一种芬太尼类药物头发标准物质的制备方法及应用技术

本发明专利技术属于分析化学技术领域，尤其涉及一种头发样本中9种芬太尼类药物标准物质的制备方法及应用，经采集成人头发样本、洗涤干燥、浸泡、清洗、干燥和粉碎成深褐色粉末等步骤。本发明专利技术中标准物质满足法医和临床实验室对芬太尼类药物标准物质的需求，制备方法简单，定值方法灵敏度高、准确度好和特异性强，可作为毛发中芬太尼类药物基体标准物质的定值方法，用于标准物质的研制，应用于法医滥用药物检测和实验室质量控制。验室质量控制。验室质量控制。

A preparation method and application of fentanyl hair reference material

【技术实现步骤摘要】
一种芬太尼类药物头发标准物质的制备方法及应用


[0001]本专利技术属于分析化学
，尤其涉及一种头发样本中9种芬太尼类药物标准物质的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]芬太尼作为麻醉辅助用药，因其具有起效快，持续时间短，镇痛作用强等特点，自上个世纪60年代以来，被广泛地应用于外科手术中。作为一种阿片类药物，芬太尼可以激活人体内的阿片受体，具有兴奋和刺激作用，有较强的成瘾性和耐受性。正是由于其具有类似海洛因的作用，使作为药品的芬太尼却在一些国家被用于吸毒，芬太尼滥用现象也随之出现。芬太尼的滥用不仅会对人体造成伤害，甚至会导致死亡，成人致死剂量仅为几毫克。
[0003]生物检测中，头发作为一种非常规的生物检材，具有采集方便，容易保存，不易造假，检测窗口长和无损非侵入性等特点。与血液和尿液检测相比，头发检测的主要优势在于检测窗口更宽，根据所分析的毛干的长度，检测窗口为几周至几个月，长期的吸毒史可以通过头发分析来追溯。与其他生物样品相比，药物进入头发后不会被人体内的化学物质所分解，所沉积的药物非常稳定，可以在更长的时间后进行检测。一般以毛发样品中吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮的检测含量阈值为参考(0.2ng
·
mg
‑1)。
[0004]头发样本中芬太尼类药物及其代谢物存在着含量低，药物提取困难，头发成分复杂等特点，常用检测方法主要有GC
‑
MS/MS和LC
‑
MS/MS等。
[0005]但又存在国际标准物质数据库(COMAR)和国家标准物质资源共享平台都未找到芬太尼类药物标准物质的登记，缺少用于检测的标准物质，导致检测结果的可靠性、准确性和溯源性得不到保障的技术问题。

