一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法技术

本申请提出了一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法，涉及分析化学技术领域。步骤包括：称取苦参碱和氧化苦参碱标准品，分别采用甲醇配制成浓度为1.0μg/mL的标准使用溶液；将标准使用溶液采用乙腈

【技术实现步骤摘要】
一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法


[0001]本申请涉及分析化学
，具体而言，涉及一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法。

技术介绍

[0002]目前关于苦参碱和氧化苦参碱的检测方法报道多集中于作为含量较高的原料和药物使用方面，如苦参作物，中药饮片、复方苦参汤和抗妇炎胶囊等。目前，还鲜见关于蜂蜜中苦参碱和氧化苦参碱检测的报道。

技术实现思路

[0003]本申请的目的在于提供一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法，此检测方法对于蜂蜜产品中苦参碱和氧化苦参碱具有可靠性高和快速准确的优点。
[0004]本申请解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
[0005]本申请实施例提供一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法，包括以下步骤：
[0006]称取苦参碱和氧化苦参碱标准品，采用甲醇配制成浓度为1.0μg/mL 的标准使用溶液；将标准使用溶液采用乙腈
‑
水溶液配制成浓度为1.0、5.0、 10、20、50、80、100ng/mL的标准工作液；
[0007]往蜂蜜样品中加水溶解，然后加入氨水乙腈和无水硫酸钠混合，离心后取上清液进行氮吹，然后采用乙腈
‑
水溶液溶解得到样品待测液；
[0008]将标准工作液与样品待测液采用超高效液相色谱
‑
串联质谱仪进行质谱和色谱测试，对比得到蜂蜜中苦参碱和氧化苦参碱的含量。
[0009]相对于现有技术，本申请的实施例至少具有如下优点或有益效果：
[0010]本研究建立了液液萃取结合UPLC
‑
MS/MS检测蜂蜜中苦参碱和氧化苦参碱的分析方法。此方法前处理简单，灵敏度高，回收率稳定，将该方法用于市售蜂蜜的测定，可以成功检测出蜂蜜中苦参碱和氧化苦参碱的含量，方法可靠性高，快速准确，适用于蜂蜜样品的批量检测，可以成为蜂蜜中苦参碱和氧化苦参碱残留的常规检测技术。
附图说明
[0011]为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本申请的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0012]图1为本申请实验例中标准溶液与不同样品的MRM色谱图；
[0013]图2为本申请实验例中不同萃取体系及盐种类的回收率；
[0014]图3为本申请实验例中不同比例的蜂蜜质量(m)与加水体积(V)的回收率；
[0015]图4为本申请实验例中不同比例萃取剂用量的回收率；
[0016]图5为申请实验例中不同盐析剂用量的回收率。
具体实施方式
[0017]为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0018]需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本申请。
[0019]一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法，包括以下步骤：
[0020]称取苦参碱和氧化苦参碱标准品，采用甲醇配制成浓度为1.0μg/mL 的标准使用溶液；将标准使用溶液采用乙腈
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水溶液配制成浓度为1.0、5.0、 10、20、50、80、100ng/mL的标准工作液；
[0021]往蜂蜜样品中加水溶解，然后加入氨水乙腈和无水硫酸钠混合，离心后取上清液进行氮吹，然后采用乙腈
‑
水溶液溶解得到样品待测液；
[0022]将标准工作液与样品待测液采用超高效液相色谱
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串联质谱仪进行质谱和色谱测试，对比得到蜂蜜中苦参碱和氧化苦参碱的含量。
[0023]在本申请的一些实施例中，上述标准使用溶液的配制过程为：称取苦参碱和氧化苦参碱标准品，先采用甲醇配制成100～1000.0μg/mL标准溶液储备溶液，然后用甲醇将标准溶液储备溶液稀释成5.0～50.0μg/mL的中间液，最后用甲醇将中间液稀释成1.0μg/mL的标准使用溶液。
[0024]在本申请的一些实施例中，上述乙腈
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水溶液中乙腈的含量为85～92％，乙腈
