一种丽豆的组培快速繁殖方法技术

本发明专利技术公开了一种丽豆的组培快速繁殖方法。属于组培技术领域。包括培养基组合，还提供了丽豆的组培快速繁殖方法，包括以下步骤：种子消毒；初代培养；继代培养；生根培养；炼苗；移栽。本发明专利技术采用茎段的腋芽诱导培养基、继代培养基和生根培养基解决了对丽豆进行大规模培养的问题。采用组织培养方法比传统播种出苗率高，在生根培养过程中选择以透气性好的蛭石为基质，直接装盒应用，改良的1/4MS营养液不用添加有机物质和糖，能够满足组培苗生长所需营养，移栽省去传统组培苗洗根部琼脂这一操作，且植株长势良好，生根率可达80％，移栽成活率可达95％以上，简化程序、节约生产成本，简便易行，对丽豆的规模化育苗具有重要的意义。对丽豆的规模化育苗具有重要的意义。

A method of tissue culture and rapid propagation of kidney bean

【技术实现步骤摘要】
一种丽豆的组培快速繁殖方法


[0001]本专利技术涉及组培
，更具体的说是涉及一种丽豆的组培快速繁殖方法。

技术介绍

[0002]丽豆是典型的山西省乡土植物，分布于太原、交城、离石等地，为一种耐旱、耐瘠薄的灌木或小乔木，花大美丽，根可固氮，种子粗蛋白和粗脂肪含量高。
[0003]丽豆不仅具有独特的观赏价值和经济价值，还具有较强的水土保持功能，具有一定的开发潜力和价值。
[0004]目前丽豆主要靠种子繁殖，但种子成熟时容易开裂，收获种子困难，丽豆是直根系，移植成活率低，这些严重制约丽豆种苗规模化发展。为提高丽豆移栽成活率和种苗产能，通过植物组织培养繁殖方法满足短时间内快速繁殖苗木的需求，但目前关于丽豆组织培养方面的研究尚未见报道。
[0005]因此，如何提供一种丽豆的组培快速繁殖方法是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术提供了一种丽豆的组培快速繁殖方法。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0008]一种丽豆的组培快速繁殖培养基组合，包括继代培养基和生根培养基，继代培养基继成分：以MS培养基为基本培养基，还包括0.3mg/L的6
‑
BA、0.05mg/L的NAA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂，pH为5.8～6.5；生根培养基：以蛭石为介质，添加含103.125mg NH4NO3、118.75mg KNO3、23.125mg MgSO4·
7H2O、10.625mg KH2PO4、16.96mg MnSO4·
H2O、8.6mg ZnSO4·
7H2O、6.2mg H3BO3、0.84mg KI、0.25mg Na2MoO4·
2H2O、0.0025mg CuSO4·
5H2O、0.0025mg CoCl2·
6H2O、27.5mg CaCl2·
2H2O、37.4mg Na2EDTA、27.8mg FeSO4·
7H2O的营养液，得生根培养基。
[0009]本专利技术还提供了一种利用上述丽豆的组培快速繁殖培养基组合的方法，包括以下步骤：
[0010](1)种子消毒：种子放入温水中浸泡后，洗衣粉浸泡，冲洗，消毒，备用；
[0011](2)初代培养：将消毒好的种子接种于腋芽诱导培养基中培养获得无菌苗；
[0012](3)继代培养：将步骤(2)中的无菌苗切成茎段接种于继代培养基中培养，得幼苗；
[0013](4)生根培养：将步骤(3)中培养的幼苗切成3cm的段用200mg/L的NAA浸泡30min后，置于生根培养基培养，得试管苗；
[0014](5)炼苗：步骤(4)中培养的试管苗炼苗后，得小苗；
[0015](6)移栽。
[0016]有益效果在于：用改良的营养液和蛭石为扦插介质，这一步无需在超净工作台上，操作方便。
[0017]优选的：步骤(1)种子的标准：饱满的种子；温水的温度：55～65℃，浸泡的时间为
24h；洗衣粉浸泡的时间为10min；冲洗使用自来水，冲洗的时间为1h，冲洗后用滤纸吸干水分，置于超净工作台内；消毒：75％酒精溶液消毒1min，无菌水冲洗3次，再用0.1％HgCl2消毒5min，无菌水冲洗5次，用无菌滤纸吸干水分。
[0018]有益效果在于：首先在外植体的选择上，选择种子不受季节时令的限制，种子成熟后保存好随时可以用，如果选择茎段只能在五六月份采集外植体。
[0019]其次种子光滑，表面细菌真菌相对少，筛选酒精和升汞消毒时间较容易，消毒前用温水浸泡比不浸泡发芽时间短。
[0020]优选的：步骤(2)腋芽诱导培养基的成分：以MS培养基为基本培养基，还包括30g/L的蔗糖、6g/L的琼脂，pH为5.8；培养条件为：22～25℃、光照强度1800～2500Lux、光周期为14h/d。
[0021]有益效果在于：本专利技术在不添加激素的培养基中可以获得正常的无菌苗，添加激素后无菌苗畸形，不利于下一步试验。
