一种热丁香链霉菌次级代谢产物高效发酵制备工艺制造技术

本发明专利技术涉及一种热丁香链霉菌次级代谢产物高效发酵制备工艺，该工艺包括以下步骤：

【技术实现步骤摘要】
一种热丁香链霉菌次级代谢产物高效发酵制备工艺


[0001]本专利技术涉及微生物发酵与天然产物提取分离
，尤其涉及一种热丁香链霉菌次级代谢产物（streptochlorin）高效发酵制备工艺。

技术介绍

[0002]链霉菌是活性天然产物的重要产生菌，其次级代谢产物丰富多样，streptochlorin是一种吲哚类小分子，具有抗G
+
和G
‑
菌活性、抗真菌活性、抗肿瘤活性。通过TRIF依赖的信号通路起到抗炎作用，对胆管癌和白血病细胞株 U937 cells具有良好的抑制作用，并具有显著的抗癌细胞迁移活性。
[0003]中国专利CN201510942696.4公开了一种海洋链霉菌及其次级代谢产物streptochlorin的发酵制备工艺，该方法利用高度逆流色谱法对海洋链霉菌的发酵液进行分离纯化，得到streptochlorin的产量为3.37mg/L，不但发酵产量少，而且发酵制备工艺较复杂。目前，由于streptochlorin的市场价格昂贵，化学合成过程复杂，很大程度地限制了streptochlor本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种热丁香链霉菌次级代谢产物高效发酵制备工艺，包括以下步骤：
⑴
活化：将存于
‑
80℃的热丁香链霉菌SPC6
‑
50
‑
1（Streptomyces linzensis SPC6
‑
50
‑
1）划线接种于MS平板培养基上，30℃培养36h，即得单菌落孢子；
⑵
种子培养：挑取所述单菌落孢子至装液量为20%的LB液体培养基，于30℃且220rpm的条件下过夜培养，直至OD=0.5时作为种子菌；
⑶
发酵培养：将所述种子菌与蒸馏水混合，制得质量浓度为1%的种子培养液；将所述种子培养液接种至装瓶量为50%的液体发酵培养基，于30℃且220rpm的条件下发酵8天，得到发酵液；
⑷
发酵液处理：在所述发酵液中加入等体积的乙酸乙酯，室温萃取三次，旋干，得到萃取物；
⑸
streptochlorin制备：a所述萃取物过ODS柱，分别用质量浓度为20%、50%、80%、100%的甲醇洗脱，每个组分洗脱10个柱体积；b将80%甲醇洗脱后的液体合并，悬蒸冻干，用质量浓度为100%的甲醇复溶，得到半制备样品；c将等体积比的质量浓度为100%的甲醇和含1
‰
三氟乙酸的超纯水作为HPLC的两相体系，该两相体系以1~2m...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪金秀，陈拓，刘光琇，张昺林，陈熙明，
申请(专利权)人：中国科学院西北生态环境资源研究院，
类型：发明
国别省市：