人源化亲和力成熟的抗FcRn抗体制造技术

本发明专利技术涉及人源化亲和力成熟的抗FcRn抗体。本文提供可用于结合至FcRn并阻断FcRn与IgG Fc的结合的重组抗体及其抗原结合部分。FcRn结合蛋白可用于治疗多种病症，包括自体免疫病症。疫病症。疫病症。

【技术实现步骤摘要】
人源化亲和力成熟的抗FcRn抗体
[0001]本申请为分案申请，原申请的申请日为2016年5月12日，申请号为201680040516.6(PCT/US2016/032168)，专利技术名称为“人源化亲和力成熟的抗FcRn抗体”。
[0002]本申请要求2015年5月12日提交的美国申请号62/160,423和2015年9月11日提交的美国申请号62/217,490的优先权，所述美国申请两者均整体并入本文。
专利

[0003]本专利技术涉及结合至FcRn的抗体及其抗原结合部分和它们用于调节或抑制FcRn与抗体Fc区的相互作用的用途。所述抗体可用作用于治疗自体免疫和其它病症的治疗剂。
[0004]序列表
[0005]本申请含有已通过EFS网以ASCII格式提交，并且据此以引用的方式整体并入本文的序列表。所述序列表于2015年8月7日创建，名为Sequence Listing.txt，并且大小是87,246字节。
[0006]专利技术背景
[0007]新生儿Fc受体(FcRn)是IgG的一种细胞内运输整合膜Fc受体。FcRn最初被鉴定为在新生儿生命中起作用的受体。它首先以在12kDa蛋白质与40
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50kDa蛋白质之间的异二聚体形式从啮齿动物肠道分离(Rodewald和Kraehenbuhl 1984,J.Cell.Biol.99(1Pt2):159s
‑
154s；Simister和Rees,1985,Eur.J.Immunol.15:733
‑<br/>738)，并且在1989年被克隆(Simister和Mostov,1989,Nature 337:184
‑
187)。对FcRn的克隆和随后结晶揭示它具有与12kDaβ2微球蛋白轻链非共价缔合的约50kDa I类主要组织相容性复合物(MHC)样重链(Raghavan等,1993,Biochemistry 32:8654
‑
8660；Huber等,1993,J.Mol.Biol.230:1077
‑
1083)。尽管最初被认定与胎儿和新生儿生命关联，但当今已知FcRn继续在整个成人生命中起作用。FcRn主要驻留在早期酸性内体中，在其中它以pH依赖性方式结合至IgG的Fc区，其中在pH6.5下具有微摩尔至纳摩尔级亲和力，而在生理pH下FcRn与Fc的结合可忽略。在大多数细胞中，大部分FcRn存在于内体中，并且FcRn与它的IgG Fc配体之间的相互作用发生在那个酸性环境内。在诸如造血细胞的一些细胞中，除细胞内表达之外，也可在细胞表面上检测到显著水平的FcRn(Zhu等,2001,J.Immunol.166:3266
‑
3276)。在这个情况下，当细胞外环境呈酸性时，如在赘生性或感染性病状的情况下，有可能的是FcRn可在这些细胞类型的细胞表面上结合至IgG。FcRn通过以下方式来调控血清IgG浓度：结合至经胞吞单体IgG并保护所述经胞吞单体IgG免遭在溶酶体区室中的降解，以及将IgG转运至细胞表面以在中性细胞外pH下释放。通过这个机理，FcRn导致IgG的血清半寿期较长，因为未由FcRn结合的IgG进入溶酶体途径，并且被降解。
[0008]在生命的第一阶段期间，FcRn在出生之前和之后通过介导IgG穿过母体胎盘或新生儿肠壁进行转移来对后代赋予被动免疫性。FcRn继续在整个成人生命中起作用，并且在各种组织例如肺和肝的上皮、血管内皮中，以及在单核细胞、巨噬细胞和树突细胞中表达。
[0009]FcRn缺陷小鼠对由病原性IgG自体抗体引起的自体免疫疾病更具抗性，因为它们不能维持高浓度的病原性血清IgG(Christianson等,1996,J.Immunol.156:4932
‑
4939；
Ghetie等,1996,Eur.J.Immunol.26:690
‑
696；Israel等,1996,Immunol.89:573
‑
