一种检测鲍曼不动杆菌的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测鲍曼不动杆菌的试剂盒，所述试剂盒包括如下核酸：核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的Aptarner、核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的Trigger、核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的Substrate、核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的DNAzyme、核苷酸序列如SEQ ID NO.5～8所示的Locking。本发明专利技术能将鲍曼不动杆菌同其他的杂质区分开，特异性强；可以得到可视化的电化学信号，易于判读；可以使Trigger链在反应中循环利用，增大输出信号，且检测时间短，检测限低，具备实际推广应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物分子检测，具体涉及一种检测鲍曼不动杆菌的试剂盒及其应用。

技术介绍

1、颅内感染是一种感染性疾病，全球患病率和致死率较高。根据chinet的相关数据，鲍曼不动杆菌是在脑脊液检出率高达第二位。因此及时发现鲍曼不动杆菌感染对患者治疗以及预后来说是十分有必要的。而现在对鲍曼不动杆菌的诊断主要还是依靠传统的细菌培养，生化鉴定以及质谱技术。传统细菌培养和生化鉴定所需时间较长，灵敏度低，不适用于即时诊断；也需要在传统细菌培养的基础之上才能进行；而质谱技术检测限为105cfu/ml,且准确率低于90％，仪器昂贵，不适于基层医院的检测，也不适用于鲍曼不动杆菌的早期筛查。而通过pcr扩增16srna基因的限制性内切酶分析对实验室环境以及操作者的专业水平都有很高的限制与要求，因此这种也不适用基层医院以及大面积爆发鲍曼不动杆菌的筛查。

2、国内也有关于鲍曼不动杆菌的检测试剂盒。胡韦维等人利用鲍曼不动杆菌的特异性引物探针lfd-mira来对鲍曼不动杆菌进行快速检测，检测下限为6cfu/ml，但是这种方式方法需要先进行核酸提取，不适用于一些基层医疗机构本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于核酶步行者电化学DNA传感器方法检测鲍曼不动杆菌的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括如下核酸：

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述Locking的核苷酸序列如SEQ IDNO.7所示。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括如下试剂：1×TE/Mg2+缓冲液、封闭核酶、Mg2+溶液和Tris-Hcl；

4.权利要求1～3任一项所述试剂盒在制备用于检测鲍曼不动杆菌的装置中的用途，其特征在于：所述装置为基于核酶步行者的电化学DNA传感器。

5.一种用于检测鲍曼不动杆菌的电化学DNA传感器，其特...

【技术特征摘要】

1.一种基于核酶步行者电化学dna传感器方法检测鲍曼不动杆菌的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括如下核酸：

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述locking的核苷酸序列如seq idno.7所示。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括如下试剂：1×te/mg2+缓冲液、封闭核酶、mg2+溶液和tris-hcl；

4.权利要求1～3任一项所述试剂盒在制备用于检测鲍曼不动杆菌的装置中的用途，其特征在于：所述装置为基于核酶步行者的电化学dna传感器。

5.一种用于检测鲍曼不动杆菌的电化学dna传感器，其特征在于：按照如下步骤制备：

6.根据权利要求5所述的电化学传感器，其特征在于：步骤1)所述substrate链的浓度为0.5～2.5μm，优选1.5μm；所述金电极表面滴加10μlsubstrate链；所述6-巯基-1-己醇与substrate链的体积比为1：1；所述孵育是室温避光孵育30～120min，优选60min。

7.根据权利要求5所述的电化学传感器，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘靳波，徐学静，谢静玲，李宝林，姜慧，
申请(专利权)人：西南医科大学附属医院，
类型：发明
国别省市：