CIK细胞的分离制备方法技术

本发明专利技术公开了CIK细胞的分离制备方法，涉及生物制药领域，针对现有CIK细胞分离效率缓慢、研发成本高等问题，现提出如下方案，抽取少量人体血液收集存放正常室温环境中，将血液吸取分别装入盛有淋巴分离液的离心管中，随后离心，吸除血浆得到淋巴细胞层细胞，并装入试剂管中。本发明专利技术中培养的CIK细胞增殖速度快，抗肿瘤活性细胞能够大量扩增繁殖，且细胞活性也有所增强增强，并且本发明专利技术中的CIK细胞具有识别肿瘤的机制，对正常的细胞无毒性作用，同时本发明专利技术中采用的材料，化学成分稳定，生物研发成本低，安全性高，分离效率高，且分离方式能够为生物制药等相关领域提供质量稳定良好的细胞，具有较高的商用和药用价值。具有较高的商用和药用价值。具有较高的商用和药用价值。

Isolation and preparation of CIK cells

【技术实现步骤摘要】
CIK细胞的分离制备方法


[0001]本专利技术涉及生物制药领域，尤其涉及CIK细胞的分离制备方法。

技术介绍

[0002]CIK细胞，即细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine
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Induced Killer，CIK)是一种新型的免疫活性细胞，CIK增殖能力强，细胞毒作用强，具有一定的免疫特性，由于该细胞同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子，故又称为NK细胞（自然杀伤细胞）样T淋巴细胞，兼具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性，和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点，该细胞对肿瘤细胞的识别能力很强，如同“细胞导弹”，能精确“点射”肿瘤细胞，但不会伤及“无辜”的正常细胞。尤其对手术后或放化疗后患者效果显著，能消除残留微小的转移病灶，防止癌细胞扩散和复发，提高机体免疫力。
[0003]由于CIK细胞具有免疫调节和体细胞修复作用，在治疗肿瘤的同时，大部分患者尤其是放化疗后的患者，可出现消化道症状减轻或消失，皮肤有光泽，黑斑淡化，静脉曲张消失，脱发停止甚至头发生长或白发变黑等“年轻化”表现，及精神状态或体力明显恢复等现象，从而提高肿瘤患本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.CIK细胞的分离制备方法，具有如下的步骤：S1：抽取少量人体血液收集存放正常室温环境中；S2：将血液吸取分别装入盛有淋巴分离液的离心管中，随后离心，吸除血浆得到淋巴细胞层细胞，并装入试剂管中；S4：将生理盐水溶液加入到试剂管中混合均匀后离心并洗涤，弃上清后转入培养瓶中培养；S5：培养瓶中导入CIK细胞混合因子继续培养；S6：培养完成后进行内毒素检测，收集CIK细胞至离心杯中离心，结束后弃上清，将细胞收集配合生理盐水清洗收集；S7：将收集的细胞置于生理盐水中，抽取人血蛋白加入到细胞悬液中，置于培养瓶中培养数日后获得分离后的CIK细胞。2.根据权利要求1所述的CIK细胞的分离制备方法，其特征在于，所述步骤S1中的少量人体血液为外周血且通过肝素瓶收集存放在35~37℃区间的室内；优选的方案，外周血抽取在55~70ml。3.根据权利要求1所述的CIK细胞的分离制备方法，其特征在于，所述步骤S2中的人体血液需要放在淋巴分离液的上层，且淋巴分离液采用15ml~20ml。4.根据权利要求1所述的CIK细胞的分离制备方法，其特征在于，所述步骤S4中的生理盐水溶液为庆大霉素生理盐水溶液，且庆大霉素生理盐水溶液保持在145IU/ml...

【专利技术属性】
技术研发人员：卓成柳，李丁，
申请(专利权)人：深圳中旭生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：