本发明专利技术所属IPC分类号C12N1/20，尤其是涉及酿酒酵母发酵液和包括酿酒酵母发酵液的护肤品。所述酿酒酵母发酵液由酿酒酵母形成的单菌落在YPD发酵培养基内进行深层发酵震荡培养。本发明专利技术中通过添加酿酒酵母发酵过滤液的方式避免直接加入活菌，保持产品品质稳定，达到同样的护肤效果，避免了大多数护肤品中年无法直接添加活的益生菌、并且益生菌数量难维持、产品品质难把控的缺陷。产品品质难把控的缺陷。
【技术实现步骤摘要】
酿酒酵母发酵液和包括酿酒酵母发酵液的护肤品
[0001]本专利技术所属IPC分类号C12N1/20，尤其是涉及酿酒酵母发酵液和包括酿酒酵母发酵液的护肤品。
技术介绍
[0002]皮肤是人体重要器官之一，而在皮肤上栖息着许多微生物种群，它们与宿主的皮肤构成皮肤的微生态系，与皮肤的健康和生理功能休戚相关。皮肤上的菌群分为常驻菌与暂驻菌，常驻菌包括葡萄球菌、棒状杆菌、丙酸杆菌等，是在健康皮肤上长期生活的菌群，是保护皮肤的屏障。常驻菌可以分泌抗菌肽防止病原菌感染，并分解角质细胞的碎屑和脂质，维持皮肤的酸性环境，保护皮肤菌群的多样性，维护皮肤健康；暂驻菌是由外界环境带来的微生物，包括金黄色葡萄球菌、溶血链球菌及肠球菌等，它们是引起皮肤炎症、感染的主要病原菌。
[0003]若护肤品通过添加益生元、益生菌等物质，或通过杀灭有害菌，恢复皮肤微生态平衡，改善皮肤状态，就可以称之为微生态护肤品。当在皮肤上使用含有酿酒酵母发酵液的护肤品时，通过发酵作用，会产生酵母多糖等物质，酵母葡聚糖能够供应多种细胞生长因子，加速真皮层胶原蛋白和弹力纤维蛋白的合成，除皱，使肌肤富有弹性。
[0004]专利CN107693431A利用活性益生菌在皮肤上杀灭和抑制有害菌的繁殖、增生，调整人体皮肤微生态平衡，使皮肤达到健康状态但是，大部分化妆品是油水配方，无法直接添加活的益生菌，并且益生菌数量难维持，产品品质难把控，所以益生菌很少被加入在护肤品中。
技术实现思路
[0005]为了解决上述技术问题，作为本专利技术的第一个方面，提供了酿酒酵母发酵液，所述酿酒酵母发酵液由酿酒酵母形成的分离菌株在YPD发酵培养基内进行深层发酵震荡培养。
[0006]酿酒酵母形成的分离菌株(单菌落)的分离方法包括以下步骤：将含有啤酒渣的无菌水经平板划线、培养、筛选得到菌落。
[0007]在本专利技术的一些实施方式中，使用无菌水将啤酒渣稀释1倍(按质量计)得到含有啤酒渣的无菌水，用接种环蘸取含有啤酒渣的无菌水在固体YPD培养基上分步划线后，进行培养(培养的条件为：30℃培养48h)、取平板上形态为乳白色光滑湿润的菌落，进行筛选出菌落为酿酒酵母的单菌落。
[0008]在本专利技术中，为了鉴别选出菌株是否为酿酒酵母的单菌落，对其进行核酸扩增、电泳检验、测序及BLAST比对分析。
[0009]在一些实施方式中，使用枪头蘸取1μL单菌落在10μL的无菌水中混匀得到单菌落水溶液，取2μL单菌落水溶液作为模板进行PCR聚合酶链式反应并进行核酸凝胶电泳检验，通过ITSrDNA扩增产物进行测序并利用测序结果，在NCBI网站中进行BLAST序列比对，准确确定发酵液内容菌种类型。
[0010]在一些实施方式中，PCR聚合酶链式反应时，扩增体系如下：Template DNA，1μL；
Forward primer，1μL；Reverse primer，1μL；dNTP，0.2μL；Buffer，5μL；Phanta，0.2μL；ddH2O，4μL，总计12.4μL。
[0011]在一些实施方式中，所述单菌落的GeneBankID分别为MW687625.1和MW837771.1。
[0012]在本专利技术的另一些实施方式中，还能够对筛选酿酒酵母的单菌落进行扩大培养和保存。
[0013]在一些实施方式中，扩大培养的步骤为：将单菌落水溶液加入到液体YPD培养基中进行扩大培养，培养条件为30℃，200rpm，培养48h。
[0014]在一些实施方式中，冻存的步骤为：将扩大培养得到的菌液与冻存液混合后将混合液置于
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20℃或者
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80℃保存，作为冻存菌种。
[0015]浑浊的菌液与冻存液的比例和冻存液的种类可以根据需要进行选择，在一些实施方式中，冻存液为体积浓度为50％的甘油，菌液与体积浓度为50％的甘油的体积比为1：1。