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水溶液中含有0.1～0.2％质量的甲酸。
[0025]在本申请的一些实施例中，上述蜂蜜样品与水的比例为1g：3～4mL；蜂蜜样品与氨水乙腈的比例为1g：5～8mL，氨水乙腈的体积比为0.1～ 0.15％；蜂蜜样品与无水硫酸钠的质量比为1：1.5～3.0。
[0026]在本申请的一些实施例中，上述加水溶解和混合均采用涡旋振荡，振荡时间为3～8min。
[0027]在本申请的一些实施例中，上述离心速率为10000～15000r/min，离心时间为3～8min。
[0028]在本申请的一些实施例中，上述质谱测试的条件为：采用电喷雾离子源，正离子模式扫描，离子源温度为130～160℃，喷雾电压为1.8～2.2KV，多重反应监测模式，加热气温度为450～550℃，脱溶剂气流量为800～ 1200L/H。
[0029]在本申请的一些实施例中，上述质谱测试时的苦参碱的定量离子对为 249.2＞148.2，定性离子对为249.2＞110.2，氧化苦参碱的定量离子对为 265.2＞205.2，定性离子对为265.2＞148.2。
[0030]本申请中苦参碱与氧化苦参碱特征离子对及碰撞能量参数如表1所示。
[0031]表1苦参碱和氧化苦参碱的质谱参数
[0032][0033][0034]本申请选用信号较高的例子为定量离子对，因此苦参碱的定量离子对为249.2＞148.2，定性离子对为249.2＞110.2，氧化苦参碱的定量离子对为 265.2＞205.2，定性离子对为265.2＞148.2。
[0035]在本申请的一些实施例中，上述色谱测试的条件为：采用Inspire HILIC 色谱柱，流动A相为0.1％甲酸
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5mmol/L乙酸铵溶液，流动B相为乙腈；柱温为32～38℃，进样量为4.0～6.0μL。
[0036]在本申请的一些实施例中，上述色谱测试的梯度洗脱程序为：0～ 2.0min，10％A；2.0～3.0min，10％～80％A；3.0～6.0min，80％A；6.0～ 6.5min，80％～10％A；6.5～10.0min，10％A。
[0037]以下结合实施例对本申请的特征和性能作进一步的详细描述。
[0038]实施例1
[0039]一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法，包括以下步骤：
[0040]标准使用溶液配制：准确称取定量苦参碱和氧化苦参碱标准品用甲醇溶解，分别配制成1000.0μg/mL标准溶液储本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：称取苦参碱和氧化苦参碱标准品，采用甲醇配制成浓度为1.0μg/mL的标准使用溶液；将标准使用溶液采用乙腈
‑
水溶液配制成浓度为1.0、5.0、10、20、50、80、100ng/mL的标准工作液；往蜂蜜样品中加水溶解，然后加入氨水乙腈和无水硫酸钠混合，离心后取上清液进行氮吹，然后采用乙腈
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水溶液溶解得到样品待测液；将标准工作液与样品待测液采用超高效液相色谱
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串联质谱仪进行质谱和色谱测试，对比得到蜂蜜中苦参碱和氧化苦参碱的含量。2.根据权利要求1所述的一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法，其特征在于，所述标准使用溶液的配制过程为：称取苦参碱和氧化苦参碱标准品，先采用甲醇配制成100～1000.0μg/mL标准溶液储备溶液，然后用甲醇将标准溶液储备溶液稀释成5.0～50.0μg/mL的中间液，最后用甲醇将中间液稀释成1.0μg/mL的标准使用溶液。3.根据权利要求1所述的一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法，其特征在于，所述乙腈
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水溶液中乙腈的含量为85～92％，所述乙腈
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水溶液中含有0.1～0.2％质量的甲酸。4.根据权利要求1所述的一种苦参碱和氧化苦参碱的快速检测方法，其特征在于，所述蜂蜜样品与水的比例为1g：3～4mL；所述蜂蜜样品与所述氨水乙腈的比例为1g：5～8mL，所述氨水乙腈的体积比为0.1～0.15％；所述蜂蜜样品与所述无水硫酸钠的质量比为1：1.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：向俊，荆辉华，陈晓青，刘琦，陈同强，
申请(专利权)人：湖南省产商品质量检验研究院，
类型：发明
国别省市：