一种皮肤生理学检测方法及其应用技术

本发明专利技术涉及检测分析技术领域，更具体地，本发明专利技术涉及G01N30/02，皮肤生理学检测方法，包括下面步骤：(1)样品前处理：将取样贴片加入提取溶剂中，得到样品液；(2)对样品液使用气相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种皮肤生理学检测方法及其应用


[0001]本专利技术涉及检测分析
，更具体地，本专利技术涉及G01N30/02。

技术介绍

[0002]角鲨烯是一种在人体中胆固醇的合成等代谢中所产生的不饱和烃类，其能帮助肌肤建立天然的保护屏障，不仅可以有效维持肌肤内水分，同时在抵制外界环境的干燥、寒冷以及有害物质的侵袭方面具有重要的作用，此外，还具有优异的抗氧化的能力以及调节皮肤内细胞新陈代谢能力。维生素E是作为皮肤的一种营养素，通过阻止自由基损害而防止皮肤的皱纹产生，对于促进胶原蛋白的分泌，并达到淡化皱纹具有重要的作用；胆固醇作为主要的甾体类化合物，可以维护皮肤的正常功能，也可以作为润肤剂、稳定剂和保湿剂。
[0003]因此，定性和定量分析皮肤中角鲨烯、维生素E以及胆固醇含量具有重大的意义，对其含量进行分析对于后期的皮肤管理具有非常重要的保障。目前的皮肤中角鲨烯、维生素E以及胆固醇含量的定量分析中无法适应不同肤质，测定得到的含量准确性降低。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中存在的一些问题，本专利技术第一个方面提供了一种皮肤生理学检测方法，包括下面步骤：
[0005](1)样品前处理：将取样贴片加入提取溶剂中，得到样品液；
[0006](2)对样品液使用气相色谱
‑
质谱进行定性和定量分析。
[0007]优选的，所述提取溶剂为极性溶剂和/或直链脂肪烃类溶剂。
[0008]进一步优选的，所述提取溶剂为极性溶剂；进一步优选的，所述极性溶剂为端羟基醇；更优选的，所述极性溶剂为甲醇。
[0009]申请人在同一个取样对象的皮肤脸颊进行多次取样时，发现会造成取样的代表性降低，在同时使用极性溶剂和直链脂肪烃类溶剂作为提取溶剂时，发现在超声提取的过程中，提取溶剂变浑浊，影响了样品的前处理以及后续的定性定量分析，同时，分析得到的维生素E含量精确值较低，此外，申请人在实验中意外的发现当使用端羟基醇，尤其是甲醇时，可以避免重复多次取样的影响，同时对维生素E的定量分析较为精确，申请人认为可能的原因是皮肤中维生素E的含量比较低，并且其较长的分子链与聚酯取样贴片紧密吸附，端羟基溶剂中的端羟基能够在超声的过程中在与维生素E中的酚羟基形成氢键的过程中不受烷基支链的影响，使得维生素E分子在超声的过程中与聚酯取样贴片脱离。
[0010]优选的，所述取样贴片是直径为1.0
‑
3.0cm的小圆片。
[0011]在一种实施方式中，所述提取溶剂的添加量为每个取样贴片加入0.5
‑
1.5mL提取溶剂。
[0012]优选的，所述提取溶剂的添加量为每个取样贴片加入1mL提取溶剂。
[0013]在一种实施方式中，所述取样贴片由下面方法得到：皮肤清洁干净后，等待2h，在距离下眼皮2cm处贴取聚酯贴片，在250g/cm2的压力下取样30s，取下聚酯贴片即得。
[0014]在一种实施方式中，所述样品前处理包括：将取样贴片加入提取溶剂中，超声1
‑
5min，经0.4
‑
0.5μm滤膜过滤，得到样品液。
[0015]优选的，所述样品前处理包括：将取样贴片加入提取溶剂中，超声2min，经0.45μm滤膜过滤，得到样品液。
[0016]申请人发现，使用常规的溶剂提取后直接进行测试，重复性测试时，角鲨烯、维生素E、胆固醇含量测试重现性较差，尤其是当皮肤为油性皮肤时，多次测试结果差距较大，申请人意外的发现，在样品前处理过程中，超声后，经0.4
‑
0.5μm滤膜过滤后再进行气相色谱
‑
质谱进行定性和定量分析，此时测得的角鲨烯、维生素E、胆固醇含量RSD值小于5％，申请人认为可能的原因是，当皮肤为油性皮肤时，此时聚酯贴片上存在复杂的脂溶性杂质，而油性皮肤，尤其是起痘的皮肤，更增加了一些排泄物杂质，若在进行气相色谱
‑
质谱分析之前，其杂质含量太高的话，会影响相应物质的出峰情况，本申请中特定的滤膜过滤孔径既不会造成目标物质的过滤，同时又能够有效降低杂质的含量。
