一种全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液及其制备方法技术

一种全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液及其制备方法，其特征在于：该清洗缓冲液是由配制好的清洗缓冲液A然后再溶解于纯化水中形成，其中清洗缓冲液A的主要成分包括：三(羟甲基)氨基甲烷，氯化钠，吐温

【技术实现步骤摘要】
一种全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液及其制备方法


[0001]本申请涉及全自动免疫组化染色机
，具体是指一种全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液及其制备方法。
技术背景
[0002]免疫组化技术近年来得到迅速发展，并随着全自动免疫组化染色仪的应用推广，对于染色质量的要求也日益提高。其中，样本清洗在整个免疫组化染色过程中有着重要的作用，清洗效果的好坏也可直接决定着最终染色结果的质量。全自动染色仪因为其自身的结构特点，其用于盛放清洗缓冲液的容器体积较小，不能像手工操作清洗样本那样把组织切片完全浸泡在清洗缓冲液中的条件，并且全自动免疫组化染色仪在样本清洗时需要在较小使用量下进行，因此清洗液有效清洗区域进一步减少了，使得其清洗效果相对较差，而且也会影响后续免疫组化染色的效果。因此如何在全自动免疫组化染色机上正常完成样本清洗过程是全自动免疫组化染色仪必须解决的一个技术问题。
[0003]现有一些进口全自动免疫组化染色机的清洗缓冲液其进口注册配方为：Tris缓冲盐溶液，表面活性剂，0.1％叠氮化钠等，用于样本的清洗，以及向整个系统提供缓冲环境。然而，由于叠氮化钠是公知的危险化学试剂，在储存、运输、使用方面存在诸多不便，因此，寻找替代的试剂配方极为重要。
[0004]如果要较好地解决在全自动免疫组化染色机上正常完成样本清洗过程的技术问题，则可通过清洗缓冲液的改进实现。将改进的清洗缓冲液于全自动免疫组化染色机上，一方面，该改进的清洗缓冲液需要在较少用量的情况下将组织切片完全浸渍并完成较好的进行清洗，即改进的清洗缓冲液应具有较好均一的浸润性；另一方面，改进的清洗缓冲液稳定使用问题，无论在冷藏条件还是室温条件，都不能影响其功能，其pH保持稳定，且都能稳定保存使用，即改进的清洗缓冲液无论冷藏还是室温其pH具有较好的稳定性且具有较好的抗菌保存功能；最后，改进的清洗缓冲液的制备组方，尤其是避免叠氮化钠的使用。
[0005]可见，进一步的研究可用于全自动免疫组化染色机清洗缓冲液的制备组方，尤其是避免叠氮化钠的使用，并保证检测结果的一致性，稳定性和准确性的清洗缓冲液，以及实现更加优异的提高染色效果与清洗效果，仍然是亟待解决的技术问题。