[0022]优选的：步骤(3)茎段的规格为长1cm；培养条件：22～25℃、光照强度1800～2500Lux、光周期为14h/d，培养时间为20～25d。
[0023]优选的：步骤(4)培养：22～25℃、光照强度1800～2500Lux、光周期为14h/d。
[0024]优选的：步骤(5)炼苗的时机：待步骤(4)培养的试管苗根长到1～2cm时；炼苗时间为3d，温度为22～25℃。
[0025]有益效果在于：在室温下炼苗几天，有利于生根苗适应有菌的环境，能够有效增加移栽成活率。
[0026]优选的：步骤(6)移栽：取出步骤(5)中培养的小苗移栽入基质中，湿度保持在85～90％、温度20～25℃；30天后进入常规管理。
[0027]有益效果在于：生根苗在限定的(外部环境为小拱棚)环境里有个生长适应期，使其根系更好的与基质结合，提高成活率。
[0028]优选的：基质：泥炭土：珍珠岩：蛭石的体积比为3：1：1；基质移栽前用50％多菌灵可湿性粉剂的1000倍液进行消毒。
[0029]本专利技术还提供了上述培养基组合，或上述任一的方法在农业生产中的应用。
[0030]经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术公开提供了一种丽豆的组培快速繁殖方法，取得的技术效果为通过运用植物组织培养技术，采用茎段的腋芽诱导培养基、继代培养基和生根培养基解决了对丽豆进行大规模培养的问题。采用组织培养方法比传统播种出苗率高，在生根培养过程中选择以透气性好的蛭石为基质，直接装盒应用，改良的1/4MS营养液不用添加有机物质和糖，能够满足组培苗生长所需营养，移栽省去传统组培苗洗根部琼脂这一操作，且植株长势良好，生根率可达80％，移栽成活率可达95％以上，省去了在超净工作台上的无菌操作步骤，简化程序、节约生产成本，简便易行，对丽豆的规模化育苗具有重要的意义。
具体实施方式
[0031]下面将结合本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的
范围。
[0032]本专利技术实施例公开了一种丽豆的组培快速繁殖方法。
[0033]实施例中未提及的原料和设备均为市售渠道获得，对其品牌来源无要求，未提及的方法为常规实验方法，在此不再赘述。
[0034]实施例1
[0035]一种丽豆的组培快速繁殖培养基组合，包括继代培养基和生根培养基，继代培养基继成分：以MS培养基为基本培养基，还包括0.3mg/L的6
‑
BA、0.05mg/L的NAA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂，pH为5.8～6.5；
[0036]生根培养基：以蛭石为介质，添加含103.125mg NH4NO3、118本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种丽豆的组培快速繁殖培养基组合，其特征在于，包括继代培养基和生根培养基，所述继代培养基继成分：以MS培养基为基本培养基，还包括0.3mg/L的6
‑
BA、0.05mg/L的NAA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂，pH为5.8～6.5；所述生根培养基：以蛭石为介质，添加含103.125mg NH4NO3、118.75mg KNO3、23.125mg MgSO4·
7H2O、10.625mg KH2PO4、16.96mg MnSO4·
H2O、8.6mg ZnSO4·
7H2O、6.2mg H3BO3、0.84mg KI、0.25mgNa2MoO4·
2H2O、0.0025mg CuSO4·
5H2O、0.0025mg CoCl2·
6H2O、27.5mg CaCl2·
2H2O、37.4mgNa2EDTA、27.8mg FeSO4·
7H2O的营养液，得生根培养基。2.一种利用权利要求1所述丽豆的组培快速繁殖培养基组合的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)种子消毒：种子放入温水中浸泡后，洗衣粉浸泡，冲洗，消毒，备用；(2)初代培养：将消毒好的种子接种于腋芽诱导培养基中培养获得无菌苗；(3)继代培养：将步骤(2)中的无菌苗切成茎段接种于继代培养基中培养，得幼苗；(4)生根培养：将步骤(3)中培养的幼苗切成3cm的段用200mg/L的NAA浸泡30min后，置于生根培养基培养，得试管苗；(5)炼苗：步骤(4)中培养的试管苗炼苗后，得小苗；(6)移栽。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈陆琴，曹建庭，任保青，马俊，王玮，赵玉琳，潘亮，赵志清，吕剑南，南光耀，陈摄威，方宇林，
申请(专利权)人：太原植物园，
类型：发明
国别省市：