技术实现思路

[0006]为了解决以上技术问题，本专利技术提供一种头发样本中芬太尼类药物标准物质的制备方法及应用，满足法医和临床实验室对芬太尼类药物标准物质的需求，制备方法简单，定值方法灵敏度高、准确度好和特异性强，可作为毛发中芬太尼类药物基体标准物质的定值方法，用于标准物质的研制，应用于法医滥用药物检测和实验室质量控制。
[0007]解决以上技术问题的一种头发样本中芬太尼类药物标准物质的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
[0008](1)采集未有违禁药物使用史的成人头发样本，将采集的头发样本使用纯水、色谱级甲醇各洗涤3次，室温下干燥后剪切成2cm小段。
[0009](2)浸泡溶液制备：称量乙酰芬太尼，异丁酰芬太尼，对氟芬太尼，奥芬太尼，硫代芬太尼，4
‑
氟丁酰芬太尼，四氢呋喃芬太尼，芬太尼和去甲基芬太尼9种芬太尼类药物置于容器中，加入蒸馏水和二甲基亚砜溶液，超声使之混合均匀，为药物
‑
二甲基亚砜溶液。
[0010](3)将空白的人体头发样本放入浸泡溶液中，浸泡一段时间后，将头发样本取出，使用足够体积的甲醇充分清洗。
[0011](4)洗涤后的头发样本在真空干燥箱中干燥，干燥温度23
‑
26℃，干燥时间45
‑
52h；干燥后的头发样本使用球磨机研磨粉碎成深褐色粉末，粒径<5mm。
[0012](5)粉碎后的头发样本在真空干燥箱中干燥23
‑
25h，经混和仪混合23
‑
25h，混匀后装瓶；
[0013](6)制备好的芬太尼类药物头发标准物质置于20
‑
30℃下避光保存。
[0014]所述步骤(2)中采用GC
‑
MS/MS对乙酰芬太尼，异丁酰芬太尼，对氟芬太尼，奥芬太尼，硫代芬太尼，4
‑
氟丁酰芬太尼，四氢呋喃芬太尼，芬太尼和去甲基芬太尼这9种芬太尼类药物纯品原料进行定性分析，采用HPLC
‑
DAD法对9种芬太尼类药物纯品原料进行纯度确定。
[0015]定性分析：确定原料为目标化合物；纯度分析：对原料进行筛选，避免因原料纯度过低而导致无法进行后续的定值分析；纯度分析的结果会影响制备头发标准物质中相关药物的定值结果。定性分析和纯度分析在制备标准物质时进行。可在制备标准物质前，先对原料进行定性分析和纯度检验。
[0016]本专利技术中浸泡溶液中，乙酰芬太尼，异丁酰芬太尼，对氟芬太尼，奥芬太尼，硫代芬太尼，4
‑
氟丁酰芬太尼，四氢呋喃芬太尼和芬太尼的每种浓度不低于2mg/L，去甲芬太尼的浓度不低于1mg/L。
[0017]所述步骤(2)中芬太尼类药物、水和二甲基亚砜溶液的用量质量比为0.3：5：5。
[0018]所述水为蒸馏水。
[0019]所述二甲基亚砜溶液中含0.02mol/L盐酸。
[0020]所述步骤(3)中头发标准物质制备浸泡时间的选择：在头发标准物质制备过程中采用由密到疏的原则，在6个不同的时间点分别取样，使用LC
‑
MS/MS进行分析。
[0021]所述步骤(3)中当头发中的药物浓度达到最大值时，取出头发样本，使用足够体积的甲醇充分清洗，以去除外部污染，以最后一次清洗液检测结果呈阴性为准。
[0022]所述步骤(3)中浸泡一段时间为7
‑
25天，优化方案中浸泡时间为24天。
[0023]本专利技术中采用单因素变量法考察不同提取方式、不同提取溶剂、不同提取时间、不同的液料比和不同的盐酸酸度对药物提取量的影响，初步确定合理的实验各因素与水平。
[0024]本专利技术中一种头发样本中芬太尼类药物标准物质的应用，步骤如下：
[0025](1)提取头发标准物质中9种芬太尼类物质；
[0026](2)建立二次多项回归方程模型，确立头发样品最佳前处理条件；二次多项回归方程为：药物浓度(ng
·
mg
‑1)＝6.56
‑
0.08a+0.11b+0.15c
‑
0.02d
‑
0.013ab
‑
0.045ac
‑
0.076bc+0.042bd
‑
0.031cd
‑
0.33a2‑
0.08b2‑
0.088c2‑
0.096d2，其中提取温度(a)、提取时间(b)、液料比(c)和甲醇/盐酸(d)；建立回归方程式是在样品前处理的步骤中。
[0027]响应面分析法是利用合理的实验设计方法结合实验得到一定的数据，采用多元二次回归方程来拟合因素与响应值之间的函数关系，通过对回归方程的分析来寻求最优工艺参数，解决多变量问题的一种统计方法。回归方程模型的建立是为了寻找头发样本的最佳前处理条件。
[0028](3)提取液在40℃下氮气蒸发至干，残留物用甲醇复溶，15000xg下离心5min；
[0029]氮吹主要是起到将样品快速富集浓缩的作用。另一方面，药物提取液中含有盐酸，对质谱不友好。氮气吹干后，使用甲醇复溶，有利于保护质谱系统。氮吹本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种头发样本中芬太尼类药物标准物质的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)头发样本用纯水、甲醇分别洗涤，室温下干燥后剪切成小段；(2)浸泡溶液制备：称量乙酰芬太尼，异丁酰芬太尼，对氟芬太尼，奥芬太尼，硫代芬太尼，4
‑
氟丁酰芬太尼，四氢呋喃芬太尼，芬太尼和去甲基芬太尼9种芬太尼类药物置于容器中，加入蒸馏水和二甲基亚砜溶液，超声使之混合均匀；(3)将步骤(1)中头发样本放入浸泡溶液中，浸泡一段时间后将头发样本取出，用甲醇清洗；(4)洗涤后的头发样本在真空干燥箱中干燥，干燥温度23
‑
26℃，干燥时间45
‑
52h，干燥后研磨粉碎成深褐色粉末，粒径<5mm；(5)粉碎后的头发样本在真空干燥箱中干燥23
‑
25h，经混和仪混合23
‑
25h，混匀后装瓶；(6)制备好的芬太尼类药物头发标准物质置于20
‑
30℃下避光保存即可。2.根据权利要求1所述的一种头发样本中芬太尼类药物标准物质的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中采用GC
‑
MS/MS法对乙酰芬太尼，异丁酰芬太尼，对氟芬太尼，奥芬太尼，硫代芬太尼，4
‑
氟丁酰芬太尼，四氢呋喃芬太尼，芬太尼和去甲基芬太尼这9种芬太尼类药物纯品原料进行定性分析，采用HPLC
‑
DAD法对9种芬太尼类药物纯品原料进行纯度确定。3.根据权利要求1所述的一种头发样本中芬太尼类药物标准物质的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中芬太尼类药物、水和二甲基亚砜溶液的用量质量比为0.3：5：5。4.根据权利要求3所述的一种头发样本中芬太尼类药物标准物质的制备方法，其特征在于：所述水为蒸馏水。5.根据权利要求3所述的一种头发样本中芬太尼类药物标准物质的制备方法，其特征在于：所述二甲基亚砜溶液中含0.02mol/L盐酸。6.根据权利要求1所述的一种头发样本中芬太尼类药物标准物质的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中头发标准物质制备浸泡时间的选择：在头发标准物质制备过程中采用由密到疏的原则，在6个不同的时间点分别取样，使用LC
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：苏福海，韦棋，李红梅，
申请(专利权)人：中国计量科学研究院，
类型：发明
国别省市：