促进造血干细胞扩增的方法和用于所述方法的试剂技术

血管粘附蛋白

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】促进造血干细胞扩增的方法和用于所述方法的试剂


[0001]本专利技术涉及一种促进造血干细胞扩增的方法和适用于造血干细胞扩增的一种或多种药剂。

技术介绍

[0002]由收集自健康供体的骨髓(BM)或脐带血(CB)中收集的造血干细胞(HSC)的移植可以用于治疗多种造血疾病，包括例如白血病、严重再生障碍性贫血、淋巴瘤、多发性骨髓瘤和免疫缺陷病症。因此，包括HSC在内的患病造血细胞被消融且被健康细胞所取代。出生后的造血和造血干细胞的维持主要发生在骨髓中，其中HSC和其后代位于专门的生态位中。
[0003]造血干细胞(HSC)高度依赖于骨髓(BM)中的血管周围的干细胞生态位。确定HSC与其微环境之间的相互作用可能有助于确定造血干细胞移植和影响造血的治疗的领域中的临床方法和机会。因此，更好地了解调节造血的机制将有助于了解血液疾病，且也可能有助于开发用于离体扩增HSC的新方法，因为可以从供体获得用于临床移植的HSC数目有限，故促进HSC扩增的方法是期望的。

技术实现思路

[0004]现在，已经发现血管粘附蛋白
‑
1(VAP
‑
1)是干细胞生态位的组分，且在造血干细胞(HSC)的维持和扩增中发挥作用。已经发现，VAP
‑
1由靠近造血干细胞的骨髓脉管系统表达，且缺乏VAP
‑
1会影响骨髓(BM)中HSC和造血干细胞和祖细胞(HSPC)的数目。已经发现，对VAP
‑
1酶活性的抑制促进了脐带血和骨髓衍生的HSC的扩增。
>[0005]除了VAP
‑
1在人类HSC扩增中的作用之外，本申请案的专利技术人也发现了独特的人类VAP
‑1+
HSC亚群。更具体地说，已经发现一部分原始人类造血干细胞是VAP
‑
1阳性的，且尤其可以通过抑制血管粘附蛋白
‑
1(VAP
‑
1)的酶活性来实现其扩增。
[0006]本专利技术的发现提供了一种使用VAP
‑
1抑制剂在临床应用中扩增HSC的方法。本专利技术的发现可能有助于改善损伤后的骨髓恢复，增强骨髓移植的效果并改善HSC的动员、收获和扩增。此外，本专利技术的发现提供了一种治疗多种血液疾病或病况的新方法，这些疾病或病况会受益于经扩增的造血干细胞群体。本专利技术提供了一种用于治疗骨髓功能不正常并且患者需要增强他/她的造血功能的病况的方法。在一个方面中，本专利技术的发现提供了一种用于离体增加脐带血HSC的数目的新颖有效方法，因为脐带血移植(UCBT)已成为没有匹配供体的患者的既定疗法，导致以前无法治愈的疾病得到治愈。
[0007]血管粘附蛋白
‑
1(VAP
‑
1)是一种跨膜蛋白，也称为含铜胺氧化酶(AOC 3)或氨基硫脲敏感性胺氧化酶(SSAO)。VAP
‑
1的胞外胺氧化酶活性催化伯胺的氧化脱胺。所述反应导致形成相应的醛并释放氨和H2O2(一种活性氧物种(ROS))。根据本专利技术，已经观察到VAP
‑
1抑制剂减少SSAO特异性的过氧化氢产生。更详细地说，在本专利技术中，已经发现VAP
‑
1抑制剂可以用于维持所需的活性氧物种(ROS)水平一致，且从而促进HSC的扩增。HSC的维持、扩增和分化对ROS浓度极为敏感。本专利技术提供了一种通过使用VAP
‑
1抑制剂抑制VAP
‑
1的酶活性来控
制ROS浓度的方法，其中将ROS水平降低到为HSC提供生长优势的水平。在本专利技术中，使用阻断或抑制VAP
‑
1的酶活性，更具体地说VAP
‑
1的胺氧化酶活性的VAP
‑
1抑制剂来影响ROS的浓度。本专利技术基于使用影响ROS浓度的抑制剂化合物改善HSC的扩增。
[0008]根据本专利技术的一个方面，能够抑制血管粘附蛋白1(VAP
‑
