一种胰岛素结晶的制备方法及产品技术

本发明专利技术提供一种胰岛素结晶生成液，所述胰岛素结晶生成液至少包括：胰岛素，聚半乳糖醛酸，精氨酸，有机溶剂，锌离子，酚类，盐类，水；所述有机溶剂包括有机溶剂1和有机溶剂2。本发明专利技术将胰岛素制备成形态规则的晶体，制备工艺简单，回收率高，易于产业化放大。本发明专利技术制备的胰岛素晶体形态规则、颗粒均匀，与无定形态相比，具有较高的理化稳定性以及生物活性，在稳定性上优于不定形粉末状同种胰岛素。本发明专利技术尤其适用于Insulin Icodec。Icodec。

【技术实现步骤摘要】
一种胰岛素结晶的制备方法及产品


[0001]本专利技术涉及于生物医药
，特别是涉及一种胰岛素结晶的制备方法及产品。

技术介绍

[0002]糖尿病是一种慢性代谢类疾病，主要由先天遗传因素或环境因素引起，其发病机制多为人体胰岛β细胞功能缺陷导致胰岛素分泌不足，或机体出现胰岛素抵抗等。据2021年IDF《糖尿病地图集第十版》数据，糖尿病已经成为重大的全球挑战。2021年全球约5.37亿成年人患糖尿病，约占成年人(20
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79周岁)人数的十分之一。
[0003]糖尿病分为I型和II型，前者是由于胰岛β细胞受损，导致胰岛素绝对缺乏，主要治疗手段是使用胰岛素泵或注射胰岛素，尚无其他方案，后者表现为不同程度的胰岛素分泌不足，或胰岛素抵抗，主要采用口服各类降糖药或者注射降糖肽，如胰岛素类似物、胰高血糖素样肽类似物等等。
[0004]胰岛素属于生物大分子，其具有特定的高级结构以维持生理活性，一直以来，如何维持胰岛素的体外活性是胰岛素类产品开发的难点，而晶体结构的存在对胰岛素类分子的稳定性是有益的。与其它小分子物质一样，胰岛素晶体是按分子单元特定的排列顺序堆积形成一个独特的空间，主要在外观上表现为具有规则的几何形状的固体物质，与无定形态相比，蛋白质晶体具有较高的理化稳定性以及生物活性(Insulin structure and stability.Pharm Biotechnol.1993；5:315
‑
50.)。
[0005]目前市面上除了少部分长效的GLP
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1激动剂为周制剂，如杜拉鲁肽、司美格鲁肽，其余大部分的降糖肽特别是胰岛素类，几乎都需要每天注射一次或多次，因此需要一种长效的、安全的、一周甚至一月给药一次的胰岛素。
[0006]例如，超长效胰岛素Insulin Icodec(也可称为Icodec)。其临床Ⅱ期数据显示，经皮下注射一次可控制患者一周内的血糖。Insulin Icodec由诺和诺德公司开发，目前已经进入临床Ⅲ期，主要用于治疗Ⅱ型糖尿病。Insulin Icodec从两个方向设计延长其半衰期：其一通过超长的脂肪酸链修饰增强与白蛋白的结合力，其二突变非保守区氨基酸降低与人胰岛素受体亲和力。同时侧链引进的亲水基团使其水溶性增加，因此可以制备为高浓度(700单位每毫升)的胰岛素注射液，注射一次就能满足一周的胰岛素需求。
[0007]目前关于胰岛素结晶的报道较多：CN105753966A公开了一种人胰岛素结晶方法，CN103342746B报道了一种门冬胰岛素晶体的制备方法，CN106117345B报道了一种甘精胰岛素晶体的制备方法，CN104761632A公开了一种地特胰岛素结晶的制备方法及应用，CN104892749B报道了一种德谷胰岛素的结晶方法。但是，高溶解性和较长的脂肪酸侧链的胰岛素(大于C16)结晶难度更大，目前尚未存在Insulin Icodec的胰岛素结晶的制备方法。

