陈皮醇提物及其在治疗嗜酸性粒细胞食管炎中的应用制造技术

本发明专利技术公开了陈皮醇提物及其在治疗嗜酸性粒细胞食管炎中的应用，通过有实验证实，Th2细胞因子信号转导是诱导实验性EoE的必要条件。证明了Th2细胞因子白细胞介素(IL)

【技术实现步骤摘要】
陈皮醇提物及其在治疗嗜酸性粒细胞食管炎中的应用


[0001]本专利技术涉及药物提取物的制备及其应用，具体为一种陈皮醇提物及其在治疗嗜酸性粒细胞食管炎中的应用。

技术介绍

[0002]嗜酸性粒细胞性食管炎(EoE)是一种与食物抗原诱发相关的慢性炎症性食管疾病，可同时伴发哮喘等其他过敏性疾病，其病理生理学涉及过敏原驱动的Th2 T细胞免疫反应。1978年首次将EoE确定为一种独立的疾病，其主要组织学表现为食管黏膜层被大量的嗜酸性粒细胞(Eosinophil，简称EOS)浸润，以食管功能障碍为主要临床症状。该病可发生于各个年龄段，50岁以下成人及儿童较为常见，尤其是儿童发病率较高，男性多于女性(3～4∶1)。成人患者临床症状为吞咽困难、食管狭窄、食物嵌顿以及反流样症状；儿童则主要表现为拒食和营养不良，严重影响患者及其家人的生活质量，部分患者的社会活动受到一定的限制。迄今为止我国仍未有EoE流行病学资料，但随着医师对该病的认识越来越深入，临床上报道该病例的研究在我国也呈现出明显增加的趋势。
[0003]EoE诱发因素较多，如接触特定的食物过敏原或空气传播的过敏原，一般认为其发病机制与其他特应性疾病如食物过敏、哮喘、变应性鼻炎和特应性皮炎等一致，是由Th2免疫应答引发的。EoE的炎症特征是浸润食管粘膜的T细胞和肥大细胞数量增加，以及IL
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5和TNF
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α的高水平表达，以Th2免疫反应为显著特征。
[0004]MAPK是信号从细胞表面传导到细胞核内部的重要传递者，是一组能被不同的细胞外刺激的丝氨酸
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苏氨酸蛋白激酶，不仅调节Th1/Th2分化、嗜酸性粒细胞趋化因子的表达，参与免疫反应，活化后可加快生成炎症细胞因子，从而加剧炎症反应，其中p38介导炎症、凋亡等，常用作开发抗炎药物的经典靶位。 TGF
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β表达增加是纤维化的常见途径，TGF
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β的生物学功能研究主要在炎症、组织修复等方面，近年来发现其对细胞的生长分化和免疫功能都有重要的调节作用。TGF
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β1属于调节细胞生长和分化的TGF
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β超家族成员之一，而Smads 蛋白家族是细胞内重要的信号传导和调节因子，作为TGF
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β1的调解中介，可以引起许多部位的纤维化增殖。TGF
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β/Smad信号通路是TGF
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β发挥生物学效应的主要经典通路，除此之外，TGF
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β还能以非Smad信号途径的方式激活MAPK 信号通路。目前对EoE的分子机制和免疫病理学的认识尚存在许多空白，但大量临床结果表明EoE触发嗜酸性粒细胞(Eos，eosinophil)渗入食管，导致炎症、重塑和纤维化。以上三个亚家族很有可能参与了EoE的发病机制，抑制该通路中p38 MAPK、TGF
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β1和smad3蛋白的表达，可有效地减少炎症因子释放，可能是治疗EoE的潜在通路。
[0005]EoE的发病机制至今尚未完全明确，目前尚无法根治，当前治疗的目标为改善患者临床症状，预防并发症(尤其是食道的纤维增生性狭窄)，提高患者的生活质量。针对其发病机制，EoE治疗方法主要为饮食疗法和药物治疗。饮食治疗通过避免食物中的过敏原可在一定程度上缓解与EoE发病机制相关的炎症，需要对患者的日常生活和饮食习惯做出较大改变，往往存在依从性差的问题。目前尚无FDA批准的治疗EoE的特异性药物，因其发病机制与
哮喘、特应性皮炎等过敏性疾病类似，故而临床上治疗EoE的一线药物是局部(吸入)/口服(全身)糖皮质激素类药物。据报道激素治疗可在一定程度上缓解食管炎症，但停药后易复发，但也有研究表明大多数接受外用糖皮质激素治疗的患者最终无法达到食管功能的完全正常，如果长期接受激素治疗，反而会再出现加重食管中嗜酸性粒细胞的增多；而且患者(尤其是儿童患者)不得不面临长期的糖皮质激素治疗及无法避免的激素不良反应(如青少年发育迟缓，口咽部/食管念珠菌病、骨密度异常、青光眼、高血糖和其他拮抗作用等)。
[0006]因此，研究具有疗效确切且安全的治疗嗜酸性粒细胞性食管炎的新型药物是一个亟待解决的问题。

