一种新型的非核糖体多肽合成酶拆分表达方法技术

技术编号:33909640 阅读:37 留言:0更新日期:2022-06-25 19:15
本发明专利技术涉及生物技术领域,公开了一种非核糖体多肽合成酶拆分表达方法,是根据对NRPS结构域和三维结构的预测,在特殊拆分位点以T

【技术实现步骤摘要】
一种新型的非核糖体多肽合成酶拆分表达方法


[0001]本专利技术属于生物
,涉及一种新型的非核糖体多肽合成酶拆分表达技术。

技术介绍

[0002]非核糖体多肽类天然产物是现代药物创制的重要来源,如抗真菌药物棘白菌素、免疫抑制剂类药物环孢霉素等。然而,目前利用传统的筛选技术获得具有实用价值的新型非核糖体多肽的难度越来越大。随着高通量基因组测序技术、基因合成以及多基因装配等合成生物学技术的快速发展,为通过异源生物合成技术挖掘和生产有价值的非核糖体多肽提供了途径。
[0003]非核糖体多肽类化合物的核心骨架是由模块化的非核糖体多肽合成酶(nonribosomal peptide synthetase,NRPS)组装而成的。通常,NRPS是由多个模块构成的,每个模块包含三个核心功能结构域:腺苷化(adenylation,A)结构域、硫酯化(thiolation,T)结构域和缩合(condensation,C)结构域。此外,部分NRPS模块还会包含甲基化(methylation,MT)结构域、氧化(oxidation)结构域、杂环化(het本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种NRPS拆分单元,其序列为T
n
‑1‑
C
n

A
n

T
n
;其中,若为起始模块,则从起始密码子至T1为起始拆分单元;若为最后一个模块,则从前一个模块的T至终止密码子为终止拆分单元;若模块中含有甲基化结构域、杂环化结构域、异构化结构域等修饰结构域,则拆分单元中也添加相应修饰结构域;且拆分单元中结构域组成与相应模块中结构域组成一一对应;其中T为硫酯化结构域、A为腺苷化结构域、C为缩合结构域,n为NRPS中模块的序号。2.如权利要求1所述的NRPS拆分单元,其特征在于,其拆分的原始序列如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。3.如权利要求1的所述NRPS拆分单元,其特征在于,T
n
‑1‑
C
n

A
n

T
n
的N端起始于A
n

1sub
与T
n
‑1之间的linker区,C端终止于C n+1
的1~10氨基酸。4.如权利要求1的所述NRPS拆分单元,其特征在于,所述NRPS含有两个或多个模块。5.编码如权利要求1至4任一项所述的NRPS拆分单元的编码核苷酸序列,优选地,其原始核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。6.含有如权利要求5所述的编码核苷酸序列的重组菌,优选为真菌为酵母、...

【专利技术属性】
技术研发人员:徐玉泉岳群尹淼淼张礼文
申请(专利权)人:中国农业科学院生物技术研究所
类型:发明
国别省市:

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