MIR8175对改善肥胖和胰岛素抵抗的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种植物MIR8175对改善肥胖和胰岛素抵抗的应用，通过solexa测序从牛蒡中发现活性小核酸MIR8175，进行分析和验证，证明了MIR8175表达量极其丰富且耐高温蒸煮，具有较高的稳定性；通过给饮食诱导的肥胖小鼠模型灌胃牛蒡MIR8175，检测体重和摄食量，证明牛蒡MIR8175能够显著的抑制饮食诱导的体重增加；同样用此模型给小鼠灌胃牛蒡MIR8175，检测血糖，ITT，GTT，血脂，证明牛蒡MIR8175对胰岛素抵抗，血糖，血脂有改善作用。血脂有改善作用。血脂有改善作用。

【技术实现步骤摘要】
MIR8175对改善肥胖和胰岛素抵抗的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药工程领域，具体涉及植物MIR8175对改善肥胖和胰岛素抵抗的应用。

技术介绍

[0002]随着经济的发展和人们生活水平的不断提高，肥胖人数日益增多。肥胖不仅影响人的形体美，造成心理负担，而且还会引发高血压、高脂血症、高尿酸血症、痛风、脂肪肝、冠心病、脑血管、胰岛素抵抗病等慢性疾病，对身体健康造成威胁。胰岛素抵抗在临床上定义为已知数量的内源性或外源性胰岛素无法像正常人群一样增加个体对葡萄糖的吸收和利用，而肥胖能够导致并加剧胰岛素抵抗。随着体内多种组织表现出胰岛素抵抗，破坏了体内葡萄糖稳态，引发人体整体代谢异常，进而导致二型糖尿病(T2DM)的发生。
[0003]胰岛素抵抗与胰岛素分泌受损是T2DM的核心缺陷。治疗T2DM的关键在于治疗胰岛素抵抗，增加胰岛素敏感性。治疗胰岛素抵抗的方法包括饮食控制、运动锻炼及药物干预。饮食控制是改善胰岛素敏感性的基本方法，但是效果由于人的主观性不强不太理想。运动可以降低胰岛素的水平、改善胰岛素的作用，且需要长期坚持才能达到效果，但是当前人们生活节奏快，工作繁忙，缺乏运动的时间，可行性也不高。药物治疗是相对最有效的方法，但是主要问题为价格昂贵，不良反应多。目前本领域还没有一种有效的、副作用小的预防和治疗肥胖及其相关疾病的方法和药物，因此本领域迫切需要寻找新的治疗成分和开发新的治疗策略。
[0004]中医药有几千年的历史，在医疗保健中发挥着重要作用。自古以来，许多中药典籍就有中药配方和中草药用于预防或治疗疾病的记载。近年来，关于中医药的研究日益流行，与现代化学药物相比，通常具有较低的毒性和不良反应。在中国，多种中草药一直以来被中医用来治疗糖尿病。牛蒡根是我国一味传统的中草药，牛蒡根的药用价值在多本医药典籍中都有记载，根据记载牛蒡根能防治糖尿病、胆固醇过高、内外痔、肥胖症、性机能减退及便秘等症，具有去风湿、利尿、解热、治中风等作用。但是牛蒡根复杂的活性成分造就了其同时能对多种疾病具有疗效，现代医学研究将牛蒡根药用价值多归功于其含有大量膳食纤维，多糖，多酚等活性小分子。最新研究发现，植物MicroRNAs(miRNA)也能够通过饮食被动物吸收，被转移到血液中，并在组织中积累，调节动物内源基因的表达，发挥生物学功能。miRNA是一类长约19
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23nt的单链非编码小RNA，能够通过互补配对调控靶基因的表达。研究表明植物中含有丰富的miRNA，并且很多中miRNA非常稳定，耐高温蒸煮，这提示我们植物miRNA也是众多活性成员的一员，这为阐述中草药中活性成分及其作用机制提供了新的研究方向，并以此为切入点，让我们聚焦到探索牛蒡中有治疗效果的miRNA的作用。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是基于以上的问题述求，发现一种植物MIR8175对改善肥胖的应用；本专利技术的另一目的是提供一种MIR8175改善胰岛素抵抗的应用；本专利技术的另一目的是提供
一种miRNA8175改善高血脂的应用。
[0006]本专利技术的目的是采用以下技术方案实现的：首先是找到牛蒡中发挥关键作用的小分子，我们通过solexa测序从牛蒡的干片和牛蒡汤中筛选出MIR8175，进行RNA的提取和Q
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PCR验证，证明牛蒡MIR8175具有极高的表达量和稳定性。然后建立高脂饮食(HFD)诱导的胰岛素抵抗小鼠模型，给小鼠灌胃牛蒡MIR8175，检测小鼠体重和每日摄食量的变化，验证牛蒡MIR8175对改善肥胖的作用；同样地，用此模型给小鼠灌胃牛蒡MIR8175，检测小鼠血糖的变化，进行胰岛素耐受性测试(ITT)和葡萄糖耐受性测试(GTT)，证明牛蒡MIR8175对改善小鼠胰岛素抵抗的作用；最后用此模型给小鼠灌胃牛蒡MIR8175，检测小鼠血脂(包括甘油三酯水平(TG)，总胆固醇水平(T
