抗炎肽-雷帕霉素自组装纳米药物及其制备方法、应用技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体公开了一种抗炎肽

【技术实现步骤摘要】
抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物及其制备方法、应用


[0001]本专利技术涉及医药
，特别涉及一种抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物及其制备方法、应用。

技术介绍

[0002]赖氨酸
‑
脯氨酸
‑
缬氨酸(抗炎肽，KPV)，是介导内源性抗炎肽α
‑
黑色素细胞刺激素(α
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MSH)发挥抗炎作用的末端三肽。研究发现，与α
‑
MSH相比，KPV拥有更好的抗炎效果，其在体内外均具有良好的抗炎作用。我们前期工作也表明，KPV能够发挥抗炎作用，增加结肠炎的治疗效果。此外，KPV发挥抗炎效果的同时能避免α
‑
MSH造成的色素沉积，且其作为一种内源性抗炎肽的衍生物，生物安全性良好。
[0003]雷帕霉素(RAPA)是一种新型大环内酯类免疫抑制剂及自噬激活剂，其与细胞内受体FKBP
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12结合形成复合物后直接作用于mTOR中的FRB(FKBP
‑
12
‑
rapamycin binding)结构域从而抑制蛋白活性，特异性阻断mTOR及其下游通路。RAPA作用机制不同于FK506和其他免疫抑制剂，其以非凋亡的方式阻断活化T细胞增殖治疗器官或骨髓移植中发生的排斥反应，比传统治疗方法副作用更少。此外，其可选择性移植IL
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2诱导的p70 S6激酶磷酸化与功能活化，并能够阻断蛋白合成诱导细胞循环停滞在G1期。因此，RAPA常被用于治疗器官移植、动脉粥样硬化等。然而，RAPA是一种疏水化合物，水溶性低(约2.6μg/ml)，在pH值2
‑
10范围内缺乏可电离的官能团，且其在光和热的作用下会发生水解和氧化，在水介质中的稳定性较低，RAPA的难溶性及不稳定性限制了其应用。为解决上述RAPA的问题，研究者们利用高分子材料(包括PLGA、PEG
‑
PCL、环糊精等)制备成纳米粒或胶束递送RAPA，并进一步在纳米粒表面修饰靶向抗体或仿生材料(细胞膜、血小板膜等)，取得了较好的治疗效果。然而，目前的纳米递药系统主要以载体为主要组成成分，药物含量少，载药量通常低于10％。载体的多样性和多功能性可赋予纳米粒多种多样的功能，提高治疗效果和降低副作用，但其存在制备复杂、增加原料和生产成本、体内代谢排泄安全隐忧等局限性。
[0004]自组装纳米药物由药物
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药物自组装而成，其自组装的驱动力有疏水相互作用、氢键、π
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π堆积作用和静电相互作用等。自组装纳米药物主要具有以下特点：体系简单，易于评价，可明显降低纳米体系的复杂性；载药量高，理论载药量可高达100％；可减少载体所带来的一系列问题；操作简单，为大规模生产提供可能。但目前尚未见KPV与RAPA自组装药物的相关报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物的制备方法，以解决现有雷帕霉素纳米粒制备工艺繁琐、成本高、载药量低等问题，同时联合抗炎肽协同发挥抗炎药效，提高疾病的治疗效果。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0007]一种抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物的制备方法，包括以下步骤：将雷帕霉素溶
液缓慢滴加至小分子抗炎肽溶液中，搅拌，除去溶剂、离心，即得所述抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物；
[0008]其中，雷帕霉素与抗炎肽的质量比为1∶5
‑
20。
[0009]优选地，所述抗炎肽溶液的浓度为5
‑
20mg/mL、pH为8
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10，所述抗炎肽的氨基酸序列为赖氨酸
‑
脯氨酸
‑
缬氨酸。
[0010]优选地，所述搅拌是在37
±
1℃、800
‑
1200rpm下搅拌2
‑
8h。
[0011]优选地，所述除去有机溶剂是利用超滤法或透析法进行。
[0012]本专利技术还提供一种根据上述方法制备得到的抗炎肽
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雷帕霉素自组装纳米药物，即KPV
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RAPA纳米药物。
[0013]本专利技术提供的上述抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物能够用于制备治疗器官移植后排斥反应的药物。
[0014]本专利技术提供的上述抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物能够用于制备治疗自身免疫性疾病的药物。
[0015]优选地，所述自身免疫性疾病为风湿性关节炎、血管炎、结肠炎。
[0016]本专利技术提供的上述抗炎肽
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雷帕霉素自组装纳米药物能够用于制备治疗心血管疾病的药物。
[0017]优选地，所述心血管疾病为动脉粥样硬化或血管钙化。
[0018]对比现有技术，本专利技术的有益效果为：
[0019](1)本专利技术以赖氨酸
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脯氨酸
‑
缬氨酸(KPV)为小分子抗炎肽，将小分子抗炎肽与免疫抑制剂/自噬诱导剂雷帕霉素(RAPA)通过疏水作用力、氢键等分子间作用力相连接，通过纳米沉淀法构建KPV
‑
RAPA纳米药物，实现了药物抗炎肽和雷帕霉素的高效共载和同步递送，克服了雷帕霉素由于水溶性低且性质不稳定而应用受到限制的缺陷，提高了药物的应用效果。
[0020](2)本专利技术采用一步纳米沉淀法进行制备，制备工艺简单，重现性好、生物安全性好，易于产业化，具有较高的临床转化前景。
[0021](3)本专利技术制备的KPV
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RAPA纳米药物具有载药量高、粒径均一、稳定性好等优势。
[0022](4)本专利技术提出的KPV
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RAPA纳米药物适应性广，且由于制备过程中小分子抗炎肽与雷帕霉素是以疏水作用力、氢键等分子间作用力相连接，并不影响药物本身的结构，故该KPV
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RAPA纳米药物仍可发挥KPV与RAPA各自的临床应用效果，如可广泛应用于器官移植后的排斥反应、各种自身免疫相关疾病如结肠炎、风湿性关节炎等及部分心血管疾病如动脉粥样硬化、血管钙化等的治疗；且由于本专利技术提供的方法制备得到的自组装药物提高了RAPA的稳定性，因而该自组装药物在抗器官移植免疫排斥反应、动脉粥样硬化等临床应用中的效果也会有所提高。
附图说明
[0023]图1为本专利技术实施例1中的KPV
‑
RAPA纳米药物制备流程图；
[0024]图2为本专利技术实施例1中KPV
‑
RAPA纳米药物的实物图；
[0025]图3为本专利技术实施例1中KPV
‑
RAPA纳米药物的透射电镜图；a与b、c分别表示不同放大倍数下的视野图；b与c分别是相同放大倍数下的不同视野图；
[0026]图4为本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将雷帕霉素溶液缓慢滴加至小分子抗炎肽溶液中，搅拌，除去溶剂、离心，即得所述抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物；其中，雷帕霉素与抗炎肽的质量比为1∶5
‑
20。2.根据权利要求1所述的抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述抗炎肽溶液的浓度为5
‑
20mg/mL、pH为8
‑
10。3.根据权利要求1所述的抗炎肽
‑
雷帕霉素自组装纳米药物的制备方法，其特征在于，所述搅拌是在37
±
1℃、800
‑
1200rpm下搅拌2
‑
8h。4.根据权利要求1所述的抗炎...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴雅，刘勇，施森，孙晓磊，何虎强，王伟明，张丽，蒋龙琪，刘镇毓，
申请(专利权)人：西南医科大学附属医院，
类型：发明
国别省市：