一种全自动免疫组化染色机适配的高pH抗原修复缓冲液及其制备方法技术

一种全自动免疫组化染色机适配的高pH抗原修复缓冲液及其制备方法，其特征在于：该抗原修复缓冲液的原料主要包括：三(羟甲基)氨基甲烷，乙二胺四乙酸二钠盐二水，吐温

【技术实现步骤摘要】
一种全自动免疫组化染色机适配的高pH抗原修复缓冲液及其制备方法


[0001]本申请涉及全自动免疫组化染色机
，具体是指一种全自动免疫组化染色机适配的高pH(pH8.9～9.1)抗原修复缓冲液及其制备方法。
技术背景
[0002]免疫组化技术近年来得到迅速发展，并随着全自动免疫组化染色仪的应用推广，对于染色质量的要求也日益提高。其中，抗原修复在整个免疫组化染色过程中有着极其重要的作用，修复条件的好坏直接决定着最终染色结果的质量。全自动染色仪因为其自身的结构特点，其用于盛放修复液的容器体积较小，不能像手工修复那样把组织切片完全浸泡在修复液中，并且全自动免疫组化染色仪在抗原修复时需要在较高的温度(100℃左右)下进行，因此修复液容易挥发，进一步减少了修复液的体积，使得其修复效果相对较差，而且也严重影响了后续免疫组化染色的效果。因此如何在全自动免疫组化染色机上正常完成抗原修复过程是全自动免疫组化染色仪必须解决的一个技术问题。
[0003]如果要较好地解决在全自动免疫组化染色机上正常完成抗原修复过程的技术问题，则可通过抗原修复缓冲液的改进来实现。将改进的抗原修复液于全自动免疫组化染色机上，一方面，该改进的抗原修复缓冲液需要有效地控制体外诊断试剂中微生物的生长，使抗原修复缓冲液无论在冷藏条件还是室温条件下，能长期稳定地保存与使用；而且还要求抗原修复缓冲液的成分不会对诊断试剂中的关键酶与底物的结合速率产生影响；此外，该改进的抗原修复缓冲液需要在较少用量的情况下将组织切片完全浸渍并完成较好的修复，即改进的抗原修复缓冲液应具有较好均一的浸润性；另一方面，需要提高改进抗原修复缓冲液的沸点，使其在较高温度下也不容易挥发，避免导致组织切片发生干化情况，而一旦发生干化，组织切片的抗原就会变为不可逆转的破坏而无法修复；最后，改进的抗原修复缓冲液稳定使用问题，即改进的抗原修复缓冲液无论冷藏还是室温其pH具有较好的稳定性且具有较好的抗菌保存功能。

