一种羟甲基苯妥英相关杂质的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种羟甲基苯妥英相关杂质的检测方法，包括以下步骤：a)将待测样品与酸性溶剂混合，得到供试品溶液；b)将步骤a)得到的供试品溶液进行高效液相色谱检测，实现羟甲基苯妥英与其相关杂质的分离与测定；所述高效液相色谱检测的色谱柱为支持亲水相互作用色谱分离模式的色谱柱；所述高效液相色谱检测的流动相按体积百分比计，包括：弱洗脱剂60％～100％；洗脱调节剂40％～0％。与现有技术相比，本发明专利技术提供的检测方法采用优化的色谱条件，能将羟甲基苯妥英与其杂质苯妥英进行有效分离与快速测定，可被广泛应用于羟甲基苯妥英的质量控制以及磷苯妥英钠的体内药动学研究。量控制以及磷苯妥英钠的体内药动学研究。量控制以及磷苯妥英钠的体内药动学研究。

【技术实现步骤摘要】
一种羟甲基苯妥英相关杂质的检测方法


[0001]本专利技术涉及医药
，更具体地说，是涉及一种羟甲基苯妥英相关杂质的检测方法。

技术介绍

[0002]磷苯妥英钠，化学名为2,4
‑
咪唑啉二酮
‑
5,5
‑
二苯基
‑3‑
[(膦酰氧基)甲基]二钠盐，是由兰伯特公司开发的用于抗癫痫或心律失常的药物，在体内可转化为苯妥英钠而发挥作用。
[0003]羟甲基苯妥英钠是一种医药中间体，常出现在磷苯妥英钠原料药的制备工艺中。同时此化合物也属于磷苯妥英钠在人体内生物代谢的中间产物。
[0004]韩莹、黄淑云等在天津理工大学学报(第26卷，第2期，2010年)中报道了磷苯妥英钠的合成工艺，以苯妥英为起始原料，先制备了中间体羟甲基苯妥英，再经氯化、缩合、氢化、成盐制得磷苯妥英钠。这几种化合物的结构分别如下：
[0005][0006]从此工艺可知，苯妥英是羟甲基苯妥英合成过程中的工艺杂质。从目前公开的文献来看，没有测定羟甲基苯妥英中苯妥英的报道。羟甲基苯妥英与苯妥英的极性极为接近，在普通液相色谱体系中无法得到较好的分离。同时，在多种溶剂中，羟甲基苯妥英有逐渐转变成苯妥英的趋势，因此常规方法无法达到高效、准确检测苯妥英的要求。
[0007]羟甲基苯妥英中苯妥英杂质能否被高效、准确的分析检测，直接关系到羟甲基苯妥英的质量评价与工艺评价，也间接影响磷苯妥英钠的经济、安全、有效。对此工艺杂质进行有效分离测定，对提高工艺水平，提升药物经济价值与质量水平有着重大意义。
[0008]Valentino J.Stella在《Prodrugs:Challenges and Rewards(Part 2，2007年)》一书中提到体内磷苯妥英钠可在碱性、磷酸酶作用下转化为羟甲基苯妥英，进而自发转化为苯妥英。在药物的体内研究领域，一种能高效分离羟甲基苯妥英与苯妥英并定量检测的技术，也有较大的应用潜力。