技术实现思路

[0006]本申请针对现有技术的上述不足，提供一种能够避免叠氮化钠的使用，并保证检测结果的一致性、稳定性和准确性，还能提高染色效果与清洗效果的全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液。
[0007]为了解决上述技术问题，本申请采用的技术方案为：一种全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液，该清洗缓冲液是由配制好的清洗缓冲液A然后再溶解于纯化水中形成，且清洗缓冲液A的主要成分包括：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)，氯化钠，吐温
‑
20和ProClin 950，清洗缓冲液A的pH值范围为pH 7.3～7.5。
[0008]进一步，本申请上述的全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液，该清洗缓冲液中清洗缓冲液A与纯化水的体积用量比为1:9(如100mL清洗缓冲液A对应配置900mL的纯化水)；该清洗缓冲液pH值范围为pH 7.3～7.5。
[0009]进一步的，本申请上述的清洗缓冲液A，每1000mL该清洗缓冲液A包括：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)11.0～12.5g，氯化钠75.0～90.0g，吐温
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203.5～6.0mL，ProClin 9502.5～5.0mL和余量的纯化水，pH值范围为pH 7.3～7.5。
[0010]进一步的，本申请上述的清洗缓冲液A，每1000mL该清洗缓冲液A包括：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)11.5～12.5g，氯化钠80.0～90.0g，吐温
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204.5～6.0mL，ProClin 9503.0～5.0mL和余量的纯化水，pH值范围为pH 7.3～7.5。
[0011]进一步的，本申请上述的清洗缓冲液A，每1000mL该清洗缓冲液A包括：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)12.0～12.5g，氯化钠82.0～90.0g，吐温
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205.0～6.0mL，ProClin 9503.5～5.0mL和余量的纯化水，pH值范围为pH 7.3～7.5。
[0012]进一步的，本申请上述的清洗缓冲液A，每1000mL该清洗缓冲液A包括：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)12.2～12.5g，氯化钠85.0～90.0g，吐温
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205.5～6.0mL，ProClin 9504.0～5.0mL和余量的纯化水，pH值范围为pH 7.3～7.5。
[0013]本申请还提供一种上述清洗缓冲液A的制备方法，具体的制备步骤包括：
[0014](1)按配比称取三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)，用纯化水溶解后，加入配方量的氯化钠，完全溶解后添加吐温
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20，完全溶解后再添加ProClin 950；
[0015](2)将步骤(1)获得的溶液用纯化水定容至额定容量，获得清洗缓冲液；
[0016](3)调节步骤(2)清洗缓冲液的pH值，使其pH值在pH7.3～7.5范围内即得到清洗缓冲液A。
[0017]优选的，步骤(3)调节pH值使用1M的NaOH溶液。
[0018]优选的，步骤(3)调节pH值使用1M的HCl溶液。
[0019]本申请还提供一种上述清洗缓冲液制备方法，具体包括：将获得的清洗缓冲液A和纯化水按1:9的体积比例各量取相应的体积，然后将清洗缓冲液A加入至纯水中，混匀，测量pH值在pH7.3～7.5范围内即可。
[0020]本申请的优点和有益效果：
[0021]1.在本申请首次在全自动免疫组化染色仪的清洗缓冲液中引入了ProClin 950，其是一种高效生物防腐剂，ProClin 950的加入，可以有效地控制体外诊断试剂中微生物的生长，使清洗缓冲液无论在冷藏条件还是室温条件下，能长期稳定地保存与使用；此外，ProClin 950不会对诊断试剂中的关键酶与底物的结合速率产生影响，比如：辣根过氧化酶(HRP)，碱性磷酸酶(AP)，且也不会对抗体的结合产生影响；而且，更为重要的是ProClin 950的加入替代了传统与全自动免疫组化染色机适配的清洗液中叠氮化钠的使用，从而大大增加了清洗缓冲液的安全性。
[0022]2.在本申请的清洗缓冲液中，以三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)的水溶液为缓冲液；Tris为弱碱，在室温(25℃)下，它的pKa为8.1；根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间，Tris碱的水溶液pH在10.5左右，一般加入盐酸以调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液；此外，本申请通过加入氯化钠作为pH调节剂、与Tris相互协同作用，氯化钠能有效的参与溶液的酸碱平衡调节，使得清洗缓冲液的pH更加稳定，同时还可以
有效的维持组织细胞外液的渗透压、从而防止组织样本的破坏。
[0023]3.在本申请的清洗缓本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液，其特征在于：该清洗缓冲液是由配制好的清洗缓冲液A然后再溶解于纯化水中形成，其中清洗缓冲液A的主要成分包括：三(羟甲基)氨基甲烷，氯化钠，吐温
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20和ProClin 950，且清洗缓冲液A的pH值范围为pH 7.3～7.5。2.根据权利要求1所述的全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液，其特征在于：所述的清洗缓冲液A与纯化水的体积用量比为1:9，该清洗缓冲液的pH7.3～7.5。3.根据权利要求2所述的全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液，其特征在于：所述的清洗缓冲液A，每1000mL该清洗缓冲液A包括：三(羟甲基)氨基甲烷)11.0～12.5g，氯化钠75.0～90.0g，吐温
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20 3.5～6.0mL，ProClin 950 2.5～5.0mL和余量的纯化水，pH值范围为pH 7.3～7.5。4.根据权利要求3所述的全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液，其特征在于：所述的清洗缓冲液A，每1000mL该清洗缓冲液A包括：三(羟甲基)氨基甲烷11.5～12.5g，氯化钠80.0～90.0g，吐温
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20 4.5～6.0mL，ProClin 950 3.0～5.0mL和余量的纯化水，pH值范围为pH 7.3～7.5。5.根据权利要求4所述的全自动免疫组化染色机适配的清洗缓冲液，其特征在于：所述的清洗缓冲液A，每1000mL该清洗缓冲液A包括：三(羟甲基)氨基甲烷12.0～12.5g，氯化钠82.0～90.0g，吐温
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【专利技术属性】
技术研发人员：沈雯，徐秀芬，
申请(专利权)人：浙江莱阅病理诊断科技有限公司，
类型：发明
国别省市：