一种兼具抗氧化和降血压作用的活性肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种兼具抗氧化和降血压作用的活性肽及其应用，属于生物技术领域。本发明专利技术活性肽的氨基酸序列为GHVAA。本发明专利技术对GHVAA进行化学合成与活性评价，表现出良好的抗氧化活性与降血压活性。通过分子对接探究肽的抗氧化机制，我们发现GHVAA均能与两种受体蛋白进行有效对接，且它与Keap1蛋白的结合效果比CD38蛋白更加明显。本发明专利技术活性肽是兼具抗氧化和降血压功能性食品配料或药物的理想原料来源，具有良好的应用前景。具有良好的应用前景。具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种兼具抗氧化和降血压作用的活性肽及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种兼具抗氧化和降血压作用的活性肽及其应用。

技术介绍

[0002]自由基是机体新陈代谢中产生的具有高度氧化活性的中间产物。它们的共同特点是都含有不成对的电子，这些电子会使活性氧自由基(ROS)产生不稳定性。当机体处于正常的生理状态时，适量自由基能够参与细胞内信号级联，抵御病原体的入侵。然而，过量的自由基不仅会产生毒害作用，还会导致细胞氧化应激，增加人类患糖尿病、心血管疾病、癌症的风险。通过口服抗氧化剂来清除机体内过剩的自由基是目前广泛使用的一种方法。抗氧化剂可以通过氢原子转移、电子转移或螯合金属离子来灭活自由基，从而防止或终止自由基链反应以达到抗氧化的目的。目前的研究表明，BHT、BHA等人工合成的抗氧化剂存在一定程度的食品安全问题，可对人体器官造成损害。因此，安全性高、容易获得且具有良好抗氧化活性的食源性抗氧化剂已成为当前的研究热点。有研究者利用花粉提取抗氧化肽，经分离纯化后得到具有良好的抗氧化活性的肽；也有人从鲣鱼骨胶原蛋白中鉴定出的抗氧化肽。
[0003]高血压是一种常见的慢性疾病，以血管舒张不足为特征，是引起脑血管和心血管疾病的主要因素。高血压目前已成为影响全球死亡率的主要因素，有超过20％的成年人患有高血压。人体的血压是由肾素
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血管紧张素系统(RAS)调节的，血管紧张素转换酶(ACE)是其中的关键因素。ACE能够将血管紧张素I转化为血管紧张素II，引起血管收缩，导致血压升高。因此，抑制ACE活性是降低血压的有效途径，ACE抑制剂也成为当下应用最广泛的降血压药物。此外，调节血压还可以通过内皮型一氧化氮合酶产生一氧化氮，维持正常血压水平。然而，过量的活性氧(ROS)可导致氧化应激、一氧化氮生物利用度降低、血管内皮损伤，最终导致高血压。目前已有研究表明，化学合成的降血压药物有许多副作用，它们不仅降低了患者的耐受性，而且增加了医疗成本。由于食源性肽副作用少且容易获得，还具有不俗于化学合成药物的降血压活性，因此它们成为降血压药物的理想替代品或补充物。
[0004]近年来，许多研究者从不同食物来源的蛋白质中提取具有抗氧化或降血压活性的多肽，并且发现一些抗氧化活性强的肽段同时也具有良好的降血压活性。如从小麦胚芽蛋白的KELPPSDADW和SGGSYADELVSTAK，从斜生栅藻提取出的WYGPDRPKFL，从副渔获物提取出来的NGVAA以及从郫县豆瓣酱中提取出来的RGLSK和TPCPPQ。

