一种转入外源基因来提高三角褐指藻藻种高温抗性的方法技术

本发明专利技术公开了一种光信号与温度信号偶联的COP9复合体亚基基因的过表达获得耐高温经济硅藻(三角褐指藻)的方法，所述方法包括以下步骤：1)构建接合转移的过表达COP9复合体的CSN5和CSN6亚基基因的质粒；2)进行大肠杆菌介导的接合转移，将外源表达质粒转化到三角褐指藻藻株中；3)通过博来霉素抗性压力获得单克隆的过表达藻株；4)最后通过荧光定量和八通道(水浴)检验过表达藻株的基因表达和耐高温特性。本发明专利技术的方法将常见的经济硅藻三角褐指藻的耐受温度上限从25℃提高到了30℃，并且能够在32℃下维持生物量的温度。在32℃下维持生物量的温度。在32℃下维持生物量的温度。

【技术实现步骤摘要】
一种转入外源基因来提高三角褐指藻藻种高温抗性的方法


[0001]本专利技术涉及一种藻种培育的方法，具体涉及一种转入外源基因来提高藻种高温抗性和生长速度的方法。

技术介绍

[0002]硅藻富含岩藻黄素、EPA/DHA等副产品，也可以作为饲料直接投喂海洋动物，尤其是作为贝类和虾类幼体开口和发育饵料。许多常见的应用成熟的饵料硅藻，如菱形藻，三角褐指藻均不耐高温，在养殖过程中一旦遇到高温环境，藻细胞大量发白，下沉凝集，死亡。通常认为三角褐指藻在28～30℃或更高温度下难以维持生长。因此，提高经济硅藻的高温适应性及生长速度都至关重要。
[0003]高温会改变硅藻的蛋白含量和化学组成。高温还会破坏植物蛋白质稳定性，抑制翻译，引起蛋白质的变性甚至凝聚。增强高温下错误折叠或者损伤的蛋白的清除，减弱高温对藻类蛋白含量，组成和活性的抑制，这很有可能是突破上述难题的关键。众所周知，依赖泛素化的蛋白酶体降解途径是光合生物对环境响应最敏感的生理过程，也对维持蛋白质稳态，蛋白更新，清除错误蛋白和蛋白调控至关重要。有待降解的靶蛋白在E1泛素激活酶、E2泛素结合酶和E本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种转入外源基因来提高三角褐指藻藻种高温抗性的方法，其特征在于，向三角褐指藻藻株内转移包含COP9信号复合体的关键催化亚基csn5或csn6基因、或包含csn5和/或csn6基因质粒载体、或包含csn5和/或csn6基因的菌株、或包含csn5和/或csn6基因质粒载体的菌株中的一种或二种；所述csn5基因具有序列表SED IQ No.1中所示的碱基序列；所述csn6基因具有序列表SED IQ No.2中所示的碱基序列。2.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括以下步骤：1)构建包含COP9信号复合体的关键催化亚基csn5和/或csn6基因与fcpA启动子和终止子的p0521s质粒；2)将构建好的CSN5和//或CSN6
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p0521s过表达质粒通过含Mob质粒的大肠杆菌转移到三角褐指藻藻株；3)通过博来霉素(...

【专利技术属性】
技术研发人员：王广策，高山，周璐，
申请(专利权)人：中国科学院海洋研究所，
类型：发明
国别省市：