一种躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞的制备方法及用途技术

本发明专利技术公开了一种躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞及其制备方法，所述躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞由多能干细胞诱导，通过特定诱导培养液严格限定其分化路径，先后经历神经中胚层祖细胞和躯干神经嵴细胞阶段后得到。结果表明，本发明专利技术得到的由不同多能干细胞株诱导的躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞的基因表达谱(R2>0.93)不但高度相似，且相较于骨髓间充质干细胞具备更好的免疫调节能力及造血支持能力。因此，这种来源明确、异质性较低的全新MSC亚群，可能为MSC临床转化，特别是免疫治疗、支持造血干细胞移植等提供新的、高质量的细胞来源。来源。来源。

【技术实现步骤摘要】
一种躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞的制备方法及用途


[0001]本专利技术涉及干细胞
，具体地，涉及一种躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞的制备方法及其用途。

技术介绍

[0002]间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cell,MSC)是目前最为常见的成体干细胞之一，最早发现于骨髓，主要参与形成骨髓造血微环境，支持造血等，具有自我更新、多向分化、旁分泌及免疫调节能力等特性，在组织工程应用以及细胞治疗等方面具有广阔的临床应用前景。2006年国际细胞治疗学会(ISCT)制定了MSC需满足的最低鉴定标准：(1)标准条件下培养时，细胞粘附于培养器皿，呈贴壁样生长；(2)细胞表面阳性标志物CD73、CD90及CD105表达率＞95％，阴性标志物CD11b、CD19、CD34、CD45、HLA
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DR表达率＜2％；(3)体外分化能力，可分化为成骨细胞，软骨细胞以及脂肪细胞等。
[0003]MSC可以从多种成体组织如骨髓、脐带、脂肪等成功分离获取，众多研究表明MSC临床治疗的安全性及有效性。然而，MSC治疗仍然存在疗效本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞，其特征在于，由多能干细胞，先后经历神经中胚层祖细胞和躯干神经嵴细胞阶段后诱导得到。2.一种多能干细胞诱导为神经中胚层祖细胞的培养液，其特征在于，所述培养液为含有ROCK通路抑制剂和GSK
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3抑制剂的基础培养液。3.根据权利要求2所述的培养液，其特征在于，所述培养液还含有FGF通路的激动剂和TGFβ信号激活剂的基础培养液。4.一种神经中胚层祖细胞诱导为躯干神经嵴细胞的培养液，其特征在于，所述培养液为含有N2细胞培养添加剂、NEAA、Glutamax以及ROCK通路抑制剂、TGFβ通路抑制剂、GSK
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3抑制剂、BMP通路抑制剂的基础培养液。5.权利要求2到4任一所述培养液在多能干细胞诱导躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞中的应用。6.一种由多能干细胞诱导的躯干神经嵴来源骨髓间充质干细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.将多能干细胞诱导为神经中胚层祖细胞：将多能干细胞消化成单细胞，之后接种于包被基质胶的培养板或培养皿中，利用权利要求2到3任一所述的培养液，培养0.5～3天后，即得到神经中胚层祖细胞；S2.将神经中胚层祖细胞诱导为躯干神经嵴细胞：利用权利要求4所述的培养液，培养上一步的产物5～7天后，即得到躯干神经嵴细胞；S3.将躯干神经嵴细胞诱导为躯干神经嵴来源...

【专利技术属性】
技术研发人员：项鹏，李伟强，王慧艳，韦伊利，柯琼，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：