输尿管芽顶端部细胞的分离方法技术

本文提供从包含输尿管芽顶端部细胞的细胞、组织或类器官分离输尿管芽顶端部细胞的方法，其包括使包含输尿管芽顶端部细胞的细胞、组织或类器官与极低密度脂蛋白受体(VLDL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】输尿管芽顶端部细胞的分离方法


[0001]本专利申请主张关于日本国专利申请第2019
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181593号的优先权，其全部在此通过参考并入本说明书中。
[0002]本申请涉及分离输尿管芽顶端部细胞的方法。

技术介绍

[0003]现在，日本慢性肾脏病(CKD)的患者数估计约1300万人，被称为新的国民病。对慢性肾脏病的根治的治疗方法少，因其进展需要透析疗法的末期慢性肾功能衰竭患者为33万人以上，成为不仅是医学上的、也是医学经济上的大问题。作为包括末期慢性肾功能衰竭的慢性肾脏病的根治疗法，列举肾移植，但由于严重的供体器官不足，为供不应求的状态。
[0004]肾脏来源于作为胚胎早期的组织的间介中胚层。在脊椎动物中，由间介中胚层形成前肾、中肾、后肾的三个肾脏，在哺乳动物中，后肾成为成体的肾脏。后肾通过间充质和输尿管芽这两个组织的相互作用而发生(非专利文献1和2)。进一步，近年来，报告了间介中胚层分为前端和后端两个部位，输尿管芽从前端间介中胚层发生，间充质从后端间介中胚层发生(非专利文献3)。
[0005]输尿管芽是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.从包含输尿管芽顶端部细胞的细胞、组织或类器官分离输尿管芽顶端部细胞的方法，其包括：(1
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1)使包含输尿管芽顶端部细胞的细胞、组织或类器官与极低密度脂蛋白受体(VLDL
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R)结合物质接触的步骤，和(1
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2)以所述结合物质为指标分离输尿管芽顶端部细胞的步骤。2.权利要求1所述的方法，其中，VLDL
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R结合物质是标记的极低密度脂蛋白(VLDL)。3.权利要求2所述的方法，其中，所述标记是荧光标记。4.权利要求1～3的任一项所述的方法，其中，包含输尿管芽顶端部细胞的细胞、组织或类器官是输尿管芽样类器官。5.权利要求1～4的任一项所述的方法，其中，包含输尿管芽顶端部细胞的细胞、组织或类器官从多能干细胞分化诱导。6.权利要求5所述的方法，其中，多能干细胞是iPS细胞。7.权利要求1～6的任一项所述的方法，其中，包含输尿管芽顶端部细胞的细胞、组织或类器官来自灵长类。8.权利要求1～7的任一项所述的方法，其中，包含输尿管芽顶端部细胞的细胞、组织或类器官来自人。9.输尿管芽顶端部细胞集落的制备方法，其包括：用权利要求1～8的任一项所述的方法分离输尿管芽顶端部细胞，进一步(2)用包含胶质细胞源性神经营养因子、成纤维细胞生长因子、视黄酸受体激动剂、GSK3β抑制剂和Yes
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相关蛋白(YAP)活性抑制剂的培养基培养所述输尿管芽顶端部细胞的步骤。10.权利要求9所述的方法，其中，在(2)的步骤中，成纤维细胞生长因子是FGF1，视黄酸受体激动剂是TTNPB，GSK3β抑制剂是CHIR99021，Yes
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相关蛋白(YAP)活性抑制剂是Thiazovivin。11.权利要求9或10所述的方法，其中，在(2)的步骤中，培养基进一步包含TGFβ信号抑制剂。12.权利要求11所述的方法，其中，TGFβ信号抑制剂是A83
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01。13.权利要求9～12的任一项所述的方法，其中，在(2)的步骤后，包括传代培养得到的输尿管芽顶端部细胞集落的步骤。14.输尿管芽样类器官的制备方法，其包括：用权利要求9～13的任一项所述的方法得到输尿管芽顶端部细胞集落，进一步(3)用包含Wnt信号传导活化因子、BMP抑制剂、成纤维细胞生长因子、视黄酸受体激动剂、和胶质细胞源性神经营养因子的培养基培养所述输尿管芽顶端部细胞集落，重建输尿管芽样类器官的步骤。15.输尿管芽样类器官的制备方法，其包括：提供输尿管芽顶端部细胞集落的步骤，和(3)用包含Wnt信号传导活化因子、BMP抑制剂、成纤维细胞生长因子、视黄酸受体激动剂、和胶质细胞源性神经营养因子的培养基培养所述输尿管芽顶端部细胞集落，重建输尿管芽样类器官的步骤。16.权利要求14或15所述的方法，其中，在(3)的步骤中，Wnt信号传导活化因子是Wnt...

【专利技术属性】
技术研发人员：长船健二，前伸一，两坂诚，
申请(专利权)人：国立大学法人京都大学，
类型：发明
国别省市：