一种干酪乳杆菌LC-12发酵溶胞产物的制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种干酪乳杆菌LC

A preparation method of lysate from Lactobacillus casei lc-12 fermentation and its application

【技术实现步骤摘要】
一种干酪乳杆菌LC
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12发酵溶胞产物的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物发酵
，特别涉及一种干酪乳杆菌发酵溶胞产物的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]乳酸杆菌是一类广泛应用于食品发酵
和肠道健康维护的微生物，多具有人体肠道内较强的定殖能力和维护菌群平衡的效果；同时在乳制品发酵和植物基发酵等产品中可提供发酵风味和口感，并起到促进营养吸收和帮助消化的功能。
[0003]目前干酪乳杆菌多备用于牛乳、豆乳、干酪等乳制品的发酵剂或辅助发酵剂。随着植物基发酵饮品的兴起，干酪乳杆菌在花生乳、山药乳及核桃乳的发酵产品开发过程中也被广泛应用，使新品获得良好的风味。
[0004]近年来，对于包括乳酸杆菌在内的多种益生菌及其功能特性已研究的比较成熟，除食品行业外还应用在了医药领域及护肤领域。如专利申请CN103582486A中针对源自嗜酸乳杆菌、段度感觉和乳双歧杆菌的组合物具有较高的抗氧化活性，可应用于医药、食品领域。专利申请CN103937716A公开了一种具有显著体外抗氧化能力和抑制致病菌能力，并且能显著降低慢性酒精肝损伤大鼠模型血脂和血清内毒素水平的发酵乳杆菌grx07，该菌株能够缓解肝脏炎症反应，上调肝脏抗氧化特异蛋白Nrf2表达量，降低干细胞凋亡率，下调肝脏炎性因子的表达，对慢性酒精肝损伤具有良好的缓解作用。专利申请CN111973546A公开了一种抗氧化益生菌面膜及其制备方法，所述活性成分包括植物乳杆菌24
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7的发酵产物，具有良好的保湿、修复、预防衰老的功效。Sz
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˝ osi[ ]研究中证明，灭活型长双歧杆菌NCC2705和长双歧杆菌NCC3001(热处理)、长双歧杆菌BL/81和超声处理的长双歧杆菌BL/84裂解物促进人角质形成细胞(NHEKs)的分化标志物(角蛋白KRT1、KRT10和转谷氨酰胺酶TGM1)。此外，在融合后的NHEK中，经长双歧杆菌非复制株和提取物处理后，抗菌肽(如β
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防御素
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1和BDEF)以及参与伤口愈合的分子(如组织蛋白酶B、D和H)的表达显著增加。这些结果得到了mRNA转录本水平的证实。
[0005]许多化妆品中已开发出通过添加发酵产物来改善皮肤问题进行调控。Gueniche将双歧杆菌的提取液作为化妆品的功效成分达到了缓解皮肤敏感性的效果，同时增加了皮肤对物理化学刺激的耐受性。在理肤泉的产品研发中，发现透明颤菌（Vitreoscilla filliformis）发酵溶胞物可以刺激β防御素的产生及Toll受体影响人先天免疫反应，从而缓解了皮肤的干燥和敏感症状，恢复了皮肤屏障机能和皮肤表面生物的多样性，最终改善了脂溢性皮炎和湿疹性皮炎。
[0006]专利技术专利CN112375722B中公开了一种分离自新疆伊犁州健康婴儿粪便样本的可改善过敏的干酪乳杆菌LC
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12及其产品、应用，菌种保藏编号为CGMCCNO .21372，保藏日期为2020年12月14日，菌种命名为LC
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12，保藏单位为中国普通微生物菌种保藏管理中心。该菌株具有降低特异性IgE的表达水平、提高特异性IgG2a的表达水平、提高白介素10的表达水平的功能。权利要求包括所述的干酪乳杆菌LC
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12（Lactobacillus casei）制得的产品，
其特征在于，所述的产品包括内服制剂和/或外用制剂，且制剂中均含有所述的干酪乳杆菌LC
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12粉剂，并要求所述制剂中干酪乳杆菌LC
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12粉剂的活菌数﹥50亿/g。专利中实施例表现出通过活菌悬液灌胃方式处理后可降低过敏源在小鼠体内特异性IgE的表达水平、提高过敏源在小鼠体内特异性IgG2a的表达水平、提高小鼠机体内IL
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10的表达水平。该专利公开了干酪乳杆菌LC
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12活菌在抗过敏方面的应用，其具有改善过敏性症状的功效。现有技术中未发现干酪乳杆菌LC
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12在皮肤抗炎方面的研究。

