【技术实现步骤摘要】
一种高产3
′‑
唾液酸乳糖的大肠杆菌工程菌株的构建方法及应用
[0001]本专利技术涉及一种高产3
′‑
唾液酸乳糖的大肠杆菌工程菌株的构建方法及应用,属于微生物基因工程领域。
技术介绍
[0002]母乳富含唾液酸(SA),通常与母乳低聚糖和糖缀合物结合,在HMO中,约10
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30%的低聚糖是唾液酸化的。唾液酸化HMO约占总HMO的13%,其中3'
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唾液酸乳糖(3'
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SL)是两种典型的唾液酸化HMO之一,约占总HMO的2%。作为一种功能性营养成分,唾液酸化母乳低聚糖(HMO)已被证明通过促进益生菌生长和代谢、抑制病原体粘附、诱导肠上皮分化、促进肠道成熟和优化免疫功能,调节肠道微生物生态系统。这些特性在调节肠道微生物生态系统和预防新生儿炎症性疾病的发生方面起着关键作用。此外,最近的一些研究也支持唾液酸化HMO对新生儿骨骼和大脑发育的促进作用。
[0003]3'
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唾液酸乳糖为α2,3唾液酸糖基转移酶催化一分子唾 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种重组大肠杆菌,其特征在于,所述重组大肠杆菌弱化了基因组上编码β
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半乳糖苷酶的基因lacZ、编码N
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乙酰神经氨酸裂解酶的基因nanA、编码N
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乙酰神经氨酸转运体的基因nanT、编码N
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乙酰甘露糖胺激酶的基因nanK中的至少一种。2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌,其特征在于,所述重组大肠杆菌还包括如(a)和/或(b):(a)表达了编码乙酰神经氨酸合成酶的基因neuB、编码N
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乙酰葡萄糖胺异构酶的基因neuC和编码CMP
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乙酰神经氨酸合成酶的基因neuA;(b)表达了编码α2,3唾液酸转移酶的基因;(a)中,还可以表达单拷贝或双拷贝的编码磷酸葡萄糖胺变位酶的基因glmM和表达双拷贝neuA。3.根据权利要求1或2所述的重组大肠杆菌,其特征在于,在大肠杆菌基因组上的recA基因处整合编码α2,3唾液酸转移酶的基因Vs16,所述Vs16基因的NCBI登录号为AAC44541。4.根据权利要求1~3任一所述的重组大肠杆菌,其特征在于,所述重组大肠杆菌还可以携带重组质粒pRSF
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MUS*。5.根据权利要求2所述的重组大肠杆菌,其特征在于,利用pETDuet
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1质粒表达neuB、neuC、neuA、glmM,利用pCDFDuet
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