【技术实现步骤摘要】
一种评估肝脏衰老的方法
[0001]本专利技术属于医学
,具体涉及一种评估肝脏衰老的方法。
技术介绍
[0002]人口老龄化是全球现代化过程中必经的发展趋势。我国同样正在快速进入老龄化社会,预计到2050年,我国老龄人口数量将达到4.87亿,占总人口的34.9%,届时,每三个人中将有一个老年人。目前,已有的研究发现多种衰老标志物,如端粒、DNA甲基化、NAD+、α酮戊二酸等等,这些作为生理衰老的指标。同时,多个器官衰老的标志物也有报道。血清白蛋白是体检中反应肝脏功能的一个指标。对这些衰老标志物的深入研究将有利于准确评估生理衰老和预测老年疾病风险。由此,保障老年人的生理健康,从而更好地保障老年人的生活质量的需要比以往更加强烈。建立科学的衰老评估体系是其中重要一环。然而,体检者通常对于自己的体检报告缺乏直观的认识,对于个体肝脏功能亚健康状态难以判断,且目前缺少科学评估肝功能衰老的方法等问题。因此,如何科学的评估肝脏衰老的方法成为了至关重要的问题。
技术实现思路
[0003]为解决上述技术问题,本专利技术提供 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种评估肝脏衰老的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、取外周血,采用溴甲酚绿比色法测定血清白蛋白含量;S2、另取外周血,加入高氯酸充分混匀裂解至其由红色变为棕色,随后离心10min,取上清,加入NAD+提取液,充分混匀,静置等待分层,取最上层液体作为样品;S3、取样品稀释液加入到样品中进行稀释,向96孔板中加入样品,分别向每个孔中加入反应液,避光孵育40min;S4、加入硫酸终止反应,上酶标仪,根据标准品获得的方程对样品进行计算,得出样品的NAD+浓度;S5、使用Magen试剂盒提取外周血中的基因组DNA,取基因组DNA,加入Hinf I、Rsa I、RNase A酶切,过夜,加入DNA loading buffer;用琼脂糖胶,TAE缓冲液,电泳12
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16h,溴酚蓝距胶孔15cm时停止电泳;S6、将步骤S4所得琼脂糖胶放置于干胶仪上,抽真空干胶1h,往干好的琼脂糖胶加入变性液反应,随后加入中和液反应,接着加入预杂交液反应,杂交过夜;S7、将步骤S5所得加入洗液Ⅰ,清洗15min,重复3次,随后加入洗液Ⅱ,清洗15min,重复2次,用保鲜膜包好,磷屏曝光3h,扫屏,处理数据,计算平均端粒长度;S8、采用统计软件作图,基于普通人群的端粒长度(T)、NAD+浓度(N)和血清白蛋白(A)三个指标的大数据统计进行比较,依据检测数值在统计图中的分布位置进行评分,分值范围0
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100分,将分值代入计算公式,以评估肝脏衰老指数(La),评估肝脏衰老指数计算公式为:La=0...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈汉森,吴琨,徐丽婉,罗瑞茵,
申请(专利权)人:永利国际再生医学科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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