技术实现思路

[0004]本申请针对现有技术的上述不足，提供一种有效地控制体外诊断试剂中微生物的生长，使抗原修复缓冲液无论在冷藏条件还是室温条件下，能长期稳定地保存与使用，具有更好的浸润性，其在较高温度下不容易挥发，避免导致组织切片发生干化情况，其pH具有较好的稳定性且具有较好的抗菌保存功能的全自动免疫组化染色机适配的高pH抗原修复缓冲液。
[0005]为了解决上述技术问题，本申请采用的技术方案为：一种全自动免疫组化染色机适配的高pH抗原修复缓冲液，该抗原修复缓冲液的原料主要包括：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)，乙二胺四乙酸二钠盐二水(EDTA)，吐温
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20，丙三醇和ProClin950；且该修复缓冲液的pH值范围为pH8.9～9.1。
[0006]进一步的，上述的高pH抗原修复缓冲液，每1000mL的该高pH抗原修复缓冲液包括：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)1.10～1.25g，乙二胺四乙酸二钠盐二水(EDTA)0.31～0.41g，吐温
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20 0.35～0.6mL，丙三醇150～550mL，ProClin950 0.25～0.5mL和余量的纯化水，且该抗原修复缓冲液的pH值范围为pH8.9～9.1。
[0007]进一步的，上述的高pH抗原修复缓冲液，每1000mL的该高pH抗原修复缓冲液包括：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)1.15～1.25g，乙二胺四乙酸二钠盐二水(EDTA)0.35～0.41g，吐温
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20 0.45～0.6mL，丙三醇300～550mL，ProClin950 0.35～0.5mL和余量的纯化水，该抗原修复缓冲液的pH值范围为pH8.9～9.1。
[0008]进一步的，上述的高pH抗原修复缓冲液，每1000mL的该高pH抗原修复缓冲液包括：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)1.20～1.25g，乙二胺四乙酸二钠盐二水(EDTA)0.38～0.41g，吐温
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20 0.5～0.6mL，丙三醇400～550mL，ProClin950 0.4～0.5mL和余量的纯化水，该抗原修复缓冲液的pH值范围为pH8.9～9.1。
[0009]进一步的，上述的高pH抗原修复缓冲液，每1000mL的该高pH抗原修复缓冲液包括：三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)1.22～1.25g，乙二胺四乙酸二钠盐二水(EDTA)0.40～0.41g，吐温
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20 0.55～0.6mL，丙三醇450～550mL，ProClin950 0.45～0.5mL和余量的纯化水，该抗原修复缓冲液的pH值范围为pH8.9～9.1。
[0010]本申请还提供一种上述高pH抗原修复缓冲液的制备方法：具体步骤包括：
[0011](1)按配比称取三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)和乙二胺四乙酸二钠盐二水(EDTA)，然后用纯化水将三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)和乙二胺四乙酸二钠盐二水(EDTA)溶解；
[0012](2)向着步骤(1)溶解后溶液中加入配方量的丙三醇，完全溶解后添加配方量的吐温
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20，溶解后再添加ProClin950，最后用纯化水定容至额定容量；
[0013](3)然后调节抗原修复缓冲液的pH值，使其pH值在pH8.9～9.1范围内即可。
[0014]优选的，所述的调节抗原修复缓冲液的pH值使用1M的NaOH溶液进行调节。
[0015]优选的，所述的调节抗原修复缓冲液的pH值使用1M的HCl溶液进行调节。
[0016]本申请的优点和有益效果：
[0017]1.在本申请的抗原修复缓冲液中，采用三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)的水溶液作为缓冲液；因为Tris为弱碱，在室温(25℃)下，它的pKa为8.1；根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间；Tris碱的水溶液pH在10.5左右，一般加入盐酸以调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液，并且同时加入乙二胺四乙酸二钠盐二水(EDTA)作为pH调节剂，使得缓冲液的pH更加稳定，同时也作为稳定剂，可以减慢反应，保持化学平衡，降低表面张力。
[0018]2.在本申请的抗原修复缓冲液中，采用吐温
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20作为温和的表面活性剂，具有复性抗原的作用，可提高特异性的识别能力，降低抗体的非特异性结合；同时通过加入合适比例的丙三醇和吐温
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20，使其与组织切片的亲和性较好(浸润性好)，且使缓冲液中的物质能均匀在溶液中分散，获得的修复液具有较好的浸润性、抗原修复缓冲液分布均一的优点。
[0019]3.在本申请的抗原修复缓冲液中，采用丙三醇可与水以任何比例溶解，作为一种混合溶剂，能够提高抗原修复缓冲液液的沸点，防止其在高温(100度左右)条件下过度挥发，而且其对抗原修复缓冲液中的活性成分和pH值的影响较小，且与组织切片的亲和性较好(浸润性好)，毒性低，不会对组织切片的修复造成过多影响。同时也具有延长保质期的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种全自动免疫组化染色机适配的高pH抗原修复缓冲液，其特征在于：该抗原修复缓冲液的原料主要包括：三(羟甲基)氨基甲烷，乙二胺四乙酸二钠盐二水，吐温
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20，丙三醇和ProClin 950；且该修复缓冲液的pH值范围为pH8.9～9.1。2.根据权利要求1所述的全自动免疫组化染色机适配的高pH抗原修复缓冲液，其特征在于：每1000mL的该高pH抗原修复缓冲液包括：三(羟甲基)氨基甲烷1.10～1.25g，乙二胺四乙酸二钠盐二水0.31～0.41g，吐温
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20 0.35～0.6mL，丙三醇150～550mL，ProClin950 0.25～0.5mL和余量的纯化水，且该抗原修复缓冲液的pH值范围为pH8.9～9.1。3.根据权利要求2所述的全自动免疫组化染色机适配的高pH抗原修复缓冲液，其特征在于：三(羟甲基)氨基甲烷1.15～1.25g，乙二胺四乙酸二钠盐二水0.35～0.41g，吐温
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20 0.45～0.6mL，丙三醇300～550mL，ProClin950 0.35～0.5mL和余量的纯化水，该抗原修复缓冲液的pH值范围为pH8.9～9.1。4.根据权利要求3所述的全自动免疫组化染色机适配的高pH抗原修复缓冲液，其特征在于：每1000mL的该高pH抗原修复缓冲液包括：三(羟甲基)氨基甲烷1.20～1.25g，乙二胺四乙酸二钠盐二水0.38～0.41g，吐温
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200.5～0....

【专利技术属性】
技术研发人员：沈雯，徐秀芬，
申请(专利权)人：浙江莱阅病理诊断科技有限公司，
类型：发明
国别省市：