一种体外维持间充质干细胞自我更新和多能性的培养方法技术

本发明专利技术属于间充质干细胞培养技术领域，具体涉及一种体外维持间充质干细胞自我更新和多能性的培养方法。本发明专利技术利用液液界面处较强的界面能制备出了一种单分子层的蛋白质纳米薄膜，该蛋白质纳米薄膜的组成成分均一明确，且可自定义；同时，在上述蛋白质纳米薄膜上培养间充质干细胞，不仅能在生长数量和速度等方面与传统的培养皿培养方法相当，并且具备维持并增强间充质干细胞干性的功能；此外，用交联剂(如京尼平)对上述单分子层蛋白质纳米薄膜进行交联处理后，还可以得到更坚硬的单层蛋白质纳米薄膜，该蛋白质纳米薄膜不易被细胞牵引力所影响而发生形变，并且在细胞融合度达到90％及以上数量时还可继续支撑细胞持续生长数天。数天。数天。

【技术实现步骤摘要】
一种体外维持间充质干细胞自我更新和多能性的培养方法


[0001]本专利技术属于间充质干细胞培养
，具体涉及一种体外维持间充质干细胞自我更新和多能性的培养方法。

技术介绍

[0002]间充质干细胞(mesenchymal stem cell)因具有向骨、软骨、神经和脂肪等多方向分化的潜能，具有免疫调节功能，以及免疫原性低等众多优点而在组织工程和再生医学等领域越来越受到广泛关注。同时，间充质干细胞在临床应用也较多，与造血干细胞联合应用，可以提高移植的成功率，加速造血重建。当患者接受大剂量化疗后，将间充质干细胞与造血干细胞一同输入，可明显加速患者血细胞恢复时间，且安全无不良反应。间充质干细胞不仅存在于骨髓中，也存在于脐带血、脂肪、牙髓等各个组织中。由于它分化的组织类型十分广泛，因此临床应用价值不菲。
[0003]目前，虽然关于间充质干细胞的临床应用越来越多，但仍因为一些原因而受到一定限制。比如，间充质干细胞的组织提取效率仅有0.001％～0.01％，而临床应用的用量为1～2百万细胞/公斤体重。此外，常规的间充质干细胞体外扩增培养是在塑料本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种体外维持间充质干细胞自我更新和多能性的培养方法，其特征在于，往细胞培养器皿中先加入FC40为下层油相，再加入蛋白质溶液或生物相容性聚合物溶液为上层水相，孵育后形成蛋白质纳米薄膜，再用PBS清洗上层水相，并将上层水相置换为培养基，随后将间充质干细胞接种于上层水相中进行培养。2.一种体外维持间充质干细胞自我更新和多能性的培养方法，其特征在于，往细胞培养器皿中先加入FC40为下层油相，再加入蛋白质溶液或生物相容性聚合物溶液为上层水相，孵育后形成蛋白质纳米薄膜，再用PBS清洗上层水相，然后向上层水相中加入交联剂，并经孵育交联蛋白质纳米薄膜，再用PBS清洗上层水相，并将上层水相置换为培养基，最后将间充质干细胞接种于上层水相中进行培养。3.根据权利要求1或2所述的一种体外维持间充质干细胞自我更新和多能性的培养方法，其特征在于，所述蛋白质包括溶菌酶、牛血清白蛋白、纤连蛋白、层粘连蛋白、I型胶原。4.根据权利要求1或2所述的一种体外维持间充质干细胞自我更新和多能性的培养方法，其特征在于，所述生物相容性聚合物包括明胶、聚赖氨酸。5.根据权利要求1或2所述的一种体外维持间充质干细胞自我更新和多能性的培养方法，其特征在于，所述交联剂包括京尼平。6.根据权利要求1或2所述的一种体外维持间充质干细胞自我更新和多能性的...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾小芳，吕玟妍，史家铭，胡薇，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：