技术实现思路

[0009]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种羟甲基苯妥英相关杂质的检测方法，本专利技术提供的检测方法可以测定磷苯妥英钠合成过程中，中间体羟甲基苯妥英的杂质苯妥英的含量，有利于筛选反应条件，控制中间产品的质量，从而解决磷苯妥英钠中间体工艺评估与质量控制问题。
[0010]本专利技术提供了一种羟甲基苯妥英相关杂质的检测方法，包括以下步骤：
[0011]a)将待测样品与酸性溶剂混合，得到供试品溶液；
[0012]b)将步骤a)得到的供试品溶液进行高效液相色谱检测，实现羟甲基苯妥英与其相关杂质的分离与测定；
[0013]所述高效液相色谱检测的色谱柱为支持亲水相互作用色谱分离模式的色谱柱；
[0014]所述高效液相色谱检测的流动相按体积百分比计，包括：
[0015]弱洗脱剂60％～100％；
[0016]洗脱调节剂40％～0％。
[0017]优选的，步骤a)中所述酸性溶剂由体积比为100：(0.001～10)的有机溶剂和酸性添加剂组成；所述酸性添加剂选自磷酸、甲酸、高氯酸、盐酸和三氟乙酸中的一种或多种。
[0018]优选的，所述色谱柱的填充剂为经修饰的化学基团键合硅胶，这些基团包括氨基型、酰胺型和两性离子型中的一种或多种。
[0019]优选的，所述色谱柱选自TSKgel Amide
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80、InfinityLab Poroshell 120HILIC
‑
Z、Acchrom XAmide、AdvanceBio、XBridge Amide或Venusil HILIC。
[0020]优选的，所述弱洗脱剂为乙腈和/或丙酮；所述洗脱调节剂为异丙醇、甲醇、乙醇和水中的一种或多种。
[0021]优选的，步骤b)中所述高效液相色谱检测的流动相流速为0.3ml/min～1.5ml/min。
[0022]优选的，步骤b)中所述高效液相色谱检测的柱温为20℃～50℃，进样量为1μl～100μl。
[0023]优选的，步骤b)中所述高效液相色谱检测的检测器包括紫外
‑
可见分光检测器、质谱检测器、蒸发光散射检测器、电雾式检测器、示差折光检测器、电化学检测器和荧光检测器中的一种或多种。
[0024]优选的，步骤b)中所述高效液相色谱检测的检测波长为190nm～250nm。
[0025]优选的，所述检测方法既可用于羟甲基苯妥英中苯妥英的测定，也可用于磷苯妥英钠生物代谢样本中羟甲基苯妥英、苯妥英的同时测定。
[0026]本专利技术提供了一种羟甲基苯妥英相关杂质的检测方法，包括以下步骤：a)将待测样品与酸性溶剂混合，得到供试品溶液；b)将步骤a)得到的供试品溶液进行高效液相色谱检测，实现羟甲基苯妥英与其相关杂质的分离与测定；所述高效液相色谱检测的色谱柱为支持亲水相互作用色谱分离模式的色谱柱；所述高效液相色谱检测的流动相按体积百分比计，包括：弱洗脱剂60％～100％；洗脱调节剂40％～0％。与现有技术相比，本专利技术提供的检测方法采用优化的色谱条件，能将羟甲基苯妥英与其杂质苯妥英进行有效分离与快速测定，可被广泛应用于羟甲基苯妥英的质量控制以及磷苯妥英钠的体内药动学研究。
附图说明
[0027]图1为实施例1中空白溶液的高效液相色谱图；
[0028]图2为实施例1中对照品的高效液相色谱图；
[0029]图3为实施例1中供试品的高效液相色谱图；
[0030]图4为实施例3中供试品的高效液相色谱图；
[0031]图5为实施例5中供试品的高效液相色谱图；
[0032]图6为实施例6中供试品的高效液相色谱图；
[0033]图7为实施例7中供试品的高效液相色谱图；
[0034]图8为实施例8中供试品的高效液相色谱图；
[0035]图9为实施例9中供试品的高效液相色谱图；
[0036]图10为实施例10中供试品的高效液相色谱图；
[0037]图11为实施例11中供试品的高效液相色谱图；
[0038]图12为实施例12中供试品的高效液相色谱图；
[0039]图13为实施例13中供试品的高效液相色谱图；
[0040]图14为实施例14中供试品的高效液相色谱图。
具体实施方式
[0041]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0042]本专利技术提供了一种羟甲基苯妥英相关杂质的检测方法，包括以下步骤：
[0043]a)将待测样品与酸性溶剂混合，得到供试品溶液；
[0044]b)将步骤a)得到的供试品溶液进行高效液相色谱检测，实现羟甲基苯妥英与其相关杂质的分离与测定；
[0045]所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种羟甲基苯妥英相关杂质的检测方法，包括以下步骤：a)将待测样品与酸性溶剂混合，得到供试品溶液；b)将步骤a)得到的供试品溶液进行高效液相色谱检测，实现羟甲基苯妥英与其相关杂质的分离与测定；所述高效液相色谱检测的色谱柱为支持亲水相互作用色谱分离模式的色谱柱；所述高效液相色谱检测的流动相按体积百分比计，包括：弱洗脱剂60％～100％；洗脱调节剂40％～0％。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤a)中所述酸性溶剂由体积比为100：(0.001～10)的有机溶剂和酸性添加剂组成；所述酸性添加剂选自磷酸、甲酸、高氯酸、盐酸和三氟乙酸中的一种或多种。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的填充剂为经修饰的化学基团键合硅胶，这些基团包括氨基型、酰胺型和两性离子型中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱选自TSKgel Amide
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80、InfinityLab Poroshell 120 HILIC
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Z、Acchrom XAmide、AdvanceBio、...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈皓，杨啟帆，邓海星，刘泽荣，陈功政，陈刚，
申请(专利权)人：四川中领创拓医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：