[0017]在一种实施方式中，气相色谱的条件为：色谱柱：赛默飞：TG
‑
5SILMS(30m
×
0.25mm
×
0.25μm)；载气：高纯氮气；程序升温：100℃保持1min，以30℃/min升温速率升温至320℃，保持5min；进样口温度：280℃；流速：0.8
‑
1.1mL/min；分流比：10：1。
[0018]优选的，气相色谱的条件为：色谱柱：赛默飞：TG
‑
5SILMS(30m
×
0.25mm
×
0.25μm)；载气：高纯氮气；程序升温：100℃保持1min，以30℃/min升温速率升温至320℃，保持5min；进样口温度：280℃；流速：1.0mL/min；分流比：10：1。
[0019]本申请中所述高纯氮气的纯度为99.999％。
[0020]分流比越小，可能会造成峰变形拖尾的现象，影响物质的定性定量分析，而分流比过大，在对维生素E含量测定时含量差异较大，线性较差，申请人意外的发现，在本申请中特定的气相色谱条件下，尤其是分流比为10：1时，此时不仅不会出现峰变形拖尾的现象，同时，维生素E含量稳定，且线性较好，申请人认为可能的原因是维生素E含有多种结构类似物，更甚者其结构互为同分异构体，在气相色谱分离的过程中分离困难，而在本申请合适的气相色谱条件下，尤其是特定含量的气相在气相色谱分析过程中，在相对较大含量的不同结构的分子冲击下，存在的合适量的角鲨烯和胆固醇反而有利于其同分异构体分离。
[0021]此外，在本申请样品前处理操作条件下，结合本申请气相色谱
‑
质谱条件，得到的角鲨烯、维生素E、胆固醇具有较低的检出限，可能是由于经过本申请特定的样品前处理，去除了一些杂质的影响，同时通过该气相色谱
‑
质谱条件，维生素E、角鲨烯以及胆固醇能够较好的分离，在出峰时其之间相互影响较小。
[0022]在一种实施方式中，质谱的条件为：角鲨烯的特征离子为：69、81、136；胆固醇的特征离子为105、386；维生素E的特征离子为165、430。
[0023]本专利技术第二个方面提供了一种所述皮肤生理学检测方法的应用，在定性和定量分析角鲨烯、维生素E、胆固醇中的应用，尤其是在对油性皮肤以及干性皮肤中定性和定量分析角鲨烯、维生素E、胆固醇中的应用。
[0024]本专利技术与现有技术相比具有以下有益效果：
[0025]本申请采用单一的甲醇作为提取溶剂，分析得到的维生素E含量精确，重现性好；本申请中皮肤生理学检测方法不仅适应干性皮肤，而且适用油性皮肤，对于油性、有痘皮肤中角鲨烯、维生素E、胆固醇含量测试中，RSD小于5％；此外，本申请采用特定的气相色谱条
件使得维生素E测试过程中具有优异的线性回归性，该方法可操本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种皮肤生理学检测方法，其特征在于，包括下面步骤：(1)样品前处理：将取样贴片加入提取溶剂中，得到样品液；(2)对样品液使用气相色谱
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质谱进行定性和定量分析。2.根据权利要求1所述皮肤生理学检测方法，其特征在于，所述提取溶剂为极性溶剂和/或直链脂肪烃类溶剂。3.根据权利要求2所述皮肤生理学检测方法，其特征在于，所述极性溶剂为端羟基醇。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述皮肤生理学检测方法，其特征在于，所述样品前处理包括：将取样贴片加入提取溶剂中，超声1
‑
5min，经0.4
‑
0.5μm滤膜过滤，得到样品液。5.根据权利要求4所述皮肤生理学检测方法，其特征在于，所述样品前处理包括：将取样贴片加入提取溶剂中，超声2min，经0.45μm滤膜过滤，得到样品液。6.根据权利要求5所述皮肤生理学检测方法，其特征在于，气相色谱的条件为：色谱柱：赛默飞：TG
‑
5SILMS(30m
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0.2...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯俊，李志坤，胡慧书，裴丽娟，
申请(专利权)人：上海微谱检测技术有限公司，
类型：发明
国别省市：