一种从尿液中提取β2-微球蛋白的方法技术

本发明专利技术涉及生物制药领域，具体公开了一种从尿液中提取β2

An extract from urine \u03b2 2-microglobulin method

【技术实现步骤摘要】
一种从尿液中提取
β2‑
微球蛋白的方法


[0001]本专利技术涉及生物制药领域，尤其是涉及一种从尿液中提取β2微球蛋白的方法。

技术介绍

[0002]β2
‑
微球蛋白是由淋巴细胞、血小板、多形核白细胞产生的一种小分子球蛋白，分子质量为11800，是由99个氨基酸组成的单链多肽。广泛存在与血液、尿液、脑脊液、唾液、初乳中。
[0003]临床上检测血或尿中的β2
‑
微球蛋白浓度为临床肾功能测定、肾移植成活、糖尿病肾病、重金属镉、汞中毒以及某些恶性肿瘤的临床诊断提供较早、可靠和灵敏的指标。
[0004]β2
‑
微球蛋白在检测及生物制药领域均有着十分广阔的应用前景，但目前缺乏量产β2
‑
微球蛋白的技术，导致β2
‑
微球蛋白较为珍贵。
[0005]医院中有许多病患由于行动不便或各种特殊情况，导致排尿时无法前往洗手间进行，而是通过容器将尿液收集后再废弃，由于尿液中含有β2
‑
微球蛋白，将尿液废弃是十分浪费的，但现有技术中，从尿液中提取β2
‑
微球蛋白的技术目前还较为空白，因此还有改善空间。

