一种试管苗支架及其在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用制造技术

本发明专利技术属于柑橘无病毒良种繁育技术领域，具体公开了一种试管苗支架及其在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用，该试管苗支架由食品级聚丙烯材料制成，用于在试管内固定并支撑试管苗。本发明专利技术试管苗支架耐高温高压，对液体培养基的pH值影响小，不容易产生析出物，稳定性好，可重复使用，操作方便。操作方便。操作方便。

A test tube seedling scaffold and its application in Virus-free grafting of Citrus shoot tip micro buds

【技术实现步骤摘要】
一种试管苗支架及其在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用


[0001]本专利技术属于柑橘无病毒良种繁育
，更具体地，涉及一种试管苗支架及其在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用。

技术介绍

[0002]柑橘黄龙病是由亚洲韧皮杆菌侵染所引起的、发生在柑橘上的毁灭性病害，严重地影响了柑橘产业的持续发展。由于病原菌难以培养，也给黄龙病的防控带来了很大的阻碍，控制柑橘黄龙病造成严重的经济损失是果树研究人员亟待解决的任务。柑橘木虱是黄龙病病原的传播媒介，带病苗木的调运也加速了柑橘黄龙病的传播。迄今，控制柑橘黄龙病及其它病毒和类似病毒病，还没有有效的药剂治疗方法。目前，主要采用的措施是：挖除病树，防治木虱，搭建防虫网，加强园区管理，这些技术措施可以产生一定的效果，但投入的成本很高，效果有限。加强培育无毒苗，保证苗木健康无毒是非常重要的防病途径之一。此外，利用茎尖微芽嫁接培育无病毒苗木也是控制柑橘衰退病、柑橘黄脉病等病毒性病害的重要途径之一。
[0003]茎尖微芽嫁接脱毒是获得柑橘良种无病毒苗木的有效方法。1977年，Navarro教授研究出利用茎尖微芽嫁接获得无病毒苗木的方法(Navarro et al.,1977)。柑橘茎尖微芽嫁接脱毒的原理是利用茎尖分生组织所含病毒浓度含量低或者不带病毒，或者是由于疏导组织还没有形成，病原无法运输到顶端分生组织，因而可以利用茎尖进行脱毒。最新研究表明：茎尖分生组织一定范围内的细胞受到干细胞的保护，这也为解释植物茎尖一定范围内细胞不带病原提供了理论依据。由于柑橘为木本植物，它在进行组织培养时，生根是非常困难的，因此，只有利用砧木进行嫁接，从而解决生根难的问题。在双目实体显微镜下，利用柑橘黄化砧木进行接穗品种的微芽嫁接，可以获得无病毒苗木，这就为柑橘优良品种无病毒苗木推广应用奠定了良好的基础。目前，我国柑橘优良品种的无病毒苗木供不应求，培育无病毒苗木还存在着技术难度大，成活率不高等多种问题。
[0004]在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒过程中，培养基对试管苗脱毒至关重要。对试管苗进行培育操作时，传统的方法是利用定性滤纸制作滤纸桥，用于支撑试管苗并为其生根供给一定营养。但本申请专利技术人在试验中发现，目前使用的试管苗的支撑材料，即滤纸桥，存在一些缺陷：试管苗培育过程中滤纸的加入对培养基的pH影响较大，并且滤纸长时间浸泡在培养基中，会引起沉淀物的产生，从而影响柑橘茎尖微芽嫁接脱毒的效果。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的缺陷，本专利技术的目的在于提供一种试管苗支架及其在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用，旨在解决现有柑橘茎尖微芽嫁接脱毒过程中利用滤纸桥支撑试管苗存在pH值变化大、产生沉淀物等问题。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供了一种试管苗支架，该试管苗支架由食品级聚丙烯材料制成，用于在试管内固定并支撑试管苗。
[0007]优选地，该试管苗支架包括中心环，所述中心环沿其内沿向中心延伸出放射状条，用于固定并支撑插入所述中心环内的试管苗；所述中心环沿其外沿向外延伸出至少两个第一支撑脚，用于向垂直于所述中心环所在平面的方向翻折以支撑所述中心环。
[0008]优选地，所述放射状条对称排布。
[0009]优选地，所述至少两个第一支撑脚沿所述中心环的外沿等间距分布。
[0010]优选地，所述中心环沿其外沿向外还延伸出至少两个第二支撑脚，用于向垂直于所述中心环所在平面且与所述第一支撑脚翻折方向相反的方向翻折。
