fecal microbiota transplantation，FMT)成为研究热门话题，其原理为将健康人粪便中的功能菌群，移植入患者胃肠道内，重建具有正常功能的肠道菌群，治疗肠道及肠道外某些疾病。该方法由来已久，2013年美国食品药品监督管理局将治疗难辨梭状芽孢杆菌感染写入指南，是对其安全性及有效性的认证，适应证得到进一步扩展。
[0006]目前对于肠道腺瘤的病因病机并无统一、标准的认识，但大多研究均显示肠道腺瘤的主要病机为脾虚、津伤、血瘀、毒蕴，故而治疗多采用益气健脾温阳、清利湿热、消肿散结的中药。薏苡附子败酱散是《金匮要略》治疗肠痈之经方，方由“薏苡十分、附子二分、败酱五分”组成，方药精简，却具备健脾祛湿、排脓消肿、振奋阳气之功效。其中：败酱草化瘀解毒，经现代医学研究对大肠杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌等具有明显抑制作用。薏苡仁祛瘀排浊，配伍附子温阳扶正、祛邪固本。诸药合用使邪祛正复而病自愈。
[0007]课题组前期临床研究发现以薏苡附子败酱散(薏苡仁10份、败酱草5份、附子2份)为主的化裁中药方剂具有减少肠道腺瘤数目，调节肠道菌群结构、分布以及多样性的丰富度的作用。但是无法证明薏苡附子败酱散是通过调控肠道菌群进而预防肠道腺瘤的发生的。
[0008]中国专利文献CN110742929A公开了一种利用人粪菌发酵附子制备含苯甲酰乌头
原碱的粪菌移植胶囊的方法。“粪菌移植”(Fecal microbiota transplantation，FMT)是指将健康人粪便中的功能菌群，移植到患者胃肠道内，重建新的肠道菌群，实现肠道及肠道外疾病的治疗。临床发现有些病人服用附子后达不到应有的疗效，导致个体差异的其中一个主要原因是病人肠道菌群缺失不全，导致附子中的有毒物质无法正常代谢为无毒活性成分，且对活效成分的利用率低，从而不能发挥附子应有的疗效。本专利技术利用粪菌移植供体的健康优质粪便，在体外模拟肠道微生物对附子的转化作用，通过适当的发酵条件，将附子中的乌头碱等有毒成分转化为无毒代谢产物，同时增加苯甲酰乌头原碱等活性成分的含量。将粪菌发酵液制成粪菌胶囊，用于临床的粪菌移植治疗。而目前关于治疗肠道腺瘤粪菌移植药物及其应用还未见报道。

技术实现思路

[0009]本专利技术的第一个目的是，针对现有技术中的不足，提供一种治疗肠道腺瘤粪菌移植药物。
[0010]本专利技术的第二个目的是，治疗肠道腺瘤粪菌移植药物的用途。
[0011]为实现上述第一个目的，本专利技术采取的技术方案是：
[0012]一种治疗肠道腺瘤粪菌移植药物，所述的药物是由下列方法制备得到：
[0013](一)薏苡附子败酱散的制备：取薏苡仁、附子、败酱草，所述薏苡仁：附子：败酱草比例是30：6：15，将薏苡仁、附子、败酱草提取液浓缩；
[0014](二)服用薏苡附子败酱散健康志愿者的粪菌的制备和质量控制：
[0015]收集供体新鲜粪便，即1g粪便用5mL无菌磷酸盐缓冲液进行过滤的方法，经过离心、洗涤、再离心过程得到富集的细菌沉淀，以细菌冻存液(甘油：生理盐水比例为0.2:1)再悬浮分装后保存，其中粪菌样本浓度>107CFU/mL；
[0016]服用薏苡附子败酱散健康志愿者的粪菌中双歧杆菌、阿克曼菌含量明显高于未服用薏苡附子败酱散的健康志愿者粪菌。
[0017]作为一个优选例，所述服用薏苡附子败酱散的健康志愿者的粪菌中双歧杆菌mRNA含量是未服用薏苡附子败酱散的健康志愿者粪菌中双歧杆菌mRNA含量的5.65倍。
[0018]作为一个优选例，所述服用薏苡附子败酱散的健康志愿者的粪菌中阿克曼mRNA含量是未服用薏苡附子败酱散的健康志愿者粪菌中阿克曼菌mRNA含量的4.21倍。
[0019]为实现上述第二个目的，本专利技术采取的技术方案是：粪菌移植药物在制备治疗肠道腺瘤中的应用。
[0020]作为一个优选例，所述肠道腺瘤是大肠腺瘤。
[0021]本专利技术优点在于：本专利技术通过粪菌移植技术，将服用薏苡附子败酱散的健康志愿者的粪菌用于治疗肠道肿瘤，可以为研究中医药作用靶点提供技术支持和应用依据。经过粪菌移植后，与Control
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FMT组小鼠相比，YYFZBJS
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FMT组小鼠腺瘤数量明显减少(P＜0.05)；腺瘤直径大于4mm时，YYFZBJS
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FMT组小鼠腺瘤数量明显减少(P＜0.05)。提示薏苡附子败酱散可能通过调节人体肠道菌群抑制了APC
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小鼠肠道腺瘤的生长，降低了肠道腺瘤的数量。HE结果显示，与Control
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FMT组小鼠相比，YYFZBJS
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FMT组小鼠肠道腺瘤出现不同程度的减少和瘤变，其中Control
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FMT组病理学检测腺瘤数量居多，高倍镜下还可看到较多不成熟细胞，核大、深染、核复层，细胞形态相对规则；YYFZBJS
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FMT组病理诊断为增生性息肉
居多，高倍镜下可看到细胞核变小，具有规则的圆形，细胞质内出现粘液泡，细胞构成及核分裂像增多。
附图说明
[0022]图1为菌液提取图。
[0023]图2为粪菌中主要菌属mRNA表达比较。
[0024]图3为A本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种治疗肠道腺瘤粪菌移植药物，其特征在于，所述的药物是由下列方法制备得到：(一)薏苡附子败酱散的制备：取薏苡仁、附子、败酱草，所述薏苡仁：附子：败酱草比例是30：6：15，将薏苡仁、附子、败酱草提取液浓缩；(二)服用薏苡附子败酱散健康志愿者的粪菌的制备和质量控制：收集供体新鲜粪便，即1g粪便用5mL无菌磷酸盐缓冲液进行过滤的方法，经过离心、洗涤、再离心过程得到富集的细菌沉淀，以细菌冻存液(甘油：生理盐水比例为0.2:1)再悬浮分装后保存，其中粪菌样本浓度>107CFU/mL；服用薏苡附子败酱散健康志愿者的粪菌中双歧杆菌、阿克曼菌含量明显高于未服用薏苡附子败酱散的健...

【专利技术属性】
技术研发人员：隋华，刘怀民，张璐，柴妮，柴琼，程悦蕾，卫真真，火龙，
申请(专利权)人：上海中医药大学附属曙光医院，
类型：发明
国别省市：