对植物内生微生物组的宏基因组进行原位改造的方法技术

本发明专利技术适用于微生物技术领域，提供了对植物内生微生物组的宏基因组进行原位改造的方法，通过构建植物内生微生物原位宏基因组改造的工程质粒；构建植物内生微生物原位宏基因组改造的供体菌；在植物体外对内生微生物进行宏基因组改造及受体菌分离培养；在植物体内对内生微生物组进行原位宏基因组改造，为操纵植物微生物宏基因组研究提供了有效路径。微生物宏基因组研究提供了有效路径。微生物宏基因组研究提供了有效路径。

【技术实现步骤摘要】
对植物内生微生物组的宏基因组进行原位改造的方法


[0001]本专利技术属于微生物
，尤其涉及对植物内生微生物组的宏基因组进行原位改造的方法。

技术介绍

[0002]植物微生物组在植物生长和抗病过程中发挥着重要作用，通过操纵微生物组调控植物性状，促进植物健康生长，被认为是下一次绿色革命的关键。如何科学合理地调控微生物组，形成可操纵的、系统性的微生物组工程，已成为紧迫的前沿科学问题。
[0003]通过移植实验室内构建的菌株和微生物群落，在原生环境下直接操纵植物微生物组，是目前微生物组工程的主要策略。已广泛应用于拟南芥（Arabidopsis thaliana）和番茄（Lycopersicon esculentum）等植物土壤和叶际微生物组的研究中，并在改善植物性状等方面展示出巨大的应用潜力。然而自然环境中的很多微生物难以培养，实验室内难以真实模拟开放环境中复杂动态的互作网络，实验室内获得的功能菌株、工程菌和合成群落，不一定真实反应开放环境下的互作关系，移植的菌株在复杂环境内的定殖和扩散能力难以控制和预测。因此，对于更多复杂环境下的植物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.对植物内生微生物组的宏基因组进行原位改造的方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、构建植物内生微生物原位宏基因组改造的工程质粒；S2、构建植物内生微生物原位宏基因组改造的供体菌；S3、在植物体外对内生微生物进行宏基因组改造及受体菌分离培养；S4、在植物体内对内生微生物组进行原位宏基因组改造。2.如权利要求1所述的对植物内生微生物组的宏基因组进行原位改造的方法，其特征在于：所述构建植物内生微生物原位宏基因组改造的工程质粒，具体包括：质粒元件共包括复制子、启动子、抗性标记基因、转移起始位点和载荷基因；复制子包括pBBR1、RSF1010和p15A三种广宿主复制子；pBBR1复制子含有两个重要的元件，rep基因编码复制蛋白，参与质粒的复制，mob基因编码移动基因，负责质粒的接合转移；RSF1010复制子含有七个重要元件，其中rep基因编码REP A、B、C三个复制蛋白，参与质粒的复制，mob基因编码MOB A、B、C三个移动蛋白，负责质粒的接合转移；p15A复制子不含有转移起始位点，需要连接incP转移起始位点；启动子包括广宿主范围的启动子CP25、PA1、PA2、...

【专利技术属性】
技术研发人员：理永霞，李东振，刘振凯，张星耀，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院森林生态环境与自然保护研究所，
类型：发明
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