技术实现思路

[0005]为解决相关问题，本专利技术的首要目的在于提供一种兼具抗氧化和降血压作用的活性肽。
[0006]本专利技术的另一目的在于提供上述兼具抗氧化和降血压作用的活性肽的制备方法。
[0007]本专利技术的再一目的在于提供上述兼具抗氧化和降血压作用的活性肽的应用。
[0008]为了实现上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0009]一种兼具抗氧化和降血压作用的活性肽，其氨基酸序列为GHVAA(Gly
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His
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Val
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Ala
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Ala)
[0010]所述的活性肽的制备方法，包括如下步骤：
[0011]步骤1：对陈酿5年广东糯米酒进行超滤，得到广东糯米酒<3KDa组分；
[0012]步骤2：利用制备型RT
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HPLC系统和C18自组装柱对广东糯米酒<3KDa组分进行多级逐级分离纯化后，利用HPLC
‑
MS/MS进一步鉴定分析，即得到所述活性肽。
[0013]进一步地，步骤2中所述的分离纯化中，流动相为：去离子水和0.1％三氟乙酸组成的溶剂A，甲醇和0.1％三氟乙酸组成的溶剂B；第一次分离纯化时，样品以10mL/min的流速洗脱85min，洗脱条件为：6
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15％溶剂B洗脱20min，15
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25％溶剂B洗脱20min，25
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50％溶剂B洗脱20min，50
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90％溶剂B洗脱5min，90％溶剂B10min，90
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6％溶剂B10min；进一步分离纯化时，样品以10mL/min的流速洗脱65min，洗脱条件为：溶剂B 6
‑
25％洗脱40min，溶剂B 25
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50％洗脱10min，50
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95％的溶剂B保持10分钟，95
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6％的溶剂B保持5min。
[0014]所述的活性肽在制备抗氧化剂、ACE抑制剂、降血压功能性食品配料和/或降血压药物中的应用。
[0015]进一步地，在所述的应用中，所述的抗氧化剂、ACE抑制剂、降血压功能性食品配料和/或降血压药物是以所述的活性肽作为活性成分，可添加食品上或药物学上可接受的载体或辅料。
[0016]一种抗氧化剂，包含所述的活性肽作为活性成分。
[0017]进一步地，所述的抗氧化剂中还包含药物学上可接受的载体或辅料。
[0018]一种ACE抑制剂，包含所述的活性肽作为活性成分。
[0019]进一步地，所述的ACE抑制剂中还包含药物学上可接受的载体或辅料。
[0020]一种降血压功能性食品配料，包含所述的活性肽作为活性成分。
[0021]进一步地，所述的降血压功能性食品配料中还包含食品上可接受的载体或辅料。
[0022]一种降血压药物，包含所述的活性肽作为活性成分。
[0023]进一步地，所述的降血压药物中还包含药物学上可接受的载体或辅料。
[0024]本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0025]本专利技术前期在分析不同时间段广东糯米酒中肽含量变化的基础上，从广东糯米酒中分离出具有抗氧化和降血压活性的多肽，并对多肽的组成和氨基酸序列进行了鉴定，同时对其细胞抗氧化活性和分子机制进行了研究。结果表明，陈酿5年广东糯米酒超滤液的小肽含量最高(3.62mg/mL)。经超滤和两次反相高效液相色谱分离得到具有良好抗氧化和降血压活性的F2
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2组分，其对DPPH和ABTS的EC50值分别为2.39mg/mL和3.75mg/mL，ACE抑制率的IC50值为2.91mg/mL。通过LC
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MS/MS鉴定并筛选出1个具有潜在抗氧化和降血压活性的肽段GHVAA(453.2336Da)。
[0026]本专利技术对GHVAA进行化学合成与活性评价，均表现出良好的抗氧化和降血压活性。通过分子对接探究肽的抗氧化机制，我们发现GHVAA均能与两种受体蛋白进行有效对接，且它们与Keap1蛋白的结合效果比CD38蛋白更加明显。上述实验结果表明，GHVAA可成为兼具抗氧化和降血压功能性食品配料或药物的理想原料来源。
附图说明
[0027]图1为不同时间段广东糯米酒中多肽含量的测定结果图；
[002本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种兼具抗氧化和降血压作用的活性肽，其特征在于：其氨基酸序列为Gly
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His
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Val
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Ala
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Ala。2.权利要求1中所述的活性肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：步骤1：对陈酿5年广东糯米酒进行超滤，得到广东糯米酒<3KDa组分；步骤2：利用制备型RT
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HPLC系统和C18自组装柱对广东糯米酒<3KDa进行多级逐级分离纯化后，利用HPLC
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MS/MS进一步鉴定分析，即得到所述活性肽。3.根据权利要求2所述的活性肽的制备方法，其特征在于：步骤2中所述的分离纯化中，流动相为：去离子水和0.1％三氟乙酸组成的溶剂A，甲醇和0.1％三氟乙酸组成的溶剂B。4.根据权利要求3所述的活性肽的制备方法，其特征在于：第一次分离纯化时，样品以10mL/min的流速洗脱85min，洗脱条件为：6
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15％溶剂B洗脱20min，15
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25％溶剂B洗脱20min，25
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50％溶剂B洗脱20min，50...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗建银，郭俊斌，曹庸，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：