【技术实现步骤摘要】
一种高特异核酸多重可视化检测的方法
[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种高特异核酸多重可视化检测的方法。
技术介绍
[0002]核酸检测在疾病诊断、治疗监测及预后评估中显示出重要价值。随着越来越多的核酸标志物被发掘，对核酸检测技术也提出了更高的要求，其中多靶标并行检测与低成本现场检测是核酸检测技术的发展趋势。其中，基于侧流层析试纸条的核酸检测因简便快速成本低而具有很好的应用前景。然而，现有的核酸检测试纸条大都基于抗原抗体捕获原理，即在核酸上标记抗原分子，利用试纸条上固定的抗体来捕获抗原标记的核酸来进行检测，因可标记的抗原种类有限，限制了多重检测的靶标数目。尽管采用在试纸条上固定核酸探针来捕获待测核酸靶标的方法突破了基于免疫层析试纸条的检测靶标数目限制，但需要针对不同待测靶标核酸序列制备固定有不同的捕获探针的试纸条，通用性不够好，并且仅采用核酸杂交原理来识别捕获待测靶标，特异性不够高，难以实现对单碱基差异靶标的区分检测，因而造成核酸检测试纸条难以用于基因分型或基因突变检测中。因此，需要建立一种高特异性的基于侧流...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种高特异核酸多重可视化检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：寡核苷酸探针与待测靶标杂交后，核酸酶特异性切割所述探针，释放序列不同的寡核苷酸片段，所述寡核苷酸片段进而与不同序列发夹探针杂交，引发核酸酶切割发夹探针产生序列标签寡核苷酸片段，所述序列标签寡核苷酸片段可与侧流层析试纸条上固定的捕获探针杂交而被捕获，捕获后的序列标签寡核苷酸片段可以与显色剂作用而在试纸条上显色，不同待测靶标对应不同的寡核苷酸探针产生不同的序列标签寡核苷酸片段，在试纸条上不同位置固定的捕获探针捕获而显色，通过观测试纸条上的显色位置从而判断待测靶标种类；所述核酸酶具有单碱基序列差异识别的特异性，因此可高特异性区分检测含有单个碱基序列差异的待测核酸靶标。2.根据权利要求1所述的高特异核酸多重可视化检测方法，其特征在于，所述核酸酶包括核酸内切酶、核酸外切酶或切刻内切酶中的一种。3.根据权利要求2所述的高特异核酸多重可视化检测方法，其特征在于，所述核酸酶为flap核酸内切酶。4.根据权利要求1、2或3所述的高特异核酸多重可视化检测方法，其特征在于，所述的寡核苷酸探针包括上游探针和下游探针，所述上游探针的3
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端能够与下游探针和靶标形成的杂交双链之间形成3碱基重叠结构；所述的核酸酶能够特异性切割该3碱基重叠结构，使所述下游探针5
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端的核酸片段与下游探针分离释放序列不同的寡核苷酸片段；所述发夹探针的5
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