[0016]在一些实施方式中，按体积量为3～10％的接种量将酿酒酵母形成的单菌落接种于YPD发酵培养基内进行深层发酵震荡培养。
[0017]YPD发酵培养基的培养基成分为蛋白胨20.0g/L、酵母提取物10.0g/L、葡萄糖20.0g/L。
[0018]YPD发酵培养基的制备方法为简单混合。
[0019]在本专利技术中YPD发酵培养基培养制备完成后经过115℃持续高温湿热灭菌15min后，方可使用，并且本专利技术中的YPD发酵培养基为自然pH，无需额外调整。
[0020]在一些实施方式中，深层发酵震荡培养的条件为：30℃，200rpm，培养48h。
[0021]在另一些实施方式中，深层发酵震荡培养的条件为：28℃，200rpm，培养48h。
[0022]本专利技术的第二个方面提供了一种包括酿酒酵母发酵液的护肤品，所述护肤品中包括上述酿酒酵母发酵液均质、过滤灭菌后的酿酒酵母发酵产物滤液。
[0023]在一些实施方式中，均质的方法为：超声破碎均质。
[0024]在一些实施方式中，超声的功率为300～500W(优选为400W)。
[0025]在一些实施方式中，超声破碎均质的超声时间为：超声2s，停7s，按照上述条件循环超声，超声时间为12～20min(优选为15min)。
[0026]在一些实施方式中，所述酿酒酵母发酵产物滤液在护肤品中的质量含量大于3％(比如说大于4％、大于6％、大于7％、大于8％、大于10％、大于15％、大于20％或为5～20％)。
[0027]在一些实施方式中，所述护肤品为保湿水、精华、乳液、眼霜、面霜等。
[0028]对于18
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22岁女性的一次问卷调查中显示，90.91％的调查对象有补水保湿与修复皮肤状态的需求，继续调查这部分女性最常使用的产品，结果显示54.55％的女性正在使用保湿水，因为保湿水的肤感较乳液来说更清透。本专利技术中还提供了一种保湿水，所述保湿水的原料包括8～12wt％的酿酒酵母发酵液均质、过滤灭菌后的酿酒酵母发酵产物滤液。
[0029]在一些实施方式中，所述保湿水的原料包括，按质量分数计，
[0030]酿酒酵母发酵产物滤液8～12％；
[0031]油相：
[0032][0033][0034]水相：
[0035][0036]上述保湿水的制备方法，包括以下步骤：
[0037](1)将保湿水油相中的原料加热至80～90℃，维持20～40min，然后冷却至60～70℃，得到料A，备用；
[0038](2)将保湿水水相中的原料加热至80～90℃，维持20～40min，然后冷却至70～80℃，然后加料A缓慢加入水相中进行搅拌，当温度降至40～45℃时加入酿酒酵母发酵产物滤液，继续搅拌10～30min，开启均质机均质1～10min，降温、然后送检待出料得到保湿水。
[0039]有益效果：
[0040]1.本专利技术中的酿酒酵母发酵液对表皮葡萄球菌等常见菌生长无影响，而对金黄色葡萄球菌和铅黄肠球菌等致病菌本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种酿酒酵母发酵液，其特征在于，所述酿酒酵母发酵液由酿酒酵母形成的分离菌株在YPD发酵培养基内进行深层发酵震荡培养。2.根据权利要求1所述的酿酒酵母发酵液，其特征在于，酿酒酵母形成的分离菌株的分离方法包括以下步骤：将含有啤酒渣的无菌水经平板划线、培养、筛选得到菌落。3.根据权利要求1或2所述的酿酒酵母发酵液，其特征在于，YPD发酵培养基的培养基成分为蛋白胨20.0g/L、酵母提取物10.0g/L、葡萄糖20.0g/L。4.根据权利要求3所述的酿酒酵母发酵液，其特征在于，YPD发酵培养基培养制备完成后经过115℃持续高温湿热灭菌15min后，方可使用。5.根据权利要求2所述的酿酒酵母发酵液，...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏韬，陈娟，陈爱媚，梁锦明，万雨昕，张同宇，
申请(专利权)人：广州君研生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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