技术实现思路

[0006]为了从尿液中提取β2
‑
微球蛋白，本申请提供一种从尿液中提取β2
‑
微球蛋白的方法。
[0007]本申请提供的一种从尿液中提取β2
‑
微球蛋白的方法采用如下的技术方案：/>[0008]一种从尿液中提取β2
‑
微球蛋白的方法，包括以下步骤：
[0009]步骤1)，向尿液中加入牛血清白蛋白、硫酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、茶多酚、葡聚糖，混匀，形成原液；
[0010]步骤2)，将原液通过高通量透析器进行透析，收取滤液，得预处理液；
[0011]步骤3)，将预处理液通过低通量透析器进行透析，滤出水分，至剩余液体体积为预处理液体积的1％
‑
2％，得β2
‑
微球蛋白浓缩液；
[0012]步骤4)，将β2
‑
微球蛋白浓缩液进行纯化，得β2
‑
微球蛋白成品。
[0013]通过采用上述技术方案，通过从尿液中提取β2
‑
微球蛋白，充分利用医院中收集的病患尿液，且一些特殊病患，如上尿路感染的病患，尿液中的β2
‑
微球蛋白含量较高，使得从尿液中提取得到的β2
‑
微球蛋白数量较多，产量较高，具有较高的经济价值。
[0014]通过向尿液中加入牛血清白蛋白、硫酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、茶多酚、葡聚糖，有效保护尿液中的β2
‑
微球蛋白，使得尿液中的β2
‑
微球蛋白保持活性，使得提取得到的产品质量较佳。
[0015]优选的，所述高通量透析器的超滤系数为25
‑
26mL/h/mmHg。
[0016]通过采用上述技术方案，通过具体选择超滤系数，使得大分子杂质过滤效果较佳，且效率较高，较好地控制成本，具有更高的经济价值。
[0017]优选的，所述低通量透析器的超滤系数为5
‑
6mL/h/mmHg。
[0018]通过采用上述技术方案，通过具体选择超滤系数，使得小分子杂质过滤效果较佳，是最终产品的纯度较高，品质更好。
[0019]优选的，所述步骤3)中，滤出水分，至剩余液体体积为预处理液体积的1.5％。
[0020]通过采用上述技术方案，通过具体选择剩余液体的体积，保证杂质过滤的效果，进一步提高最终产品的纯度，品质更高。
[0021]优选的，所述步骤1)中，牛血清白蛋白的投入质量为尿液质量的2
‑
3％、硫酸镁的投入质量为尿液质量的1％
‑
2％、聚乙烯吡咯烷酮的投入质量为尿液质量的2％
‑
3％、茶多酚的投入质量为尿液质量的0.5
‑
0.7％、葡聚糖的投入质量为尿液质量的0.3
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0.5％。
[0022]通过采用上述技术方案，通过具体选择牛血清白蛋白、硫酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、茶多酚、葡聚糖投入量的范围，使得对β2
‑
微球蛋白的保护效果较佳，减少蛋白失活的发生，制得的终产物质量较好。
[0023]优选的，所述步骤1)中，牛血清白蛋白的投入质量为尿液质量的2.6％、硫酸镁的投入质量为尿液质量的1.3％、聚乙烯吡咯烷酮的投入质量为尿液质量的2.2％、茶多酚的投入质量为尿液质量的0.6％、葡聚糖的投入质量为尿液质量的0.4％。
[0024]通过采用上述技术方案，通过具体选择牛血清白蛋白、硫酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、茶多酚、葡聚糖的投入量，使得对β2
‑
微球蛋白的保护效果更佳，使得蛋白不易失活，制得的终产物质量更好。
[0025]优选的，所述步骤4)中，采用超滤分离纯化装置对微球蛋白浓缩液进行超滤分离纯化。
[0026]通过采用上述技术方案，通过超滤分离纯化，使得微球蛋白中的杂质更少，而且有效去除内毒素，制得的产品质量较高，应用较广。
[0027]优选的，所述超滤分离纯化装置的切割分子量为30000
‑
40000。
[0028]通过采用上述技术方案，通过具体选择切割分子量的范围，使得超滤效率较高，同时内毒素清除效果较好，终产物的内毒素含量较低，有效提高产品品质，产品应用范围更广。
[0029]综上所述，本申请具有以下有益效果：
[0030]1、由于本申请通过从尿液中提取β2
‑
微球蛋白，充分利用医院中收集的病患尿液，且一些特殊病患，如上尿路感染的病患，尿液中的β2
‑
微球蛋白含量较高，使得从尿液中提取得到的β2
‑
微球蛋白数量较多，产量较高，具有较高的经济价值。
[0031]2、本申请中优选通过向尿液中加入牛血清白蛋白、硫酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、茶多酚、葡聚糖，有效保护尿液中的β2
‑
微球蛋白，使得尿液中的β2
‑
微球蛋白保持活性，使得提取得到的产品质量较佳。
[0032]3、本申请中优选通过具体选择牛血清白蛋白、硫酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、茶多酚、葡聚糖的投入量，使得对β2
‑
微球蛋白的保护效果更佳，使得蛋白不易失活，制得的终产物质量更好。
具体实施方式
[0033]以下结合实施例对本申请作进一步详细说明。
[0034]实施例1
[0035]一种从尿液中提取β2
‑
微球蛋白的方法，包括以下步骤：
[0036]步骤1)，称取20g牛血清白蛋白、100g硫酸镁、200g聚乙烯吡咯烷酮、50g茶多酚、30g葡聚糖，搅拌均匀，制得蛋白保护组合物，从医院收集病患尿液，并在尿液排出后的1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从尿液中提取β2
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微球蛋白的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1），向尿液中加入牛血清白蛋白、硫酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、茶多酚、葡聚糖，混匀，形成原液；步骤2），将原液通过高通量透析器进行透析，收取滤液，得预处理液；步骤3），将预处理液通过低通量透析器进行透析，滤出水分，至剩余液体体积为预处理液体积的1%
‑
2%，得β2
‑
微球蛋白浓缩液；步骤4），将β2
‑
微球蛋白浓缩液进行纯化，得β2
‑
微球蛋白成品。2.根据权利要求1所述的一种从尿液中提取β2
‑
微球蛋白的方法，其特征在于：所述高通量透析器的超滤系数为25
‑
26mL/h/mmHg。3.根据权利要求2所述的一种从尿液中提取β2
‑
微球蛋白的方法，其特征在于：所述低通量透析器的超滤系数为5
‑
6mL/h/mmHg。4.根据权利要求1所述的一种从尿液中提取β2
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微球蛋白的方法，其特征在于：所述步骤3）中，滤出水分，至剩余液体体积为预处理液体积的1.5%。5.根据权利要求1所述的一种从尿液中提取β2...

【专利技术属性】
技术研发人员：李长路，
申请(专利权)人：广州蕊特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：