技术实现思路

[0007]为了解决上述现有技术中存在的不足，本专利技术提供了一种陈皮醇提物及其制备方法，其通过抑制Th2型炎症因子，并降低TGF
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β表达来达到治疗EoE的目的，在治疗嗜酸性粒细胞食管炎中的应用具备良好的治疗效果。
[0008]本专利技术的目的是这样实现的：
[0009]一种陈皮醇提物，其制备方法如下：称取50g陈皮，剪碎，置于500ml圆底烧瓶，70％乙醇浸泡2h，采取10倍量溶媒在常压条件下分别提取三次，提取时间依次为2h、1.5h、1h，用8层纱布过滤，合并提取液，减压浓缩至无醇味，真空冷冻干燥后
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20℃保存；平行提取5次，提取物得率范围为36.91
±
0.64％， RSD<5.00％，重复性良好。
[0010]所述的陈皮醇提物的应用于治疗嗜酸性粒细胞食管炎。
[0011]积极有益效果：现有的研究认为EoE与食物和环境过敏原密切相关，除遗传和自然环境外，Th2型免疫异常(亢进)在EoE的发生和发展中发挥了关键作用，并与IgE介导的Ⅰ型变态反应紧密相关。本专利技术通过实验证实了花生过敏原和皮肤刺激是诱导实验性EoE的必要条件。并证明了Th2细胞因子白细胞介素
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4(IL
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4)、IL
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5、IL
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13和TNF
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α在EoE发病机制中的关键作用，以及TGF
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β、 MAPK等炎症信号通路也参与了EoE的发病过程，本专利技术制备的陈皮醇提物可通过抑制Th2型炎症因子和降低特异性IgE的产生，有效降低TGF
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β1，Smad
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3 等蛋白表达从而达到治疗嗜酸性粒细胞食管炎的目的。
[0012](1)本专利技术提供了70％陈皮醇提物制备方法及HPLC检测方法，该含量测定方法重复性好，明确了治疗嗜酸性粒细胞食管的药效物质基础，其主要成分为橙皮苷、川陈皮素、桔皮素。
[0013](2)本发的陈皮醇提物可用于治疗嗜酸性粒细胞性食管炎，这一发现弥补了目前嗜酸性粒细胞性食管炎治疗药物匮乏的缺陷。
[0014](3)本专利技术为了验证陈皮醇提物的治疗EoE的效果，提供了一种改进的EOE 小鼠模型，通过该方法使得小鼠患上嗜酸性粒细胞性食管炎，该小鼠模型可基本满足人类EoE临床症状和病理表现，并采用陈皮醇提物对其进行治疗，治疗结果证明了陈皮醇提物对嗜酸性粒细胞性食管炎具有一定的治疗效果，并显示出良好的安全性。
附图说明
[0015]图1为本专利技术中嗜酸性粒细胞性食管炎小鼠模型建立流程图；
[0016]图2为本专利技术中陈皮醇提物薄层色谱鉴别图；
[0017]图3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种陈皮醇提物，其特征在于，其制备方法如下：称取50g陈皮，剪碎，置于500ml圆底烧瓶，70%乙醇浸泡2h，采取10倍量溶媒在常压条件下分别提取三次，提取时间依次为2h、1.5h、1h，用8层纱布过滤，合并提取液，减压浓缩至无醇味，真空冷冻干燥后
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【专利技术属性】
技术研发人员：曹明卓，高勇，王泽茜，井贺云，孟驿佳，王媛，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：