1)的酶活性的VAP
‑
1抑制剂(也称为SSAO抑制剂)在造血干细胞的离体培养中用作活性氧物种(ROS)浓度的调节剂。
[0009]根据另一方面，本专利技术提供了一种离体产生经扩增的造血干细胞群体的方法，所述方法包含用能够抑制血管粘附蛋白
‑
1(VAP
‑
1)的酶活性的血管粘附蛋白
‑
1(VAP
‑
1)抑制剂离体培养造血干细胞，其中所述VAP
‑
1抑制剂以足以产生经扩增的造血干细胞群体的量存在。本专利技术提供了一种离体扩增脐带血和骨髓衍生的HSC用于移植的改进方法。
[0010]此外，本专利技术提供了一种用于造血干细胞的细胞扩增培养基，其包含能够抑制血管粘附蛋白1(VAP
‑
1)的酶活性的血管粘附蛋白(VAP
‑
1)抑制剂。
[0011]根据第三方面，本专利技术还提供了一种促进个体的造血干细胞扩增的方法，包含向个体施用能够抑制血管粘附蛋白1(VAP
‑
1)的酶活性的VAP
‑
1抑制剂或包含能够抑制血管粘附蛋白1(VAP
‑
1)酶活性的VAP
‑
1抑制剂的组合物。根据本专利技术，一种治疗受益于经扩增的造血干细胞群体的疾病或病况的方法，包含以足以产生经扩增的造血干细胞群体的量向患有此类疾病或病况的个体施用能够抑制血管粘附蛋白1(VAP
‑
1)的酶活性的VAP
‑
1抑制剂。根据本专利技术的一个实施例，VAP
‑
1抑制剂可以用于治疗骨髓抑制或骨髓衰竭，其是指骨髓功能不正常且需要影响HSC数目的治疗的病况。
附图说明
[0012]图1.ROS浓度在HSC扩增中的作用的示意图。VAP
‑
1/SSAO产生过氧化氢(ROS物种)、氨和醛，被根据本专利技术的抑制剂阻断，导致HSC的扩增。
[0013]图2.VAP
‑
1在血管内皮和人类BM中的原始HSC上表达，且对VAP
‑
1的抑制增加了NBSGW小鼠的植入潜力和CFU分析中的HSC数目。
[0014](A)VAP
‑
1在人类骨髓(BM)中的表达。组织切片用多克隆抗VAP
‑
1抗体或兔IgG作为对照染色。所有观察到的血管均表达VAP
‑
1。楔形符号表示表达VAP
‑
1的小动脉，而箭头表示小静脉。比例尺50μm，(n＝2)。
[0015](B)人类BM中原始HSC的流式细胞术鉴别。BM细胞用谱系混合物(Lineage cocktail)，即抗CD34、抗CD38、抗CD90、抗CD45RA、抗CD49f抗体染色。这些图显示了HSC的门控策略。门P
‑
2、P
‑
3、P
‑
4和P
‑
5显示HSC的顺序富集，而门P
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种离体产生经扩增的造血干细胞群体的方法，所述方法包含用能够抑制血管粘附蛋白
‑
1(VAP
‑
1)的酶活性的血管粘附蛋白
‑
1(VAP
‑
1)抑制剂离体培养造血干细胞群体，其中所述VAP
‑
1抑制剂以足以产生经扩增的造血干细胞群体的量存在。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述造血干细胞是人类细胞。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述造血干细胞衍生自脐带血、骨髓和/或外周血液。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于VAP
‑
1抑制剂包含能够抑制VAP
‑
1的酶活性的小分子抑制剂。5.能够抑制血管粘附蛋白
‑
1(VAP
‑
1)的酶活性的血管粘附蛋白
‑
1(VAP
‑
1)抑制剂在造血干...

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：法龙药品公司，
类型：发明
国别省市：