578)。发现在鼠关节炎模型中施用经工程化以具有以较高亲和力结合FcRn的经修饰Fc区的抗体使疾病改善(Patel等,2011,J.Immunol.187:1015
‑
1022)。在许多自体免疫疾病中高剂量施用IgG具有可至少部分地由于以下原因而加以解释的缓和作用：使FcRn介导的对IgG的保护作用饱和，从而缩短病原性IgG的半寿期(Jin和Balthasar,2005,Hum.Immunol.66:403
‑
410；Akilesh等,2004,J.Clin.Invest.113:1328
‑
1333；Li等,2005,J.Clin.Invest.115:3440
‑
3450)。因此，特异性阻断FcRn
‑
IgG相互作用可用于促进病原性IgG抗体的降解，例如以治疗IgG介导的自体免疫疾病以及以在施用之后从血清清除治疗性抗体。举例来说，在大鼠实验诱发性自体免疫重症肌无力模型中，用FcRn重链特异性单克隆抗体治疗导致血清IgG浓度降低和疾病的严重性减轻(Liu等,2007,J.Immunol.178:5390
‑
5398)。
[0010]造血细胞中不存在FcRn与含有IgG的免疫复合物更快速从血流清除相关联(Qiao等,2008,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 105:9337
–
9342)。这指示特异性阻断FcRn
‑
IgG相互作用也将促进含有IgG的免疫复合物从循环清除。
[0011]FcRn通过穿过极化细胞的胞吞转运来调控IgG和任何结合运载物在身体的不同区室之间移动。这个过程例如在胃肠道中在粘膜保护免遭感染方面起重要作用。FcRn穿过肠的上皮细胞屏障转运IgG，并且进入管腔中。在IgG结合管腔中的抗原之后，IgG/抗原复合物由FcRn穿过屏障转运回固有层中，从而允许由树突细胞加工IgG/抗原复合物以及向区域性淋巴结中的CD4
+
T细胞呈递抗原。
[0012]FcRn也在II类MHC抗原呈递和I类MHC交叉呈递IgG复合抗原中起关键作用。当抗原以含有IgG的免疫复合物(IC)形式呈递时，呈CD8
‑
CD11b
+
CD11c
+
的树突细胞(炎症性树突细胞)以高度依赖于FcRn表达的途径在低抗原剂量下显示显著交叉呈递。这个途径涉及IC通过Fcγ受体内化至酸性内体中。随后在抗原呈递细胞(APC)内由FcRn对IC的结合引发特定机理，所述特定机理导致携带抗原的IC运输至抗原被加工成可与装载于MHC上相容的肽表位所处的区室中(Baker等,2011,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 108:9927
‑
9932；Christianson等,2012,mAbs第4卷,第208页,引言)。因此，DC中的FcRn使MHC I本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种包含重链可变区和轻链可变区的结合至FcRn的抗体或其抗原结合片段，其中所述重链可变区和和所述轻链可变区各自包含CDR1、CDR2和CDR3；并且其中：所述重链的CDR1序列为SEQ ID NO:2；以及所述重链的CDR2序列为SEQ ID NO:4；以及所述重链的CDR3序列为SEQ ID NO:55；和所述轻链的CDR1序列为SEQ ID NO:6；以及所述轻链的CDR2序列为SEQ ID NO:8；以及所述轻链的CDR3序列为SEQ ID NO:10。2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段具有同种型IgG4。3.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其在所述重链中含有S241P修饰。4.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其在每一个所述重链中缺乏C末端赖氨酸。5.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是scFv、Fv、Fab
’
、Fab、F(ab
’<...

【专利技术属性】
技术研发人员：LJ布伦贝格，RS布伦贝格，SD琼斯，D鲁佩尼安，RGE霍尔加特，TD琼斯，AR赫恩，
申请(专利权)人：SYNT免疫公司，
类型：发明
国别省市：