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CHO)，低密度脂蛋白水平(LDL)和高密度脂蛋白水平(HDL))的变化，确认牛蒡MIR8175在改善血脂方面的应用。
[0007]本专利技术的有益效果是：1.利用该专利技术可以得出，牛蒡中含量最丰富的MIR8175具有极高的表达量和稳定性。2.利用该专利技术可以得出，牛蒡中MIR8175可以减轻高脂饮食诱导的肥胖小鼠体重。3.利用该专利技术可以得出，牛蒡中MIR8175可以改善肥胖小鼠的胰岛素抵抗。4.利用该专利技术可以得出，牛蒡中MIR8175可以改善小鼠的高血脂。
附图说明
[0008]图1牛蒡中活性成分的发现。图为牛蒡汤的miRNA成分的solexa测序结果。
[0009]图2通过Q
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PCR对牛蒡miRNA成分分析及验证。其中，A为牛蒡干片中miRNA的表达量。B为牛蒡汤中miRNA的表达量。C为牛蒡干片中MIR8175和MIR6300表达量的比对。D为牛蒡汤中MIR8175和MIR6300的表达量比对。
[0010]图3高脂饮食诱导的胰岛素抵抗小鼠模型构建。其中，A为高脂饮食诱导的胰岛素抵抗小鼠模型的构建流程图。B为CD(日常饮食)和HFD(高脂饮食)的营养成分表。
[0011]图4牛蒡MIR8175对体重的作用。其中，A为灌胃MIR8175对体重的影响。B为每只小鼠的每天食物摄入量。
[0012]图5牛蒡MIR8175对血糖作用。其中，A为灌胃前的空腹血糖值。B为灌胃7周后的空腹血糖值。
[0013]图6牛蒡MIR8175对ITT和GTT的影响。其中，A为灌胃MIR8175对胰岛素耐受性(ITT)的影响。B为灌胃MIR8175对葡萄糖耐受性(GTT)的影响。
[0014]图7牛蒡MIR8175对血脂的作用。其中TG为甘油三酯水平，T
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CHO为总胆固醇水平，LDL为低密度脂蛋白水平，HDL为高密度脂蛋白水平。
具体实施方式
[0015]下面通过附图和具体实施例详述本专利技术，但不限制本专利技术的保护范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0016]实施例1牛蒡中活性成分的发现、牛蒡miRNA成分分析及验证，具体操作如下：
[0017]通过solexa测序筛选出牛蒡中的活性成分(图1)，然后提取牛蒡干片和牛蒡汤中RNA，进行RT
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PCR和Q
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PCR验证。我们发现，在众多miRNA中，牛蒡干片和牛蒡汤中的MIR8175(序列为5
’‑
GAUCCCCGGCAACGGCGCCA
‑3’
)含量都远远高于其他miRNA(图2A、B)。随后我们选
取了miRNA中另一种含量最高的MIR6300(序列为5
’‑
GUCGUUGUAGUAUAGUGG
‑3’
)行验证，发现牛蒡干片和牛蒡汤中的MIR8175的含量都远远高于MIR6300，这说明牛蒡MIR8175蒸煮前后都具有较高的稳定性(图2C、D)。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种植物MIR8175对改善肥胖和胰岛素抵抗的应用，其特征在于，给胰岛素抵抗模型小鼠灌胃MIR8175，可以有效改善模型鼠的体重和胰岛素抵抗。2.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述的肥胖包括但不限于饮食引起的肥胖，缺乏运动引起的肥胖，精神因素引起的肥胖，遗传因素引起的肥胖，内分泌失调引起的肥胖等。3.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述的MIR8175不限于牛蒡中的MIR8175，包括所有含有MIR8175的其他植物提取物。4.根据权利要求1的应用，其特征在于，由于本专利选取的是牛蒡中最丰富最稳定的小核酸MIR8175，且仅测试了其在胰岛素抵抗和体重增加上的作用，而牛蒡药用价值极高，MIR8175对所有其所能治疗的疾病都可能存在治疗效果，因此所述的治疗范围包括但不限于胰岛素抵抗，也包括其他代谢性疾病及所有其他牛蒡可以治疗的疾病，例如2型糖尿病，妊娠糖尿病，癌症，痛风，高血压，高血脂，高尿酸，动脉硬化等疾病；可以抗炎症(如肾炎，皮炎，湿疹等)，抗微生物...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢萍，童亚飞，许铖红，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：