技术实现思路

[0007]本专利技术要解决的技术问题是，提供一种具有皮肤抗炎功效的干酪乳杆菌LC
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12发酵溶胞产物的制备方法及其应用。
[0008]为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：一种干酪乳杆菌LC
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12发酵溶胞产物的制备方法，其特征在于采用以下步骤：A、将干酪乳杆菌LC
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12接种到MRS培养基中进行培养，培养条件为：30
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42℃，80
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180 rpm/min转速摇床，培养20
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80小时，得到种子液；所述MRS培养基由以下原料组分组成：酪蛋白酶消化物10.0g、柠檬酸三铵2.0g、牛肉膏粉10.0g、硫酸镁(MgSO4
·
7H2O)0.2g、酵母膏粉4.0g、硫酸锰(MnSO4 ·
4H2O) 0.05g、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g、葡萄糖20.0g、吐温80 1.08g；所述MRS培养基的pH值为5.5
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5.9；所述干酪乳杆菌LC
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12的保藏号为：CGMCCNO .21372，保藏单位为中国普通微生物菌种保藏管理中心； B、将步骤A所得种子液接种到MRS培养基中，在30
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42℃环境，80
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180 rpm/min转速下进行摇床扩培，得发酵液；C、将步骤B所得发酵液在3500
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8000rpm转速，4℃环境下离心处理20min，过滤得干酪乳杆菌菌体；D、将步骤C所得干酪乳杆菌菌体用磷酸缓冲液进行洗涤，然后离心，反复洗涤2
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5次，得洁净干酪乳杆菌菌体；所述磷酸缓冲液的摩尔浓度为0.01
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0.05mol/L，pH 为6.5
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7.5；E、将步骤D所得洁净干酪乳杆菌菌体与磷酸缓冲液按质量比1:1混合后，超声处理20
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40min，得到破壁菌体混合物；将所述破壁菌体混合物进行离心处理，得上清液，即为干酪乳杆菌LC
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12发酵溶胞产物。
[0009]所述干酪乳杆菌LC
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12发酵溶胞产物具有皮肤抗炎功效的应用。
[0010]所述干酪乳杆菌LC
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12发酵溶胞产物作为皮肤抗炎活性成分在化妆品中的应用，添加量为质量百分比0.078
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5%。
[0011]所述干酪乳杆菌LC
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12发酵溶胞产物作为皮肤抗炎活性成分在化妆品中的应用，添加量为质量百分比0.2
‑
5%。
[0012]所述干酪乳杆菌LC
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12发酵溶胞产物作为皮肤抗炎活性成分在化妆品中的应用，添加量为质量百分比2.5%。
[0013]实施例1制备的干酪乳杆菌LC12发酵产物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种干酪乳杆菌LC
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12发酵溶胞产物的制备方法，其特征在于采用以下步骤：A、将干酪乳杆菌LC
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12接种到MRS培养基中进行培养，培养条件为：30
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42℃，80
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180 rpm/min转速摇床，培养20
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80小时，得到种子液；所述MRS培养基由以下原料组分组成：酪蛋白酶消化物10.0g、柠檬酸三铵2.0g、牛肉膏粉10.0g、硫酸镁(MgSO4
·
7H2O)0.2g、酵母膏粉4.0g、硫酸锰(MnSO4 ·
4H2O) 0.05g、乙酸钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g、葡萄糖20.0g、吐温80 1.08g；所述MRS培养基的pH值为5.5
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5.9；所述干酪乳杆菌LC
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12的保藏号为：CGMCCNO .21372，保藏单位为中国普通微生物菌种保藏管理中心； B、将步骤A所得种子液接种到MRS培养基中，在30
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42℃环境，80
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180 rpm/min转速下进行摇床扩培，得发酵液；C、将步骤B所得发酵液在3500
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8000rpm转速，4℃环境下离心处理20min，过滤得干酪乳杆菌菌体；D、将步骤C所得干酪乳杆菌菌体用磷酸缓冲液进行洗涤，然后离心，反复洗涤2
‑
5次，得洁净干...

【专利技术属性】
技术研发人员：李响，范梦琦，冯喆，魏少敏，
申请(专利权)人：珀莱雅化妆品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：