[0011]优选地，所述第二支撑脚的数量与所述第一支撑脚的数量相同，且所述第二支撑脚与所述第一支撑脚交替分布。
[0012]优选地，所述第一支撑脚为山字形，且其顶部与所述中心环连接；所述第二支撑脚为T形。
[0013]另一方面，本专利技术还提供了试管苗支架在柑橘茎尖微芽嫁接脱毒中的应用，应用时，所述试管苗支架浸入所述柑橘茎尖微芽嫁接专用培养基中。
[0014]优选地，在培养试管苗之前，对装有所述试管苗支架和所述柑橘茎尖微芽嫁接专用培养基的试管进行灭菌处理。
[0015]优选地，所述柑橘茎尖微芽嫁接专用培养基为以下5种培养基中的任意一种：
[0016]培养基A：MS培养基+30g/L蔗糖，pH＝6.3；
[0017]培养基B：MT培养基+30g/L蔗糖，pH＝6.3；
[0018]培养基C：MT培养基+30g/L蔗糖，pH＝6.4；
[0019]培养基D：MT培养基+30g/L蔗糖+0.5mg/L赤霉素，pH＝6.3；
[0020]培养基E：3/4浓度的MT培养基+30g/L蔗糖+0.5mg/L赤霉素，pH＝6.4。
[0021]总体而言，通过本专利技术所构思的以上技术方案与现有技术相比，具有以下有益效果：
[0022](1)本专利技术利用聚丙烯材料制成的试管苗支架替代传统的滤纸桥，聚丙烯试管苗支架耐高温高压，稳定性更好，安全无毒，在高温高压灭菌前后对培养基的pH影响较小，同时食品级聚丙烯PP材料的试管苗支架长时间浸泡在培养基中，也不容易析出杂质，操作使用方便，可以减少人工劳动强度，且清洗方便，可重复使用，经济性好。
[0023](2)本专利技术提供的聚丙烯支架结构，操作方便，整个支架可以稳定放于试管底部，且插入其中的柑桔试管苗根系有较舒适的生长空间，试管苗的固定效果好。
[0024](3)将本专利技术聚丙烯试管苗支架应用于柑橘茎尖微芽嫁接脱毒苗培养过程中，可大大减小支架对脱毒苗生长过程可能产生的影响，相比传统的滤纸桥表现出明显的优势，应用价值高。
附图说明
[0025]图1为本专利技术实施例1提供的聚丙烯支架展开的平面图。
[0026]图2为本专利技术实施例1提供的聚丙烯支架使用时的立体结构图。
[0027]图3为本专利技术实施例2中采用聚丙烯支架与滤纸桥在灭菌前后液体培养基的pH值变化。
[0028]图4为本专利技术实施例3中利用聚丙烯支架进行柑橘茎尖嫁接培养的照片。
[0029]图5为本专利技术实施例3中利用滤纸桥最初进行柑橘茎尖嫁接时(A)和培养一段时间(B)的照片。
具体实施方式
[0030]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0031]本专利技术提供的试管苗支架，该支架由食品级聚丙烯材料制成，用于在试管内固定并支撑试管苗。
[0032]本专利技术试管苗支架材料选择食品级聚丙烯(PP)，颜色白色半透明，熔点在200℃以上，耐高温高压，不会析出杂质，稳定性好。利用食品级聚丙烯PP材料制作成试管苗支架，相比传统的滤纸桥，对液体培养基的pH值及成分的影响更小，从而避免了支架和培养基变化对柑橘茎尖微芽嫁接脱毒效果造成的影响，安全可靠。本专利技术聚丙烯试管苗支架操作使用方便，清洗方便，可以减少人工劳动强度；且可重复使用，节约了成本。
[0033]以下结合具体实施例，对上述技术方案详细说明。
[0034]实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种试管苗支架，其特征在于：该试管苗支架由食品级聚丙烯材料制成，用于在试管内固定并支撑试管苗。2.根据权利要求1所述的试管苗支架，其特征在于：包括中心环，所述中心环沿其内沿向中心延伸出放射状条，用于固定并支撑插入所述中心环内的试管苗；所述中心环沿其外沿向外延伸出至少两个第一支撑脚，用于向垂直于所述中心环所在平面的方向翻折以支撑所述中心环。3.根据权利要求2所述的试管苗支架，其特征在于：所述放射状条对称排布。4.根据权利要求2所述的试管苗支架，其特征在于：所述至少两个第一支撑脚沿所述中心环的外沿等间距分布。5.根据权利要求2
‑
4任一所述的试管苗支架，其特征在于：所述中心环沿其外沿向外还延伸出至少两个第二支撑脚，用于向垂直于所述中心环所在平面且与所述第一支撑脚翻折方向相反的方向翻折。6.根据权利要求5所述的试管苗支架，其特征在于：所述第二支撑脚的数量与所述第一支撑脚的数量相同，且所述第二支撑脚与所述第一支撑脚交替分布。7...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜玲，杜松，杨月华，姜家琳，汪方奎，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：