含CpGODN的吸附型疫苗的解吸附组合物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种含CpG ODN的吸附型疫苗的解吸附组合物，其中，所述解吸附组合物包括磷酸钾盐、M199培养基、氯化镁、Triton

【技术实现步骤摘要】
含CpG ODN的吸附型疫苗的解吸附组合物及其应用


[0001]本专利技术涉及含佐剂疫苗效力的测定，具体是关于一种含CpG ODN的吸附型疫苗中的解吸附组合物及含CpG ODN的吸附型疫苗中抗原效力测定方法。

技术介绍

[0002]佐剂是多种人用疫苗的重要成分，疫苗中加入佐剂可以增强机体对抗原的免疫应答。铝佐剂是开发最早、应用最广的疫苗佐剂。铝佐剂对抗原的吸附受其自身理化性质、溶液的离子强度和抗原的浓度等多种因素影响，其通过抗原储库效应、刺激树突状细胞成熟和T细胞分化、促进危险信号分子释放等来增强免疫应答。
[0003]CpG ODN（CpG oligonucleotide）在新型佐剂中较有代表性，能与细胞膜上的Toll样受体结合，诱导多种细胞因子产生。CpG ODN与TLR9结合后，通过MYD88、IRAK和TRAF6最终激活多种转录因子，包括NF
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κB、AP1、CEBP和CREB。这些转录因子直接上调细胞因子和趋化因子基因表达。CpG ODN通过激活这些细胞启动免疫刺激，最终导致自然杀伤细胞（NK）间接成熟、分化本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含CpG ODN的吸附型疫苗的解吸附组合物，其特征在于，所述解吸附组合物包括磷酸钾盐、M199培养基、氯化镁、Triton
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100。2.根据权利要求1所述的解吸附组合物，其特征在于，所述磷酸钾盐为磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的组合；其中，磷酸氢二钾与磷酸二氢钾的摩尔比为1
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3:1。3.根据权利要求1或2所述的解吸附组合物，其特征在于，当所述解吸附组合物以水溶液形式作为解吸附试剂存在时，所述解吸附试剂中磷酸钾盐的终摩尔浓度为0.6M
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2.0M，所述氯化镁最终摩尔浓度为0.1M
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0.8M，M199培养基的终体积浓度为10%
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60%；所述Triton
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100在解吸附试剂中的最终体积浓度为0.1%
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3%。4.根据权利要求3所述的解吸附组合物，其特征在于，所述解吸附试剂中磷酸钾盐的终摩尔浓度为0.6M
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1.2M，所述氯化镁最终摩尔浓度为0.1M
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0.4M，M199培养基的终体积浓度为20%
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50%；所述Triton
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100在解吸附试剂中的最终体积浓度为0.5%
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1%。5.一种用于含CpG ODN佐剂的吸附型疫苗的试剂盒，包含权利要求1
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4任一项所述的解吸附组合物。6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，还包含双抗体夹心ELISA法检测疫苗效力的通用试剂和反应缓冲液。7.一种含CpG ODN佐剂的吸附型疫苗的解吸附方法，该方法包括：配制权利要求3或4所述的解吸附试剂；将参考品及样品与解吸附试剂以体积比1:（1
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5）混合，于4℃
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28℃孵育20
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120min，孵育过程中每10
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20min颠倒混匀一次；将获得的混合物离心，离心程序为2000
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7000rpm，离心时间为10min

【专利技术属性】
技术研发人员：杨晓明，王辉，赵玉秀，梁宏阳，郑晓彤，闫君宇，杨兆娜，于守智，李为栋，杨蓉，
申请(专利权)人：北京生物制品研究所有限责任公司，
类型：发明
国别省市：