技术实现思路

[0008]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种胰岛素结晶的制备方
法及产品。
[0009]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术第一方面提供一种胰岛素结晶生成液，其特征在于，所述胰岛素结晶生成液至少包括：胰岛素，聚半乳糖醛酸，精氨酸，有机溶剂，锌离子，酚类，盐类，水；所述有机溶剂包括有机溶剂1和有机溶剂2，所述胰岛素为Insulin Icodec。
[0010]本专利技术第二方面提供一种胰岛素结晶的制备方法，所述方法至少包括如下步骤：
[0011]将前述的胰岛素结晶生成液进行干燥，析出晶体，获得胰岛素结晶。
[0012]本专利技术第三方面提供一种胰岛素晶体，采用前述的胰岛素结晶的制备方法获得。
[0013]如上所述，本专利技术的一种胰岛素结晶的制备方法及产品，具有以下有益效果：
[0014](1)本专利技术将胰岛素制备成形态规则的晶体，制备工艺简单，回收率高，易于产业化放大。(2)本专利技术制备的胰岛素晶体形态规则、颗粒均匀，与无定形态相比，具有较高的理化稳定性以及生物活性，在稳定性上优于不定形粉末状同种胰岛素。
[0015](3)本专利技术尤其适用于高溶解性和较长的脂肪酸侧链的胰岛素的结晶。例如Insulin Icodec。
附图说明
[0016]图1：Insulin Icodec结构示意图。
[0017]图2：实施例1结晶显微观察，400倍放大。
[0018]图3：实施例2胰岛素结晶生成液A、胰岛素结晶生成液B、胰岛素结晶生成液C显微观察，400倍放大。
[0019]图4：实施例3胰岛素结晶生成液D、胰岛素结晶生成液E、胰岛素结晶生成液F显微观察，400倍放大。
[0020]图5：实施例4胰岛素结晶生成液G、胰岛素结晶生成液H显微观察，200倍放大。
[0021]图6：实施例5胰岛素结晶生成液显微观察，200倍放大。
[0022]图7：实施例6胰岛素结晶生成液显微观察200倍放大。
[0023]图8：实施例7胰岛素结晶生成液显微观察400倍放大。
具体实施方式
[0024]以下通过特定的具体实例说明本专利技术的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点与功效。本专利技术还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本专利技术的精神下进行各种修饰或改变。
[0025]在进一步描述本专利技术具体实施方式之前，应理解，本专利技术的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本专利技术实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本专利技术的保护范围；在本专利技术说明书和权利要求书中，除非文中另外明确指出，单数形式“一个”、“一”和“这个”包括复数形式。
[0026]当实施例给出数值范围时，应理解，除非本专利技术另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本专利技术中使用的所有技术和科学术语与本
技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、
材料外，根据本
的技术人员对现有技术的掌握及本专利技术的记载，还可以使用与本专利技术实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本专利技术。
[0027]除非另外说明，本专利技术中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本
的常规技术。
[0028]本专利技术人经过大量创造性实验发现一种新的胰岛素的结晶方法。该方法制备的胰岛素晶体形态规则、颗粒均匀，与无定形态相比，具有较高的理化稳定性以及生物活性，且结晶回收率高，具有工业化放大生产的潜力。适用于Insulin Icodec这类溶解性高、脂肪酸侧链长的胰岛素的结晶。
[0029]本专利技术一实施例的胰岛素结晶生成液，至少包括：胰岛素，聚半乳糖醛酸，精氨酸，有机溶剂，锌离子，酚类，盐类，水；所述有机溶剂包括有机溶剂1和有机溶剂2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种胰岛素结晶生成液，其特征在于，所述胰岛素结晶生成液至少包括：胰岛素，聚半乳糖醛酸，精氨酸，有机溶剂，锌离子，酚类，盐类，水；所述有机溶剂包括有机溶剂1和有机溶剂2，所述胰岛素为Insulin Icodec。2.如权利要求1所述的所述胰岛素结晶生成液，其特征在于，以所述胰岛素结晶生成液的总量为基准计，所述胰岛素结晶生成液各组分含量为：余量为水。3.如权利要求1所述的所述胰岛素结晶生成液，其特征在于，所述有机溶剂1选自与水能够混溶的有机溶剂；所述有机溶剂2选自丙酮。4.如权利要求3所述的所述胰岛素结晶生成液，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：a.以所述胰岛素结晶生成液的总量为基准计，所述有机溶剂1的体积分数为10～20％；所述有机溶剂2的体积分数为1～8％，优选为4～6％；b.所述有机溶剂1选自乙腈、乙醇、正丙醇、异丙醇或2
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甲基
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2,4
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戊二醇；优选为乙腈。5.如权利要求1所述的所述胰岛素结晶生成液，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：a.所述酚类物质选自苯酚、间苯二酚、间甲酚或对羟基苯甲酸；优选苯酚；b.所述盐类为强电解质盐；优选的，选自氯化钠、醋酸钠、醋酸铵、硫酸铵、硫酸钠或硝酸钠，更优选的，为氯化钠；c.所述锌离子选自乙酸锌或氯化锌中的锌离子，优选乙酸锌中的锌离子；d.所述胰岛素结晶生成液的pH值为6.5～8.0；优选的，为7.0～7.6。6.如权利要求2所述的所述胰岛素结晶生成液，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：所述以所述胰岛素结晶生成液的总量为基准计，a.所述胰岛素的浓度为为1
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6g/L；...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭小波，张欣，侯世兴，蔡俊杰，
申请(专利权)人：重庆宸安生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：